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蛋白質分子印跡選用什么洗脫液好

琳琳iloveu 2017-06-14 21:31:26 372  瀏覽
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參與評論

全部評論(1條)

  • sijie199396 2017-06-15 00:00:00
    分子印跡技術是制備具有分子識別能力聚合物的技術 ,因具有構效預定性、特異識別性和廣泛實用性三大特性 ,而在分離純化、生物化學、生物學以及醫(yī)學等諸多領域具有廣闊的應用前景。綜述了蛋白質分子印跡技術的起源和發(fā)展、印跡聚合物的制備、印跡效果評價及在各個領域的應用 ,并對其應用前景進行了展望。

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苯并(a)芘檢測又一利器:分子印跡小柱

       苯并(a)芘又稱苯并芘,英文縮寫B(tài)aP,是碳水化合物、蛋白質和脂肪在不完全燃燒時產生的高活性間接性致癌物質,廣泛存在于煙熏、油炸、燒烤、烘焙等食品中?!禛B 2762-2017 食品中污染物限量》明確規(guī)定,食品中苯并(a)芘限量指標:谷物及其制品不超過5 ppb,肉及肉制品不超過5 ppb,水產動物及其制品不超過5 ppb,油脂及其制品不超過10 ppb。

      《GB 5009.27-2016 食品安全國家標準 食品中苯并(a)芘的測定》規(guī)定:試樣經過有機溶劑提取,中性氧化鋁或分子印跡小柱凈化,濃縮至干,乙腈溶解,反相液相色譜分離,熒光檢測器檢測,根據(jù)色譜峰的保留時間定性,外標法定量。


方法優(yōu)勢

中性氧化鋁柱:ProElut BaP

       迪馬科技曾發(fā)布過植物油、肉制品、水產品、糧谷等基質中苯并芘檢測方案,樣品凈化使用《GB 5009.27-2016》標準中中性氧化鋁柱—ProElut BaP,使用者無需中性氧化鋁活度調節(jié),可完全重現(xiàn)標準,具有良好的重現(xiàn)性和回收率結果,用戶使用后均反映效果良好。

分子印跡小柱:ProElut BAP-MIP

       在此基礎上,迪馬科技又開發(fā)出《GB 5009.27-2016》標準中另一凈化技術分子印跡小柱—ProElut BAP-MIP,并應用于食用油中苯并(a)芘的測定,該方法具有以下優(yōu)勢:

       1)  對苯并芘專一性的吸附保留,優(yōu)異的回收率及重現(xiàn)性結果;

       2)  能有效去除油脂干擾,除油效果良好;

       3)  分子印跡小柱規(guī)格小,溶劑消耗量少;

       4)  方法操作簡單,凈化速度快,時間短。


       以下為詳細解決方案,敬請參考!


食用油中苯并(a)芘的測定


1 適用范圍

本方法適用于食用油中苯并(a)芘的檢測。


2 標準品配制

標準儲備液:準確吸取一定量的500 μg/mL標準儲備液(甲苯配),用乙腈配制成100 μg/L的標準儲備液。


3 提取

取0.4 g樣品于玻璃離心管中,加入5 mL正己烷,渦旋混勻,待凈化。


4 凈化

SPE柱: ProElut BAP-MIP 500 mg/6 mL(Cat#: 65939)

(1)活化:依次加入5 mL二氯甲烷、5 mL正己烷,棄去流出液;

(2)上樣:將待凈化液加入柱中,棄去流出液;

(3)淋洗:加入6 mL正己烷,棄去流出液;

(4)洗脫:加入6 mL二氯甲烷,收集流出液;

(5)重新溶解:將流出液在40 ℃水浴下緩慢通入氮氣吹干,加0.4 mL乙腈,混勻,4000 rpm離心1 min,取上清,供HPLC分析。


5 HPLC條件

色譜柱:

Diamonsil C18(2),250 × 4.6 mm,5 μm ( Cat#:99603)

流速:1.0 mL/min   進樣量:20 μL   柱溫:35 ℃

流動相: 乙腈:水 = 97:3

檢測器:熒光  Ex:384 nm      Em:406 nm


6 添加回收結果及色譜圖

食用油中苯并(a)芘檢測的添加回收結果(%):


苯并(a)芘標準品(0.5 μg/L)檢測的液相色譜圖

苯并(a)芘標準品(5 μg/L)檢測的液相色譜圖

苯并(a)芘標準品(10 μg/L)檢測的液相色譜圖

添加水平為0.5 μg/kg的橄欖油中苯并(a)芘檢測的液相色譜圖

添加水平為5 μg/kg的橄欖油中苯并(a)芘檢測的液相色譜圖

添加水平為10 μg/kg的橄欖油中苯并(a)芘檢測的液相色譜圖

添加水平為0.5 μg/kg的大豆油中苯并(a)芘檢測的液相色譜圖

添加水平為5 μg/kg的大豆油中苯并(a)芘檢測的液相色譜圖

添加水平為10 μg/kg的大豆油中苯并(a)芘檢測的液相色譜圖

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