本生詳述詳述：凍存管的分類和注意事項(xiàng)

　　凍存管別名冷凍管，一般用在實(shí)驗(yàn)室生物材料的低溫保藏。

　　凍存管一般都是根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要按容量劃分的，如0.5ml,1.0ml,1.5ml,1.8ml,   2.0ml,4ml,5ml,7ml,10ml等，也可以按特殊用途分，一般的凍存管不能進(jìn)入液氮里，只有特殊材料處理的才可以放入。同時(shí)凍存管還有雙層的和無(wú)雙層的帶硅膠墊和沒(méi)有硅膠墊的等種種，還有無(wú)色和雜色及各種純色等不同，這些都是根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要或?qū)嶒?yàn)方便各廠家自己設(shè)計(jì)的，沒(méi)有嚴(yán)格意義上的劃分。

　　購(gòu)買時(shí)應(yīng)根據(jù)自己的需要看購(gòu)買的凍存管是否合適，一般凍存管不能進(jìn)入液氮里邊，如果需要進(jìn)入液氮保藏的就要選擇密封的耐低溫的用凍存管，還有要認(rèn)清所購(gòu)買的凍存管是否是無(wú)菌的，如果實(shí)驗(yàn)要求較高就要購(gòu)買無(wú)菌和無(wú)DNA,RNA的凍存管。另外如果是新買的,沒(méi)有在外面打開(kāi),可直接使用,如果在外面打開(kāi)過(guò),就高壓一下。

　　目市場(chǎng)上凍存管種類繁多，各個(gè)廠家生產(chǎn)的凍存管規(guī)格和材料不一樣其價(jià)格差距也較大，但一般來(lái)說(shuō)進(jìn)口的比國(guó)產(chǎn)的要貴點(diǎn)有時(shí)候相差數(shù)倍，這是因?yàn)閲?guó)外的凍存管所用材料很好，一般可用于超低溫保藏，另外國(guó)外的產(chǎn)品種類很多，一般能成一系列并且有各種顏色可供不同用戶選擇，一般品質(zhì)很有，這些方面國(guó)產(chǎn)的就要差那么一些，一般生產(chǎn)的是普通用凍存管，品種也不是很多，顏色比較單一但價(jià)格也相對(duì)低廉一些，如1.5ml凍存管國(guó)產(chǎn)的單價(jià)大概在0.2-0.3元之間，國(guó)外的一般都超過(guò)1塊錢了。一般情況下，國(guó)產(chǎn)的各型冷凍管價(jià)格都在1塊以下，進(jìn)口的各型一般都超過(guò)1塊了，有些特殊用途的達(dá)到4~5塊了。

　　凍存管的分類和注意事項(xiàng)?我司由具有行業(yè)背景和豐富市場(chǎng)經(jīng)驗(yàn)的業(yè)人士組成，于為生命科學(xué)研究域提供產(chǎn)品，為廣大科研工作者提供服務(wù)。   既能滿足研發(fā)類客戶對(duì)產(chǎn)品種類、包裝的特殊要求，也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)?；a(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。

　　血清的主要成分和功能

　　牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖具有重要甚至是難以替代的作用，它含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成分。主要有以下成分和功能：

　　A、 血清中的主要物質(zhì)—蛋白質(zhì)如白蛋白等具有緩沖細(xì)胞培養(yǎng)液酸堿度、維持滲透壓的作用。

　　B、 轉(zhuǎn)鐵蛋白、甲狀腺素結(jié)合蛋白等結(jié)合蛋白，有識(shí)別維生素、脂類、金屬和其它激素等，并能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，從而起到j(luò)iedu作用。

　　C、 纖維粘連素、胎牛血清中的胎球蛋白、貼壁因子等能促進(jìn)細(xì)胞貼壁、鋪展。

　　D、  多肽類如血小板促生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)因子、胰島素、類胰島素生長(zhǎng)因子、促生長(zhǎng)激素、等能支持細(xì)胞分裂增殖并維持細(xì)胞對(duì)數(shù)生長(zhǎng)。

　　E、巨球蛋白等蛋白酶抑制劑能抑制蛋白酶，保護(hù)細(xì)胞不受損害。

　　F、 血清中還含有豐富的氨基酸、葡萄糖、酮酸及與蛋白相結(jié)合狀態(tài)的微量元素等，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)均有意義。

　　正因?yàn)檠寰哂腥绱藦?fù)雜的成分和重要的功能，所以血清的保存和使用顯得非常重要。過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。

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　　天津本生詳述凍存管的使用方法和注意事項(xiàng)!

