背景：埃博拉病毒（EBOV）主要攻擊骨 髓細(xì)胞，其致命感染會(huì)引起大量的T細(xì)胞死亡。研究已證明，受感染細(xì)胞所產(chǎn)生的外泌體中包含的埃博拉病毒蛋白VP40導(dǎo)致了受體免疫細(xì)胞的死亡。

方法：通過(guò)克隆技術(shù)表達(dá)VP40，研究者分析了供體細(xì)胞循環(huán)、細(xì)胞外囊泡的生物發(fā)生過(guò)程和受體免疫細(xì)胞的死亡。通過(guò)激酶和染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)，研究者研究了細(xì)胞周期蛋白D1的轉(zhuǎn)錄和VP40的核定位。通過(guò)質(zhì)譜、細(xì)胞因子和蛋白質(zhì)免疫印跡實(shí)驗(yàn)，研究者檢測(cè)了細(xì)胞外囊泡的內(nèi)含物。野生型埃博拉病毒感染實(shí)驗(yàn)在生物安全等級(jí)為4級(jí)的實(shí)驗(yàn)室平臺(tái)進(jìn)行。

EVs size and concentration by Zetaview

結(jié)果：含有VP40的細(xì)胞外囊泡誘導(dǎo)了受體T細(xì)胞和單核細(xì)胞的凋亡。細(xì)胞周期蛋白D1的表達(dá)水平上調(diào)，導(dǎo)致了表達(dá)VP40的克隆加速生長(zhǎng)，而核內(nèi)的VP40蛋白會(huì)結(jié)合到細(xì)胞周期蛋白D1的啟動(dòng)子上。細(xì)胞循環(huán)被加快，會(huì)影響細(xì)胞外囊泡的生物發(fā)生過(guò)程，Z終產(chǎn)生了數(shù)量較少、但粒徑更大的細(xì)胞外囊泡。含有VP40的細(xì)胞外囊泡的內(nèi)含物富含能結(jié)合核糖核酸的蛋白和細(xì)胞因子（白細(xì)胞介素-15、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1和干擾素-γ）。Z終，受埃博拉病毒感染的細(xì)胞及其細(xì)胞外囊泡中包含了VP40、核蛋白質(zhì)和糖蛋白。

結(jié)論：細(xì)胞核內(nèi)的VP40上調(diào)了細(xì)胞周期蛋白D1的表達(dá)水平，導(dǎo)致異常的細(xì)胞周期和異常的細(xì)胞外囊泡生物發(fā)生過(guò)程。被埃博拉病毒感染的細(xì)胞所產(chǎn)生的細(xì)胞外囊泡中包含的細(xì)胞因子和埃博拉病毒蛋白引起了免疫細(xì)胞的大量死亡。

Michelle L. Pleet, et al. Ebola Virus VP40 Modulates Cell Cycle and Biogenesis of Extracellular Vesicles, The Journal of Infectious Disease, 2018:218 (Suppl 5) ? S365

來(lái)自德國(guó)Particle Metrix ZetaView所具備的單一顆粒跟蹤技術(shù)，結(jié)合經(jīng)典微電泳技術(shù)和布朗運(yùn)動(dòng)成為現(xiàn)代的分析手段。

主要應(yīng)用于外泌體，細(xì)胞囊泡，脂質(zhì)體，蛋白質(zhì)聚集，病毒樣品，納米氣泡等研究領(lǐng)域。

樣品濃度范圍：105-109粒子/ml（粒度）

大昌華嘉科學(xué)儀器部一直關(guān)注新型冠狀病毒疫情，積極探索相關(guān)研究報(bào)告，diyi時(shí)間發(fā)給大家參考。

GUV:囊泡的多種應(yīng)用

囊泡是由脂雙層卷成的球型泡封閉少量水并將其與囊泡外的水分開(kāi)。 由于與細(xì)胞膜基本相似，囊泡已廣泛用于研究脂質(zhì)雙分子層的性質(zhì)。 如此頻繁使用囊泡的另一個(gè)原因是它們相對(duì)容易制造。 脫水脂質(zhì)樣品暴露于水中會(huì)自發(fā)形成囊泡。 這些初始囊泡通常是多層的（多壁的）并且尺寸范圍從幾十納米到幾微米。

需要進(jìn)一步的方法將這些初始囊泡破碎成均勻直徑的較小的單壁囊泡，成為直徑為50nm至200nm的小單層囊泡（SUVs）。 由于人造SUV可以大量生產(chǎn)，因此它們適用于散狀材料研究，例如X射線衍射，以確定晶格間距，差分掃描量熱法以及相變。 雙極化干涉測(cè)量法可以以無(wú)標(biāo)記測(cè)定形式測(cè)量單層和多層結(jié)構(gòu)以及囊泡的插入和破壞。 還可以用熒光染料標(biāo)記囊泡，以允許基于FRET的靈敏融合測(cè)定。

盡管有這種熒光標(biāo)記，但由于它們非常小，因此通常很難對(duì)SUV進(jìn)行詳細(xì)的成像。 為了解決這個(gè)問(wèn)題，研究人員開(kāi)發(fā)出了巨大的單層囊泡（GUV）。 GUV足夠大（幾十微米），可以用傳統(tǒng)的熒光顯微鏡研究。 由于這個(gè)原因，研究人工脂質(zhì)體中的脂筏常用GUV進(jìn)行。 與有支撐的的雙層結(jié)構(gòu)相比，GUV呈現(xiàn)更“自然”的環(huán)境，因?yàn)橹車鷽](méi)有固體表面導(dǎo)致的缺陷或使蛋白質(zhì)變性。

Nanion的巨型單層囊泡制備設(shè)備

   The Vesicle Prep Pro 是一款通過(guò)電膨化制備GUV的設(shè)備。

GUV可以在以下設(shè)備中應(yīng)用:

   Port-a-Patch: 脂雙層記錄

   SURFE2R: 基于SSM的電生理

   SURFE2R: 基于SSM的電生理