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- 與會者牧儇 2015-11-05 00:00:00
- 一、體液免疫與細胞免疫水平檢測 ?。ㄒ唬w液免疫水平檢測 1.特異性抗體水平的檢測 相關的免疫指標包括:ABO等血型和HLA抗體、抗供者組織細胞抗體、血管內皮細胞抗體、冷凝集素等。測定的方法,可以根據(jù)相應抗原的特性,分別采取各種交叉配型、補體依賴的細胞毒性試驗等。 2.補體水平的檢測 補體活性與急性移植排斥反應的發(fā)生有關,這是因為在急性排斥反應中,抗體發(fā)揮著重要作用。當移植物遭受排斥時,補體成分的消耗增加,導致血清中總補體或單個補體成分的減少,可采用溶血法或比濁法進行檢測。此外,補體的裂解產(chǎn)物,如C3a、C3b、C3d等的測定,對了解補體的活性也很有幫助,其常用的檢測方法有免疫電泳、免疫標記技術等。 (二)細胞免疫水平檢測 細胞免疫水平的測定,包括參與細胞免疫的有關細胞數(shù)量、功能和細胞因子水平的檢測。不同檢測指標對檢測移植排斥反應的發(fā)生、判斷排斥反應的類型等均具有一定的臨床意義。 1.外周血T細胞及其亞類的計數(shù) 免疫熒光法或流式細胞儀測定T細胞及其亞群,在急性排斥反應臨床癥狀出現(xiàn)前l(fā)~5天,T細胞總數(shù)和CD4/CD8比值升高,巨細胞病毒感染時此比值降低。一般認為,CD4/CD8比值大于1.2時,預示急性排斥即將發(fā)生,而此比值小于1.08時則發(fā)生感染的可能性很大。若進行動態(tài)監(jiān)測,對急性排斥反應和感染具有鑒別診斷的意義。此外,淋巴細胞轉化試驗也可用于T細胞總數(shù)和功能的測定,例如4小時T細胞轉化試驗,是一項預報急性排斥反應危象較為滿意的方法。 2.NK細胞活性測定 3.血清細胞因子測定 移植中發(fā)生的GVHR是移植排斥反應的特殊類型。 4.黏附分子及其配體的檢測 免疫細胞以及血管內皮細胞等細胞膜表面黏附分子及其配體的表達,與急性排斥反應的發(fā)生密切相關。諸如ELAM-1、VCAM、ICAM和HLA分子等。 二、尿微量蛋白檢測 尿微量蛋白,是指用常規(guī)定性或定量方法難以測出的蛋白質。機體蛋白質非正常地經(jīng)尿排出,可發(fā)生于腎臟損傷性病變。在臨床移植領域,尿微量蛋白的檢測,一方面有助于判斷大器官移植,尤其是腎臟移植時排斥反應的發(fā)生;另一方面,也可作為免疫YZ藥物肝腎毒副作用的觀察指標。 傳統(tǒng)尿蛋白檢測采用免疫擴散、免疫電泳、免疫比濁、放射免疫、ELISA等方法;GX檢測技術還有GX液相層析、毛細管電泳、質譜等。后者由于儀器昂貴、檢測復雜而難以在臨床推廣。近年來,生物傳感器技術得到迅速發(fā)展,一些新型生物芯片,如生物電子芯片、毛細管電泳或層析芯片、PCR芯片等應運而生。其中用于蛋白檢測的免疫傳感器已有不少報道。由于尿液檢測具有取材方便、無損傷等優(yōu)點,尿微量蛋白的檢測在腎臟移植領域備受關注。 三、急性時相反應物質檢測 C反應蛋白(CRP)、IL-1、IL-6、TNF-α以及HSP等炎癥分子,是發(fā)生炎癥反應的標志性分子,在發(fā)生感染性疾病和自身免疫性疾病時均有不同程度的。臨床同種異基因于細胞移植時發(fā)現(xiàn),受者血清的CRP水平,且在移植后發(fā)生細菌或真菌感染時更為顯著。此外,在肝、腎移植過程中,對受者血清CRP的動態(tài)測定結果也顯示,CRP與器官移植后并發(fā)癥的發(fā)生相關,且CRP水平似乎比白細胞計數(shù)或發(fā)熱更能敏感地反映發(fā)生并發(fā)癥的可能。盡管在臨**,CRP的測定尚未作為判斷器官移植排斥反應的常規(guī)項目,但其在血清中的水平,與器官移植術時所形成的外科創(chuàng)傷、急性排斥反應的發(fā)生,以及移植術后的微生物感染等的關系,正在被人們所認可。 四、免疫YZ劑體內藥物濃度檢測 移植術后的患者,常規(guī)應用CsA、FK506、麥考酚嗎乙酯(MMF)等免疫YZ劑,這些藥物的ZL窗窄、效用強度大,加之患者本身的個體差異、狀態(tài)、飲食、用藥時間和次數(shù)、合并用藥等因素影響,致使不同患者甚至是同一患者不同時期的血藥濃度都有很大差異。因此,對移植患者需在常規(guī)監(jiān)測血藥濃度的情況下隨時調整給藥劑量。
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在目前同步熱分析可以達到的溫度范圍內,從-150℃至1500℃(或2400℃),任何兩種物質的所有物理、化學性質是不會完全相同的。因此,同步熱分析的各種曲線具有物質“指紋圖”的性質。通俗來說,同步熱分析是通過測定物質加熱或冷卻過程中物理性質(目前主要是重量和能量)的變化來研究物質性質及其變化,或者對物質進行分析鑒別的一種技術。1977年在日本京都召開的國際同步熱分析協(xié)會(ICTA)第七次會議上,給同步熱分析下了如下定義:即同步熱分析是在程序控制溫度下,測量物質的物理性質與溫度的關系的技術。數(shù)學表達式為:P=f(T)其中:P代表物質的一種物理量;T為物質溫度。所謂程序控制溫度一般是指線性升溫或線性降溫,當然也包括恒溫、循環(huán)或非線性升溫、降溫。也就是把溫度看作是時間的函數(shù):T=Φ(t),其中t是時間,則P=f(T或t)。同步熱分析的應用范圍:用于測定樣品在程序控制溫度下產(chǎn)生的質量、熱量變化及分解過程所產(chǎn)生氣體產(chǎn)物的化學成份。同步熱分析可以同步提供TG與DSC的信號。廣泛用于各種有機物、無機物、高分子材料、金屬材料、半導體材料、藥物、生物材料等各領域的課題研究。同步熱分析的研究主要包括:1.無機物、有機物、高分子材料等結構定性、定量分析2.研究材料的熱穩(wěn)定性、熱性能、相轉變、吸附與解吸、成分的定量分析、水分與揮發(fā)物分解過程、氧化與還原、添加劑與填充劑影響等3.催化機理、結晶動力學、分解動力學、熱分解過程及機理等研究(來源:林賽斯(上海)科學儀器有限公司)
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