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問(wèn)答社區(qū)

質(zhì)譜分析中,有哪些是實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要注意的?

瑜憶Minnie 2015-12-11 21:59:58 505  瀏覽
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全部評(píng)論(1條)

  • 瘋狗* 2015-12-12 00:00:00
    看你是學(xué)什么專業(yè)的。如果想在儀器行業(yè)有作為,你需要工程師背景。質(zhì)譜儀的維修在美國(guó)和歐洲都是非常搶手的。在ZG,是說(shuō)話現(xiàn)在水平還很落后。如果你可以維修使用儀器,是非常不一樣的水準(zhǔn)。在國(guó)內(nèi)的很多大學(xué),我知道很多教授是不讓學(xué)生動(dòng)手拆卸儀器的。都會(huì)請(qǐng)專人去修理。質(zhì)譜儀市場(chǎng)不僅沒(méi)有飽和,而且空間還很大。 質(zhì)譜儀的離子化過(guò)程,氣流設(shè)計(jì),電路設(shè)計(jì),實(shí)際上更加偏向物理。我們實(shí)驗(yàn)室的化學(xué)專業(yè)背景的博士后,明顯不如有物理和工程背景的人上手快。遇到問(wèn)題也沒(méi)有辦法維護(hù)。目前有很多年輕的質(zhì)譜儀廠商正在崛起,到現(xiàn)在,也沒(méi)有單獨(dú)的一家把這個(gè)行業(yè)敢說(shuō)怎么樣的。 我認(rèn)為這是非常有前途的方向。

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工程師在使用測(cè)試儀器的時(shí)候首先應(yīng)該要了解測(cè)量?jī)x器的基本原理才能正確的使用儀器,那么示波器的基本工作原理是什么呢?使用中需要注意的事項(xiàng)又有哪些呢?下面由安泰測(cè)試為大家介篩一些示波器的基本原理以及使用中的注意事項(xiàng):

一、示波器--原理簡(jiǎn)介

模擬示波器:在本質(zhì)上,模擬示波器工作方式是直接測(cè)量信號(hào)電壓,并通過(guò)從左到右穿過(guò)示波器屏幕的電子束在垂直方向描繪電壓。

二、示波器--原理簡(jiǎn)介

與模擬示波器不同,數(shù)字示波器通過(guò)模數(shù)轉(zhuǎn)換器(ADC)把被測(cè)電壓轉(zhuǎn)換為數(shù)字信息。它捕獲的是波形的一系列樣值(采樣定理),并對(duì)樣值進(jìn)行存儲(chǔ),處理。隨后,數(shù)字示波器在顯示屏上重構(gòu)波形。

三、示波器--原理簡(jiǎn)介

數(shù)字存儲(chǔ)示波器(DSO):組成DSO的一些子系統(tǒng)與模擬示波器的一些部分相似。但是,DSO包含更多的數(shù)據(jù)處理子系統(tǒng),它能夠收集顯示整個(gè)波形的數(shù)據(jù),并以數(shù)字形式表示波形信息。這樣,利用示波器本身或外部計(jì)算機(jī),方便對(duì)信號(hào)進(jìn)行分析、存檔、打印和其他的處理。

從捕獲信號(hào)到在屏幕上顯示波形,DSO采用串行的處理體系結(jié)構(gòu)。

四、示波器--原理簡(jiǎn)介

數(shù)字熒光示波器(DPO):DPO的diyi階段(輸入)與模擬示波器相似,第二階段與DSO相似(ADC)。但是,在模數(shù)轉(zhuǎn)換后,DPO與原來(lái)的示波器相比就有顯著的不同之處。

DPO使用并行體系結(jié)構(gòu)來(lái)捕獲、顯示和分析信號(hào)。

五、示波器--特別注意:浮地測(cè)量

示波器的通道地、機(jī)殼都通過(guò)AC輸入地線與大地相連,在測(cè)量浮地目標(biāo)(如電源輸出端,相對(duì)大地電平不可預(yù)計(jì))時(shí),可能會(huì)形成回路燒毀探頭/示波器。

通過(guò)斷開(kāi)與大地的連接(使用2芯電源線/隔離變壓器),將示波器“浮地”。這種做法不但會(huì)導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果不準(zhǔn)確,會(huì)使示波器機(jī)殼帶電,容易造成人身安全問(wèn)題。

六、示波器--浮地測(cè)量解決方法

使用差分探頭,可以通過(guò)大部分示波器進(jìn)行浮地測(cè)量。但差分 探頭仍有仍有一條電阻路徑接地,存在很小的泄露電流;

“A-B”測(cè)量(偽差分測(cè)量):使用傳統(tǒng)示波器和兩個(gè)相同型號(hào)的無(wú)源電壓探頭分別測(cè)量?jī)蓚€(gè)測(cè)試點(diǎn),兩個(gè)探頭的地線接到大地。CH1-CH2即可得到被測(cè)兩點(diǎn)之間的電壓波形;

選用TPS2000B/THS3000系列隔離輸入示波器。提供真正的、完整的通道到通道和通道到電源線隔離能力。在使用隔離輸入示波器進(jìn)行浮地測(cè)量時(shí),必須使用專門實(shí)際的無(wú)源探頭。

以上內(nèi)容轉(zhuǎn)載于安泰測(cè)試網(wǎng),如果大家在使用示波器過(guò)程中有什么問(wèn)題歡迎咨詢安泰測(cè)試。


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2013-08-14 07:44:27 537 1
做ELISA實(shí)驗(yàn)需要注意哪些問(wèn)題?