　　凍存管又稱菌種保存管、磁珠保存管、磁珠凍存管。微生物實(shí)驗(yàn)室常用的菌種保存方法有牛奶法、甘油法、斜面法等。復(fù)雜程度各異，效果也差別很大。目前國(guó)內(nèi)的大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都是實(shí)驗(yàn)人員自行制作菌種保存管，這不僅增大了工作強(qiáng)度，并且由于各種條件的限制，菌種保存效果不能總是令人滿意。所以，這就需要掌握好凍存管的使用方法和一些注意事項(xiàng)，這樣才能起到很大的作用。

　　一、使用方法

　　1、使用凍存管儲(chǔ)存樣本時(shí)，嚴(yán)格要求應(yīng)把凍存管放入液氮的氣相層或冰箱中保存。如果凍存管儲(chǔ)存于液氮液體中，液氮有一定幾率會(huì)滲入凍存管內(nèi)部，復(fù)蘇時(shí)液氮?dú)饣瘜?dǎo)致管內(nèi)外壓力不平衡，這樣極易造成凍存管的炸裂，并具有生物危害性。

　　2、操作凍存管復(fù)蘇，全程使用安全防護(hù)設(shè)備，建議穿實(shí)驗(yàn)服、戴棉質(zhì)手套且在安全的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上進(jìn)行操作。條件允許情況下，請(qǐng)佩戴護(hù)目鏡或防護(hù)面罩。由于夏季室內(nèi)溫度會(huì)高于冬季，請(qǐng)格外小心。

　　3、凍存細(xì)胞儲(chǔ)存過(guò)程中，凍存管的冷凍溫度須均勻。不均勻的受凍將會(huì)導(dǎo)致冰塞的產(chǎn)生，冰塞會(huì)yizhi兩側(cè)的液體溫度傳遞進(jìn)而產(chǎn)生危險(xiǎn)的高壓力并導(dǎo)致凍存管受損。

　　4、凍存的樣本量不要超過(guò)凍存管要求的工作體積。

　　二、注意事項(xiàng)

　　1、凍存管保存環(huán)境

　　未經(jīng)使用的凍存管可在室溫或2-8℃保存12個(gè)月;已經(jīng)接種的凍存管在-20℃保存，12個(gè)月內(nèi)可有良好的菌株保存效果;已經(jīng)接種的凍存管在-80℃保存，24個(gè)月內(nèi)可有良好的菌株保存效果。

　　2、凍存管保存時(shí)間

　　未經(jīng)使用的凍存管可在室溫或2-8℃保存;已經(jīng)接種的凍存管在-20℃或-80℃保存。

　　3、凍存管的使用步驟

　　從細(xì)菌純培養(yǎng)物中挑取新鮮培養(yǎng)物配成大約為3-4麥?zhǔn)媳葷岫鹊木鷳乙航臃N與菌種保存管中;擰緊保存管，來(lái)回顛倒4-5次使細(xì)菌乳化，不能旋搖;把保存管放入冰箱保存(-20℃--70℃

　　三、重要提醒

　　1、需在生物安全柜中操作，確保操作的無(wú)菌，確保菌株不被污染。

　　2、凍存管中小瓷珠的顏色可能有所不同，這不代表任何產(chǎn)品功能的不同，只是方便用戶進(jìn)行細(xì)菌編碼、標(biāo)記。

　　3、在接種之前有如下情況產(chǎn)生，該凍存管不得使用：

　　a. 瓶子有漏液情況發(fā)生。

　　b. 凍存管內(nèi)的凍存保護(hù)液混濁(說(shuō)明已經(jīng)被污染)。

　　c. 超過(guò)有效保存期。

　　4、小瓷珠一旦從凍存管中取出，不得以任何原因再放回凍存管中。

　　5、當(dāng)丟棄使用過(guò)的或部分使用過(guò)的凍存管時(shí)，應(yīng)注意生物危害的預(yù)防。

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　　天津本生詳述：如何正確使用移液器?

