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- auroralqh 2012-12-11 00:00:00
- 電泳是利用物質(zhì)帶電性質(zhì)而在電場下泳動的特性從而對物質(zhì)進(jìn)行分離的技術(shù)。 影響因素主要是物質(zhì)的帶電荷的多少，物質(zhì)的分子量大小，物質(zhì)的空間形態(tài)等。 SDS-PAGE主要用于變性蛋白質(zhì)的分離和鑒定，主要特點是蛋白經(jīng)SDS處理后均勻帶電荷并形成線性的結(jié)構(gòu)，從而在聚丙烯酰胺膠中的泳動只與蛋白的分子量大小有關(guān)。
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- 巨蟹king87 2012-12-11 00:00:00
- 帶電顆粒在電場作用下，向著與其電性相反的電極移動，稱為電泳。 聚丙烯酰胺凝膠電泳 作用：用于分離蛋白質(zhì)和寡核苷酸。 作用原理 聚丙烯酰胺凝膠為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，具有分子篩效應(yīng)。它有兩種形式：非變性聚丙烯酰胺凝膠及SDS-聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）；非變性聚丙烯酰胺凝膠，在電泳的過程中，蛋白質(zhì)能夠保持完整狀態(tài)，并依據(jù)蛋白質(zhì)的分子量大小、蛋白質(zhì)的形狀及其所附帶的電荷量而逐漸呈梯度分開。 而SDS-PAGE僅根據(jù)蛋白質(zhì)亞基分子量的不同就可以分開蛋白質(zhì)。該技術(shù)Z初由shapiro于1967年建立，他們發(fā)現(xiàn)在樣品介質(zhì)和丙烯酰胺凝膠中加入離子去污劑和強(qiáng)還原劑后，蛋白質(zhì)亞基的電泳遷移率主要取決于亞基分子量的大小（可以忽略電荷因素）。 SDS是陰離子去污劑，作為變性劑和助溶試劑，它能斷裂分子內(nèi)和分子間的氫鍵，使分子去折疊，破壞蛋白分子的二、三級結(jié)構(gòu)。而強(qiáng)還原劑如巰基乙醇，二硫蘇糖醇能使半胱氨酸殘基間的二硫鍵斷裂。在樣品和凝膠中加入還原劑和SDS后，分子被解聚成多肽鏈，解聚后的氨基酸側(cè)鏈和SDS結(jié)合成蛋白- SDS膠束，所帶的負(fù)電荷大大超過了蛋白原有的電荷量，這樣就消除了不同分子間的電荷差異和結(jié)構(gòu)差異。 SDS-PAGE一般采用的是不連續(xù)緩沖系統(tǒng)，與連續(xù)緩沖系統(tǒng)相比，能夠有較高的分辨率。 濃縮膠的作用是有堆積作用，凝膠濃度較小，孔徑較大，把較稀的樣品加在濃縮膠上，經(jīng)過大孔徑凝膠的遷移作用而被濃縮至一個狹窄的區(qū)帶。當(dāng)樣品液和濃縮膠選TRIS/HCL緩沖液，電極液選TRIS/甘氨酸。電泳開始后，HCL解離成氯離子，甘氨酸解離出少量的甘氨酸根離子。蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷，因此一起向正極移動，其中氯離子Z快，甘氨酸根離子Z慢，蛋白居中。電泳開始時氯離子泳動率Z大，超過蛋白，因此在后面形成低電導(dǎo)區(qū)，而電場強(qiáng)度與低電導(dǎo)區(qū)成反比，因而產(chǎn)生較高的電場強(qiáng)度，使蛋白和甘氨酸根離子迅速移動，形成以穩(wěn)定的界面，使蛋白聚集在移動界面附近，濃縮成一中間層。 摘自百度百科，你可以自己查看百度百科，或者去CNKI里檢索的看一下
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影響擊穿電壓的因素：
（1）水分，水分是影響擊穿電壓最靈敏的贓物。因為水是一種極性分子，在電場力作用下，很容易被拉長，并沿著電場方向排列，從而在兩極間形成導(dǎo)電“小橋”，使擊穿電壓劇降。另外，擊穿電壓的大小不僅取決于含水量，還取決于水在油中所處的狀態(tài)，通常乳化水對擊穿電壓影響很大，溶解水次之。
（2）油中含有微量的氣泡，也會使擊穿電壓電壓明顯下降，因為油中存在氣泡，則在較低電壓下氣泡便可游離，并在電場力作用下，在電極間形成導(dǎo)電“小橋”，使油被擊穿，降低了油的擊穿電壓。
（3）溫度對擊穿電壓的影響視油中雜質(zhì)和水分的有無而不同。不含雜質(zhì)，并經(jīng)干燥無水分的油，一般溫度對擊穿電壓影響不大。但當(dāng)溫度升高到一定溫度時，油分子本身因裂解而產(chǎn)生電離，且隨著溫度的升高，油品的粘度顯著減小，電離產(chǎn)生的電子和離子由于阻力變小而運(yùn)行速度加快，導(dǎo)致油品被擊穿，擊穿電壓顯著下降。
如果油中含有雜質(zhì)和水分時，則在同一溫度下，其擊穿電壓比無雜質(zhì)。水分的油的擊穿電壓要低，溫度較低時，油中水多呈懸浮狀，其擊穿電壓值較小，隨著溫度的升高，乳狀水逐漸變?yōu)槿芙鉅?，油品的擊穿電壓隨之上升。但如果溫度升高到一定程度，則油中水分發(fā)生蒸發(fā)，在油中造成氣泡的數(shù)目便會增加，而且由于溫度升高，粘度降低，使水分、雜質(zhì)和氣泡在油中形成導(dǎo)電“小橋”，使油的擊穿電壓又很快地下降。尤其是油中雜質(zhì)和水分都存在時，這種導(dǎo)電“小橋”更易形成，擊穿電壓下降更明顯。
（4）當(dāng)油中既含有游離碳，又含有水分時，油的擊穿電壓隨碳微粒量的增加而下降。
（5）油老化后生成的酸等產(chǎn)物，是使水保持乳化狀態(tài)的不利因素，因而會使油的擊穿電壓下降；而干燥不含水分的油，酸等老化產(chǎn)物對擊穿電壓影響不明顯，但確能使介質(zhì)損耗因數(shù)急劇增加。這時，測定油的擊穿電壓不如測定介質(zhì)損耗因數(shù)更能判斷油的老化程度的原因所在。
- 影響差熱分析的因素有哪些？
差熱分析雖然廣泛應(yīng)用于熱力學(xué)和動力學(xué)的研究，由于在文獻(xiàn)上對同一物質(zhì)往往給出不一致的數(shù)據(jù)，使人們對差熱分析的應(yīng)用有點縮手不前。根據(jù)國際熱分析標(biāo)準(zhǔn)化委員會的意見，認(rèn)為所發(fā)表數(shù)據(jù)的不一致性大部分是由于實驗條件不相同引起的。因此，在進(jìn)行熱分析時必須嚴(yán)格控制實驗條件和研究實驗條件對所測數(shù)據(jù)的影響，并且在發(fā)表數(shù)據(jù)時應(yīng)明確測定時所采用的實驗條件。影響差熱曲線的因素比較多，其主要的影響因素大致是下列幾個方面：
①儀器方面的因素：包括加熱爐的形狀和尺寸、坩鍋大小、熱電偶位置等。
②實驗條件：升溫速率、氣氛等。
③試樣的影響：試樣用量、粒度等。
因此，在差熱分析時應(yīng)全面考慮各方面的影響因素和實驗條件才能獲得好的實驗結(jié)果。
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