  做ELISA實(shí)驗(yàn)需要注意哪些問(wèn)題?

  Elisa實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該注意的問(wèn)題,包括樣品稀釋、試劑盒平衡、樣品和試劑的混勻、加樣、溫育等問(wèn)題.Elisa試劑盒有著準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)的諸多優(yōu)點(diǎn),深受廣大用戶朋友的喜愛(ài).然而,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,也需要注意很多問(wèn)題.對(duì)此,上海哈靈生物提醒你您,需要遵守一些規(guī)則,才能更好地進(jìn)行實(shí)驗(yàn),取得較好的實(shí)驗(yàn)成果.

  Elisa方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定.在Elisa測(cè)定中影響因素較多,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果.引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:標(biāo)本因素;試劑因素;操作因素.

  1.樣品稀釋

  一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過(guò)大量試驗(yàn)確定,以保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性.酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng),如果血清不稀釋,不可避免會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng),出現(xiàn)假陽(yáng)性.

  2.試劑盒平衡

  Elisa中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗(yàn)前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上.平衡時(shí)間太短會(huì)造成試劑混勻不夠,樣品孵育時(shí)間相對(duì)縮短,ELISA反應(yīng)不夠充分.冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘.

  3.樣品和試劑的混勻

  在稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗(yàn)的均一性.

  4.加樣

  加樣是一項(xiàng)很重要的步驟.加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡.加樣太快,無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性.加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附.

  5.溫育

  溫育是ELISA測(cè)定中影響測(cè)定成敗為關(guān)鍵的一個(gè)因素.ELISA作為一種固相免疫測(cè)定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時(shí)間.

  6.洗板

  固相免疫測(cè)定技術(shù)是一種非均相免疫測(cè)定技術(shù),需以洗滌操作將特異結(jié)合于固相的抗原或抗體與反應(yīng)溫育過(guò)程中吸附的非特異成份分離開(kāi)來(lái),以保證ELISA測(cè)定的特異性.洗液盡量不要溢出孔外;加洗液后要靜置1分鐘,甩去板孔中洗液后,一定要大力拍干;及時(shí)更換吸水紙,尤其是拍過(guò)酶標(biāo)記物的吸水紙一定要棄去,否則可能影響試驗(yàn)結(jié)果.

  7.顯色

  顯色一定要控制時(shí)間,根據(jù)試劑盒說(shuō)明操作即可.一般來(lái)說(shuō),顯色時(shí)間過(guò)短,結(jié)果偏低;顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng),空白增高或者非特異性顯色增加.

  8.比色

  比色要注意波長(zhǎng)的選擇.以TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用,而前者比色波長(zhǎng)為450nm,后者為492nm,濾光片需根據(jù)要求隨時(shí)更換.因此,容易出現(xiàn)濾光片錯(cuò)用的問(wèn)題.

  做ELISA實(shí)驗(yàn)需要注意哪些問(wèn)題? 我司由具有行業(yè)背景和豐富市場(chǎng)經(jīng)驗(yàn)的業(yè)人士組成,于為生命科學(xué)研究域提供產(chǎn)品,為廣大科研工作者提供服務(wù)。 既能滿足研發(fā)類客戶對(duì)產(chǎn)品種類、包裝的特殊要求,也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)?;a(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。

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在進(jìn)去第二臺(tái)質(zhì)譜儀的途中,選中的寡肽通過(guò)與氮?dú)饣蛘邭鍤夥肿优鲎擦呀獬煞肿铀槠?,這些碎片被吸入第二臺(tái)質(zhì)譜儀進(jìn)行分析。裂解主要發(fā)生在寡肽中連接相繼氨基酸的肽鍵上。因此產(chǎn)生的碎... 在進(jìn)去第二臺(tái)質(zhì)譜儀的途中,選中的寡肽通過(guò)與氮?dú)饣蛘邭鍤夥肿优鲎擦呀獬煞肿铀槠?,這些碎片被吸入第二臺(tái)質(zhì)譜儀進(jìn)行分析。裂解主要發(fā)生在寡肽中連接相繼氨基酸的肽鍵上。因此產(chǎn)生的碎片代表一套大小只差一個(gè)氨基酸的肽段。這樣兩個(gè)碎片相對(duì)分子質(zhì)量差為56加被裂解掉的那個(gè)殘基R基的相對(duì)分子質(zhì)量。。。 以上是課本原話 我的問(wèn)題是1.裂解發(fā)生在相繼氨基酸的肽鍵中相繼是什么意思?相連還是分子質(zhì)量相近? 2.為什么產(chǎn)生的碎片會(huì)代表一套大小只差一個(gè)氨基酸殘基的肽段?和誰(shuí)相比?產(chǎn)生多少碎片?為什么會(huì)差一個(gè)氨基酸? 財(cái)富值為0所以沒(méi)有辦法相贈(zèng)了,非常抱歉<(_ _)>,以及非常感謝 展開(kāi)
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