　　DY步：移液器槍頭的安裝

　　移液器槍頭的安裝比較簡(jiǎn)單，常用的方法是旋轉(zhuǎn)安裝，把移液器頂端插入槍頭，在輕輕用力下壓的同時(shí)，左右微微轉(zhuǎn)動(dòng)，旋轉(zhuǎn)上緊即可。

　　第二步：設(shè)定移液器的移液容積

　　為了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的嚴(yán)謹(jǐn)性，一般移液容積設(shè)定要結(jié)合粗調(diào)和細(xì)調(diào)，首先通過(guò)旋轉(zhuǎn)按鈕將體積值迅速調(diào)整至接近自己的預(yù)想值;然后當(dāng)體積值接近自己的預(yù)想值之后，應(yīng)將移液器橫置，水平放至自己的眼前，通過(guò)調(diào)節(jié)輪慢慢地將容量值調(diào)至預(yù)想值，從而避免視覺(jué)誤差所造成的影響。

　　第三步：預(yù)洗移液器槍頭

　　為了確保實(shí)驗(yàn)的精度和準(zhǔn)度，我們?cè)诎惭b了新的槍頭或增加了容量值以后，應(yīng)該把需要轉(zhuǎn)移的液體吸取、排放兩到三次，這樣做的目的是為了讓槍頭內(nèi)壁形成一道同質(zhì)液膜，使整個(gè)移液過(guò)程具有更高的重現(xiàn)性。

　　第四步：移液

　　先將移液器排放按鈕按至DY停點(diǎn)，再將槍頭垂直浸入液面，浸入的深度為：

　　P2、P10 ≦ 1 mm;

　　P20、P100、P200 ≦ 2 mm;

　　P1000 ≦ 3 mm;

　　P5mL、P10mL ≦ 4 mm;

　　浸入過(guò)深的話，液壓會(huì)對(duì)吸液的精確度產(chǎn)生一定的影響，當(dāng)然，具體的浸入深度還應(yīng)根據(jù)盛放液體的容器大小靈活掌握。

　　第五步：放液

　　放液時(shí)，槍頭緊貼容器壁，先將排放按鈕按至DY停點(diǎn)，略停頓后，再按至第二停點(diǎn)，這樣做可以保證槍頭內(nèi)無(wú)殘留液體。如果這樣操作后還有殘留液體存在的話，就應(yīng)該更換槍頭了。

　　第六步：卸掉移液器槍頭槍頭

　　卸掉的槍頭一定不能和新吸頭混放，以免產(chǎn)生交叉污染。移液器用完后調(diào)回更大量程。

　　梅特勒-托利多有Pipet-Lite XLS+手動(dòng)單道移液器、Pipet-Lite XLS+手動(dòng)多通道移液器、Pipet-Lite XLS間距可調(diào)手動(dòng)多道移液器、Pipet-Lite PL+ 移液器、Pipet-One 移液器，還有E4 XLS+ 單道電動(dòng)移液器、E4 XLS+ 多道電動(dòng)移液器、E4 XLS間距可調(diào)多道電動(dòng)移液器，移液器設(shè)置、協(xié)議和服務(wù)警報(bào)可以通過(guò)密碼進(jìn)行保護(hù)，以符合GLP/ GMP認(rèn)證的規(guī)定。 而且，GLP數(shù)據(jù)，如服務(wù)記錄、循環(huán)和狀態(tài)數(shù)據(jù)等，可完全防篡改。

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　　本生生物詳述：實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)離心管分類!

