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  aa13763415857 2014-06-13 00:00:00

  培養(yǎng)皿是啥

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  a18166136555 2014-03-27 00:00:00

  細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底（U型和V型）；培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536 孔等；根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實驗?zāi)康亩ā? （1）平底和圓底（U型和V型）培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇 不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途。培養(yǎng)細(xì)胞，通常是選用平底的，這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對一致。因此做MTT等實驗時，無論是貼壁和懸浮細(xì)胞，一般選用平底板。測吸光值一定要使用平底的培養(yǎng)板。要特別注意材質(zhì)， 標(biāo)示“Tissue Culture (TC) Treated”是養(yǎng)細(xì)胞用的。 U型或V型板，一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學(xué)方面，當(dāng)做兩種不同淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)時，需要二者相互接觸刺激，這時一般會選用U型板，因為細(xì)胞會由于重力的作用而聚集在很小的范圍內(nèi)內(nèi)。圓底培養(yǎng)板還會用于同位素?fù)饺氲膶嶒?，需要用?xì)胞收集儀收集細(xì)胞的培養(yǎng)，如“混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)”等。V型板常用做細(xì)胞殺傷、免疫學(xué)血凝集實驗。細(xì)胞殺傷這種實驗也可用U型板替代（加入細(xì)胞后，低速離心)。 （2）Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板的區(qū)別 Terasaki plate主要是用于晶體學(xué)研究，產(chǎn)品設(shè)計便于對晶體的觀察與結(jié)構(gòu)分析。有兩種sitting 和handing drop兩種方法，兩種方法應(yīng)用產(chǎn)品的外形結(jié)構(gòu)也不同。材料上選擇crystal class polymer ，特殊的材料有利觀察晶體結(jié)構(gòu)。 細(xì)胞培養(yǎng)板主要是PS材料，材料是treated sufface，便于細(xì)胞貼壁生長與伸展。當(dāng)然還有浮游細(xì)胞的生長材料，同時還有l(wèi)ow binding surface （3）細(xì)胞培養(yǎng)板與酶標(biāo)板的區(qū)別 酶標(biāo)板一般要比細(xì)胞培養(yǎng)板貴，細(xì)胞板主要做細(xì)胞培養(yǎng)，也可以用來測蛋白濃度；酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板，一般不用做細(xì)胞培養(yǎng)，它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測，需要更高的要求和特定的酶標(biāo)工作液。 （4）常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量 不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深，一般在2~3mm范圍，結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量（參考下表）。若加液量過多會影響氣體（氧氣）交換，而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細(xì)胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。 常用的培養(yǎng)器皿 培養(yǎng)器皿 底面積（cm2） 加培養(yǎng)液量（mL） 可獲細(xì)胞量 96孔培養(yǎng)板 0.32 0.1 105 24孔培養(yǎng)板 2 1.0 5×105 12孔培養(yǎng)板 4.5 2.0 106 6孔培養(yǎng)板 9.6 2.5 2.5×106 4孔培養(yǎng)板 28 5.0 7×106 3.5cm培養(yǎng)皿 8 3.0 2.0×106 6cm培養(yǎng)皿 21 5.0 5.2×106 9cm培養(yǎng)皿 49 10.0 12.2×106 10cm培養(yǎng)皿 55 10.0 13.7×106 25cm塑料培養(yǎng)瓶 25 5.0 5×106 75cm塑料培養(yǎng)瓶 75 15~30 2×107 25cm玻璃培養(yǎng)瓶 19 4.0 3×106 100cm玻璃培養(yǎng)瓶 37.5 10.0 6×106 250cm玻璃培養(yǎng)瓶 78 15.0 2×107 2500cm旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶 700 100~250 2.5×108 注：各種單層生長的細(xì)胞在培養(yǎng)皿中長滿的細(xì)胞數(shù)，主要取決于器皿底表面積和細(xì)胞體積的大小。上表以Hela細(xì)胞為例給出的可獲細(xì)胞量僅作參考。

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