ibidi 聚合物蓋玻片有何魔力|竟能使細胞愛好者和顯微鏡學家都喜歡它 ?

上海凈信實業(yè)發(fā)展有限公司 2022-06-17 15:38:35 351  瀏覽

• 　　您聽說過有關ibidi 聚合物蓋玻片的完整故事嗎？畢竟，它是我們 μ-Slides、μ-Dishes 和 μ-Plates 的核心，在很大程度上促成了我們的成功。

  　　

  　　這一切都始于 2000 年代初，當時三名博士生和他們的 PI 有一個愿景，即成立一家通過結(jié)合細胞培養(yǎng)和高分辨率顯微鏡來徹底改變基于細胞的分析的公司。到目前為止，細胞生物學家不得不在對細胞生長有利但對成像不利（例如，聚苯乙烯制成的組織培養(yǎng)瓶）或?qū)Τ上裼欣珜毎L不利（例如，玻璃蓋玻片）的表面之間進行折中。

  　　

  　　這種困境促使 ibidi 創(chuàng)始人開始尋找一種即具有玻璃光學特性的材料，同時又能保證良好的細胞粘附和生長。他們最終發(fā)現(xiàn)了一種具有出色光學質(zhì)量的聚合物箔，這就是ibidi 聚合物蓋玻片。它可以粘合到上部結(jié)構，這種組合是di一個 ibidi 顯微鏡室。然而，這種特殊的聚合物箔非常疏水，細胞不會粘附在上面。幸運的是，創(chuàng)始人發(fā)現(xiàn)聚合物箔可以通過物理處理來解決這個問題，特殊的表面處理ibiTreat誕生了！

  　　

  　　ibidi 聚合物蓋玻片的光學特性

  　　使用帶有聚合物蓋玻片底部的 ibidi 實驗室器具進行顯微鏡檢查的科學家們通常甚至沒有意識到它不是由玻璃制成的——僅僅是因為您無法分辨成像質(zhì)量的差異。

  　　

  　　那么，這是為什么呢？某些材料特性對于高質(zhì)量的顯微鏡檢查是必不可少的。我們將仔細研究其中五個參數(shù)（蓋玻片厚度、折射率、阿貝數(shù)、透射率和自發(fā)熒光），以及 ibidi 聚合物蓋玻片的規(guī)格與玻璃和傳統(tǒng)聚苯乙烯組織培養(yǎng)容器的比較。

  　　

  　　蓋玻片厚度

  　　

  　　蓋玻片的厚度在成像質(zhì)量中起著重要作用，因為大多數(shù)顯微鏡物鏡都設計為聚焦在具有一定厚度的蓋玻片頂部的樣本上（圖 1）。在細胞顯微鏡中，標準蓋玻片厚度為 0.17 mm (170 μm +20/–10 μm)，對應于 #1.5 蓋玻片。雖然大多數(shù)聚苯乙烯組織培養(yǎng)板和培養(yǎng)皿的底部厚度為 500–1000 μm，但 ibidi 聚合物蓋玻片的厚度與標準 #1.5 玻璃蓋玻片的厚度相同。

  　　圖 1：顯微鏡物鏡針對 170 μm 的標準蓋玻片厚度進行了優(yōu)化（左）。使用其他蓋玻片厚度高分辨率物鏡無法聚焦在樣品上（右）。

  　　

  　　折射率

  　　

  　　ibidi 聚合物蓋玻片的折射率（測量特定材料內(nèi)的光速）為 1.52，因此與玻璃的折射率相同。相比之下，由聚苯乙烯制成的標準組織培養(yǎng)板和培養(yǎng)皿的折射率為 1.58。這個值很重要，因為顯微鏡物鏡是為折射率為 1.52 的蓋玻片設計的。

  　　

  　　透光率

  　　

  　　為了提供高質(zhì)量的成像結(jié)果，顯微鏡載體的傳輸能力必須在各種不同的波長上都很高。玻璃和 ibidi 聚合物蓋玻片就是這種情況。標準聚苯乙烯材料會阻擋紫外線，這使得它們并不真正適用于所有顯微鏡技術和熒光團（圖 2）

  圖 2：各種蓋玻片和細胞培養(yǎng)材料在不同波長下的透射曲線。

  　　

  　　自發(fā)熒光

  　　

  　　顯微鏡載體材料的自發(fā)熒光特性可以通過在顯微鏡下顯示為高背景信號來干擾成像過程。雖然 ibidi 聚合物蓋玻片材料和玻璃的自發(fā)熒光非常低，但由聚苯乙烯制成的培養(yǎng)皿具有非常高的自發(fā)熒光（圖 3）。

  　　圖 3：不同蓋玻片和細胞培養(yǎng)材料在不同波長下的自發(fā)熒光強度。

  　　

  　　ibidi聚合物蓋玻片的細胞培養(yǎng)特性

  　　

  　　到目前為止，我們已經(jīng)談了很多關于 ibidi 聚合物蓋玻片的光學特性以及它如此適合高質(zhì)量成像的原因，但細胞呢？

  　　

  　　他們在這個表面上感覺舒服嗎？他們喜歡依附并在上面成長嗎？答案很簡單，是的！這就是為什么：

  　　

  　　表面剛度

  　　

  　　首先，塑料比玻璃更柔軟，這使得它的表面彈性更類似于體內(nèi)組織(Discher et al., 2005;）

  圖 4：不同組織以及蓋玻片和細胞培養(yǎng)材料的表面彈性。

  　　

  　　組織培養(yǎng)處理

  　　

  　　其次，與玻璃相比，塑料的表面可以進行修飾，使其更具親水性，這是大多數(shù)貼壁細胞類型所喜歡的。這種物理表面處理（不是涂層）通常稱為組織培養(yǎng)處理。大多數(shù)用于細胞培養(yǎng)的塑料容器都是以這種方式修改的。在 ibidi，我們將聚合物蓋玻片的組織培養(yǎng)表面改性稱為“ibiTreat”，它不是蛋白質(zhì)涂層，而是增強細胞附著的物理表面處理。當然，額外的蛋白質(zhì)涂層可以應用于未涂層的 ibidi 聚合物蓋玻片或 ibiTreat 版本，而不會影響光學質(zhì)量。

  　　

  　　透氣性

  　　

  　　細胞喜歡在 ibidi 聚合物蓋玻片上生長的第三個原因是其透氣性。這允許通過整個底部表面進行氣體交換，為細胞提供新鮮的 O 2并允許 CO 2離開細胞環(huán)境（圖 5）。

  圖 5：與玻璃（右）相比，聚合物蓋玻片允許通過底部表面進行氣體交換（左）。

  　　

  　　鑒于上述所有原因，ibidi 聚合物蓋玻片結(jié)合了兩方面的優(yōu)點——高分辨率成像的理想光學和細胞附著和生長的最佳表面*。還是不服氣？可立即訂購免費樣品。