　　實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)離心管種類有多種。

　　1、按材質(zhì)可分：

　　塑料離心管、玻璃離心管和不銹鋼離心管等。

　　2、按速度可分：

　　低速離心管和高速離心管。

　　3、按容量可分：

　　微量離心管、小容量離心管和大容量離心管。一般稱容量大于100mL的離心管為離心瓶。

　　4、按離心管口部形狀可分：

　　縮口離心管和直口離心管。

　　5、按離心管底部形狀可分：

　　圓底離心管、尖底離心管和平底離心管。

　　6、按離心管與蓋接合形式可分：

　　摁蓋離心管和螺口離心管。

　　7、按用途可分：

　　制備型離心管和分析型離心管。

　　本生生物供應(yīng)：光度計(jì)，檢測(cè)儀，免疫儀，全系熒光定量PCR耗材，PCR八聯(lián)管，進(jìn)口PCR板，移液器，鉆石吸嘴，離心管，凍存管，培養(yǎng)皿，培養(yǎng)板，培養(yǎng)瓶，吸頭，儀器及手套，色譜耗材，針頭過(guò)濾器。

　　低吸附離心管的一些關(guān)鍵點(diǎn)!

　　低吸附離心管常用于對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行濃縮和除鹽操作，對(duì)色譜洗液和生理梯度片斷進(jìn)行緩沖液交換或者除鹽操作，從細(xì)胞的細(xì)菌培養(yǎng)上清液或者溶菌液中回收生物分子。清洗和濃縮乳膠懸浮液，離心管通常不需要預(yù)處理即可使用，不過(guò)對(duì)于蛋白質(zhì)樣本處理，特別是較稀的蛋白溶液來(lái)說(shuō)，用膜濃縮，回收率常常是不定量的，雖然PES材料使非特異性吸附最小化，但是，某些蛋白，特別是稀的時(shí)候會(huì)有問(wèn)題，非特異性結(jié)合的程度隨著個(gè)別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同，含有帶電的或者疏水結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)更易于不可逆結(jié)合到不同表面。

　　低吸附離心管離心時(shí)注意事項(xiàng)：避免過(guò)長(zhǎng)時(shí)間或者高速離心，雖然我們產(chǎn)品有防死端設(shè)計(jì)，可避免過(guò)度離心造成膜表面干燥而造成不可逆吸附，避免過(guò)度濃縮，終體積越小，越容易因表面吸附而損失得率，離心后采用輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液，必要時(shí)補(bǔ)加一定體積的緩沖液沖洗膜表面，有助于減少膜表面吸附，能提高回收率，盡量避免TIPS接觸膜表面。

　　對(duì)于低吸附離心管表面做鈍化預(yù)處理可降低蛋白質(zhì)在膜表面的吸附性損失，大多數(shù)情況下，在濃縮稀釋蛋白溶液之前預(yù)處理柱子可以提高回收率，因?yàn)槿芤嚎商顫M膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點(diǎn)，鈍化的方法是預(yù)先用高容積的鈍化溶液預(yù)浸泡柱子一小時(shí)以上，蒸餾水沖洗柱子，再用蒸餾水離心一次以除去可能殘留在膜上的鈍化溶液，注意鈍化處理后別讓膜干了，如果要留待以后使用，需要加無(wú)菌蒸餾水保持膜濕潤(rùn)。

　　低吸附離心管的一些關(guān)鍵點(diǎn)!我司由具有行業(yè)背景和豐富市場(chǎng)經(jīng)驗(yàn)的業(yè)人士組成，于為生命科學(xué)研究域提供產(chǎn)品，為廣大科研工作者提供服務(wù)。   既能滿足研發(fā)類客戶對(duì)產(chǎn)品種類、包裝的特殊要求，也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)?；a(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。

      本生詳述YL器械經(jīng)營(yíng)管理平臺(tái)（GSP平臺(tái)）系統(tǒng)開(kāi)發(fā)

