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2017-10-07 10:04:46
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- 現(xiàn)在用流式細(xì)胞檢測病毒在細(xì)胞內(nèi)的定量,遇到幾個問題,望各位高人指點試驗在接毒36小時后進(jìn)行,用含有EDTA的胰酶消化的細(xì)胞,細(xì)胞是單個的,不知道會不會破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)?病毒應(yīng)該在胞漿內(nèi)分布,所以進(jìn)行了固定和透膜,分別用的0.5%的多聚甲醛和0.2%的PBST,單... 現(xiàn)在用流式細(xì)胞檢測病毒在細(xì)胞內(nèi)的定量,遇到幾個問題,望各位高人指點試驗在接毒36小時后進(jìn)行,用含有EDTA的胰酶消化的細(xì)胞,細(xì)胞是單個的,不知道會不會破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)?病毒應(yīng)該在胞漿內(nèi)分布,所以進(jìn)行了固定和透膜,分別用的0.5%的多聚甲醛和0.2%的PBST,單抗和FITC標(biāo)價的二抗都是用PBS稀釋的,二抗按照說明書稀釋,應(yīng)該沒問題吧?Z后結(jié)果:接毒組陽性對照熒光百分率只有40%,文獻(xiàn)上都到90以上,有什么方法改進(jìn)? 展開
2018-11-20 12:00:43
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