目的

       為表明Sievers* 總有機碳（TOC）分析儀，對具有高分子量與復雜化學結構的化合物的回收能力，本研究中的這些化合物，通常被認為難于被非燃燒/紅外檢測的TOC儀器氧化并準確檢測。

結論

        Sievers  TOC分析儀回收標準溶液中這些化合物的能力非常好。牛血清白蛋白（BSA）、頭孢他啶（CP） 、葡聚糖硫酸酯（DS ） 、牛血紅蛋白（Heme）和人胰島素（HI），以平均95％被回收。本研究為清潔驗證的非專屬但高度靈敏的TOC分析方法提供支持，特別是本案例中的UV/過硫酸鹽方法。此應用具有巨大的價值，因為與其他方法相比，該技術具有低水平的檢測限（ppb）、分析時間快并且操作成本低。

討論

       國際醫(yī)藥科技協(xié)會（PDA）列出了用于驗證和監(jiān)控清潔的許多合適的物理、化學和生物技術，其中包括針對特殊分子的試驗以及許多非特定試驗。在查看性能比較和參考之后，PDA特別提到，“典型的清潔驗證研究可使用pH、電導率、總有機碳、洗滌劑試驗，若有多產(chǎn)品設備，則使用產(chǎn)品專用的試驗?！睉容^分析的精度、準確度、檢測限、定量限、選擇性、線性、范圍和靈敏度。進行了許多科學研究以評測性能，比如符合的通用方法：高性能液相色譜（HPLC）、薄層色譜（TLC）、UV光譜、總有機碳（ TOC ） 、酶聯(lián)免疫吸附劑測定（ELISA）、膠體電泳和電導率等常用方法。藥物殘留、賦形劑、清洗劑殘留和反應副產(chǎn)物都顯示了該方法的優(yōu)點和缺點。

       仔細選擇清潔驗證（CV）分析的儀器應是任何清潔驗證主計劃實施的一部分。TOC的使用，應該是僅有的幾種類型 之一，以其氧化方式不同為特點?？墒褂萌紵隣t、加熱的過硫酸鹽溶液或者紫外燈存在下的過硫酸鹽溶液進行氧化。Sievers Model 使用UV/過硫酸鹽氧化方法，并使用其ZL膜電導測量技術測定清潔驗證樣品的TOC濃度。

       本研究檢驗牛血清白蛋白（BSA）、頭孢他啶（CP） 、葡聚糖硫酸酯（DS ） 、牛血紅蛋白（Heme）和人胰島素（HI）在多種濃度下的回收率。表1所示為回收數(shù)據(jù)一覽表。

表1.牛血紅蛋白(Heme)、牛血清白蛋白( BSA)、頭孢他啶（CP）、葡聚糖硫酸酯(DS) 和人胰島素(HI)

       所研究化合物的平均回收率為95.9％，范圍在73％至129％之間?；衔锘厥章屎芎们以陬A料之中，然而葡聚糖硫酸酯的回收率范圍在118％至131％之間。 在此研究時，還不清楚這么高回收率的引起原因，但對化合物進行進一步查看，以便找到可能的解釋。值得注意的是，葡聚糖硫酸酯以及其他的所有化合物的回收率線性在濃度范圍內(nèi)非常好。這使得可通過應用相關的曲線方程方便地預測未知濃度的樣品。圖1是包含各化合物線性的圖，而各公式在表2中。所研究各化合物的線性非常好。

圖1：BSA、CP、DS、Heme和HI的線性總結

表2 BSA、CP、DS、Heme和HI的線性總結

小結

       當進行回收這組生物醫(yī)藥行業(yè)常用的大分子時，Sievers TOC分析儀進行得很好。表明UV/過硫酸鹽法可用于將化合物中所含的碳氧化為CO2，進行量化。 許多醫(yī)藥相關的設備已經(jīng)成為非特定但高靈敏度TOC分析儀用于清潔驗證的很好案例，請注意與其他方法相比，該技術檢測含量低（ppb）、分析時間快并且成本低，而且可檢測眾多碳基殘留。

材料和技術

試劑

1. 6M的磷酸溶液

在含有1L低TOC水的5L容量瓶中加入2 L 85％的磷酸，并用低TOC水稀釋到體積刻度。

2. 15％過硫酸銨溶液

在5L低TOC水中溶解750 g過硫酸銨。

3. 低TOC水。

材料

1. 牛血清白蛋白（BSA）：Fluka已測定@54.45%碳。

2. 人胰島素（HI）：Fluka已測定@44.1%碳。

3. 頭孢他啶（CP）：SmithKline Beecham已測定@41.5%碳。

4. 葡聚糖硫酸酯（DS）：Aldrich已測定@18.56 %碳。

5. 牛血紅蛋白（Heme）：Aldrich已測定@49.87 %碳。

6. 容量瓶和移液管（使用稀釋的Steris CIP 100?溶液清洗并使用20 次低TOC 水漂洗）。

儀器

1．Sievers 總有機碳分析儀

2．Sievers TOC 自動進樣器

參考資料

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