　　項(xiàng)目主要從兩大方面提供給客戶核心價(jià)值
　　
　　1) 真正實(shí)現(xiàn)符合企業(yè)信息化的系統(tǒng)，眾所周知，ERP理念已經(jīng)很多年，國(guó)內(nèi)的ERP廠商理念還是基于多年前，并且中低端市場(chǎng)，成功實(shí)施的幾率很少，我們深耕行業(yè)信息化多年，打造的產(chǎn)品從采購(gòu)、收貨、驗(yàn)收、貯存、檢查、銷售、出庫(kù)、復(fù)核等各經(jīng)營(yíng)環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制功能，能對(duì)各經(jīng)營(yíng)環(huán)節(jié)進(jìn)行判斷、控制，確保各項(xiàng)質(zhì)量控制功能的實(shí)時(shí)和有效，即使沒(méi)有GSP要求，該系統(tǒng)也能從整體效率，流程控制對(duì)公司形成整體運(yùn)營(yíng)支撐，其價(jià)值相當(dāng)于市場(chǎng)價(jià)值30萬(wàn)-80萬(wàn)ERP軟件，其每年的形成管理效益遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于投入，
　　
　　2) 隨著國(guó)內(nèi)YL事故的發(fā)生，GSP監(jiān)管也從模糊地帶向剛性要求轉(zhuǎn)化，每年的例行年審和飛檢給企業(yè)巨大壓力，應(yīng)用該系統(tǒng)能夠完全實(shí)現(xiàn)GSP所有的要求與各種報(bào)表的自動(dòng)產(chǎn)生無(wú)需為企業(yè)的經(jīng)營(yíng)資格發(fā)愁，單純這點(diǎn)也就要求企業(yè)必須進(jìn)行系統(tǒng)實(shí)施，不能滿足條件的隨時(shí)淘汰。

　　功能特點(diǎn)介紹：
　　1、軟件適用范圍：YL器械經(jīng)營(yíng)企業(yè)、YL器械第三方物流服務(wù)提供商。
　　2、崗位職責(zé)和權(quán)限：
　　支持按崗位角色進(jìn)行功能授權(quán)和審批設(shè)置，實(shí)現(xiàn)操作權(quán)限的多級(jí)管理和靈活控制。

　　3、符合新版GSP標(biāo)準(zhǔn)：
　　符合新版GSP標(biāo)準(zhǔn)，全流程質(zhì)量管理和操作監(jiān)控，包括：首營(yíng)供應(yīng)商/客戶申請(qǐng)、審批，首營(yíng)商品申請(qǐng)、審批，資料變更管理、經(jīng)營(yíng)范圍控制、證照效期預(yù)警、近效期商品預(yù)警；
　　完善的GSP記錄查詢，包括：收貨記錄、驗(yàn)收記錄、養(yǎng)護(hù)記錄、盤(pán)點(diǎn)記錄、運(yùn)輸記錄、采購(gòu)進(jìn)貨記錄、采購(gòu)?fù)素浻涗?、銷售記錄、銷后退回記錄、報(bào)損記錄、等。

　　4、全流程效期管理：
　　效期管理融入系統(tǒng)的所有流程操作中，包括入庫(kù)環(huán)節(jié)的數(shù)據(jù)收集，庫(kù)內(nèi)的盤(pán)點(diǎn)、養(yǎng)護(hù)、近效期庫(kù)存預(yù)警，出庫(kù)環(huán)節(jié)的批號(hào)指定或先進(jìn)先出的批號(hào)策略；

　　5、單品精細(xì)化管理：
　　在入/出庫(kù)環(huán)節(jié)，對(duì)需要進(jìn)行單品管理的器械商品進(jìn)行單品碼數(shù)據(jù)采集，記錄單品的入/出庫(kù)信息并增減單品庫(kù)存，通過(guò)庫(kù)內(nèi)的盤(pán)點(diǎn)、移位、報(bào)損功能，可對(duì)單品庫(kù)存進(jìn)行調(diào)整，可對(duì)單品的全流程操作進(jìn)行數(shù)據(jù)跟蹤。

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　　天津本生詳述PCR管產(chǎn)品特征及用途

　　本生生物公司供應(yīng)：elisa試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過(guò)濾器等。

　　產(chǎn)品描述：

　　天津本生提供的PCR管是由特殊配方的聚丙烯材質(zhì)制造，超薄管壁設(shè)計(jì)更便于熱量的傳遞以及溫度的控制。突蓋和平蓋兩種管蓋設(shè)計(jì)，滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。標(biāo)準(zhǔn)管型設(shè)計(jì)可以更好的匹配主流PCR儀進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

　　PCR產(chǎn)品介紹：次性PCR管采用聚丙烯(PP)材料制成,體化設(shè)計(jì),整套產(chǎn)品配合平穩(wěn),透明性強(qiáng),柔軟性能好,耐腐蝕性強(qiáng),產(chǎn)品防靜電,氣密性良好.

　　>產(chǎn)品特點(diǎn):

　　>無(wú)DNA酶和RNA酶，無(wú)DNA和RNA;

　　>超薄均勻型管壁與產(chǎn)品均性依靠的精密模具實(shí)現(xiàn);

　　>超薄壁技術(shù)提供的熱傳導(dǎo)效應(yīng), 促使樣品地實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增;

　　>孔板帶有裁剪線槽，可裁剪成24孔、48孔板使用;

　　>縱向字母(A-H)，橫向數(shù)字(1-12)標(biāo)記，標(biāo)記清晰;

　　>錐形管的凸邊設(shè)計(jì)有效地保證密封性，預(yù)防交叉污染;

　　>適用于大多數(shù)自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)儀器;

　　>使用100%原包裝進(jìn)口塑膠材料，無(wú)熱解析出物，無(wú)內(nèi)毒素;

　　產(chǎn)品用途：

　　實(shí)驗(yàn)室PCR分析

　　食品安全檢測(cè)

　　疾病控制檢測(cè)

　　本生詳述PCR管產(chǎn)品特征及用途，先和大介紹到這，如果想要了解更多PCR管的信息，可以關(guān)注天津本生生物，業(yè)給生物醫(yī)藥客戶提供生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)耗材，歡迎廣大客戶來(lái)詢。

天津本生詳述PCR技術(shù)原理、實(shí)驗(yàn)步驟和應(yīng)用

　　實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

　　1.掌握聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的原理。

　　2.掌握移液槍和PCR儀的基本操作技術(shù)。

　　二、實(shí)驗(yàn)原理

　　PCR技術(shù)，即聚合酶鏈反應(yīng)(polymerasechainreaction，PCR)是由美PECetus公司的KaryMullis在1983年(1993年獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng))建立的。這項(xiàng)技術(shù)可在試管內(nèi)的經(jīng)數(shù)小時(shí)反應(yīng)就將特定的DNA片段擴(kuò)增數(shù)百萬(wàn)倍，這種迅速獲取大量單核酸片段的技術(shù)在分子生物學(xué)研究中具有舉足輕重的意義，大地推動(dòng)了生命科學(xué)的研究進(jìn)展。它不僅是DNA分析zui常用的技術(shù)，而且在DNA重組與表達(dá)、基因結(jié)構(gòu)分析和功能檢測(cè)中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

　　PCR可以被認(rèn)為是與發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過(guò)程相似的技術(shù)，其結(jié)果都是以原來(lái)的DNA為模板產(chǎn)生新的互補(bǔ)DNA片段。細(xì)胞中DNA的復(fù)制是個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程。參與復(fù)制的有多種因素。PCR是在試管中進(jìn)行的DNA復(fù)制反應(yīng)，基本原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相似，但反應(yīng)體系相對(duì)較簡(jiǎn)單。

　　PCR由變性－－退火－－延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：

　?、倌０錎NA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)做準(zhǔn)備;

　?、谀０錎NA與引物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合;

　　③引物的延伸：DNA模板－－引物結(jié)合物在Taq酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈。

　　重復(fù)循環(huán)變性－－退火－－延伸三過(guò)程，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成個(gè)循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍。

　　三、實(shí)驗(yàn)試劑與器材

　　模板DNA、2.5mmol/LdNTP

　　TaqDNA聚合酶(5U/μL)、SSR引物

　　10×buffer、15mmol/LMg2+、ddH2O

　　PCR儀、移液槍、PCR板

　　四、實(shí)驗(yàn)步驟

　　1、配制20μL反應(yīng)體系，在PCR板中依次加入下列溶液：

　　模板DNA2μL

　　引物11μL

　　引物21μL

　　dNTP1.5μL

　　MgCl22μL

　　10×buffer2μL

　　ddH2O10μL

　　Taq酶0.5μL

　　2、設(shè)置PCR反應(yīng)程序。

　　3、上樣，啟動(dòng)反應(yīng)程序。

　　4、擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳檢測(cè)。

　　PCR技術(shù)原理、實(shí)驗(yàn)步驟和應(yīng)用!先和大介紹到這，如果想要了解更多PCR的信息，可以關(guān)注天津本生生物，專業(yè)給生物醫(yī)藥客戶提供生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)耗材，歡迎廣大客戶來(lái)詢。