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  我一直在W等你 2007-05-18 00:00:00

  支原體感染與診斷 支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在0.3-0.5um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。支原體的種類繁多、分布廣泛、造成的危害相當(dāng)大，涉及人、動物、植物及昆蟲等多個領(lǐng)域，給人類健康和科研工作帶來不利影響。 ??從人體分離的16種支原體中，5種對人有致病性，即肺炎支原體（M.pneumoniae）、解脲支原體（Ureaplasma urealyticum）、人型支原體（M.homins）、生殖支原體（M.genitalium）及發(fā)酵支原體（M.fermentans）。 ??從動物體內(nèi)分離并鑒定出了幾十種支原體，僅少部分引起不同程度的疾病，能造成嚴(yán)重危害的有四種，即：絲狀支原體絲狀亞種、雞毒支原體、豬肺炎支原體和絲狀支原體山羊亞種。支原體廣泛分布于植物與昆蟲中，引起植物和昆蟲病害的支原體有植原體和螺原體兩大類。 支原體感染 ??致病支原體中，肺炎支原體起肺炎，人型支原體、解脲支原體和生殖器支原體主要泌尿生殖道感染。支原體肺炎又稱原發(fā)性非典型肺炎，支原體肺炎全年均可發(fā)病，以冬季多見，可有小流行。支原體腦炎是學(xué)齡前兒童及青年人常見的一種肺炎，支原體肺炎主要通過飛沫傳播，潛伏期較長，可達2～3周。支原體肺炎雖然病程較長，肺部病變較重，炎癥吸收較慢，但絕大多數(shù)預(yù)后都是良好的，合并癥亦少。生殖器支原體感染是近年新明確的一種性接觸傳播疾病。成人主要通過性接觸傳播，新生兒則由母親生殖道分娩時感染。成人男性的感染部位在尿道粘膜，女性感染部位在宮頸。新生兒主要引起結(jié)膜炎和肺炎。 支原體的實驗診斷 ??支原體實驗室檢測方法有：形態(tài)學(xué)檢查、支原體培養(yǎng)、抗原檢測、血清學(xué)方法和分子生物學(xué)方法。 解脲支原體MB抗原的研究表明：MB抗原是解脲支原體感染時被識別的主要外膜抗原，具有種特異性，包含血清特異的和交叉反應(yīng)的抗原決定簇。編碼MB抗原的基因長1200多個堿基、N端1/3為保守區(qū)，包含群特異的抗原決定簇：C端2/3是由重復(fù)序列組成的可變區(qū)，包含型特異的抗原決定簇，對該抗原的研究及對于研究疾病的發(fā)病機制和免疫機制起重要作用。MB抗原位于解脲支原體膜的表面，N端固定于膜上使C端重復(fù)區(qū)暴露于微生物周圍的微環(huán)境。N端可以作為其分群分型的基礎(chǔ)，C端Z可能首先與宿主的防御系統(tǒng)相遇而引起主要的抗體反應(yīng)，是理解它的發(fā)病機制和免疫機制的基礎(chǔ)。MB抗原與疾病的關(guān)系，以及它在疾病中的作用還有待進一步探討。 ??測定支原體抗體的血清學(xué)試驗方法中，有支原體特異性血清學(xué)檢測和非特異性血清學(xué)檢測：支原體特異性血清學(xué)檢測方法中，Z常用的是補體結(jié)合試驗，另有間接免疫熒光染色檢查法、生長YZ試驗、代謝YZ試驗、間接血凝試驗、酶免疫法和酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）等。支原體的非特異血清學(xué)方法有肺炎支原體冷凝集試驗與MG鏈球菌凝集試驗，對支原體肺炎能起輔助診斷的作用。檢測特異性抗體IgG的方法尚不能達到早期快速診斷的目的，抗原的檢測為今后研究的發(fā)展方向。目前已有用酶聯(lián)免疫吸附試驗、熒光標(biāo)記抗體、肺炎支原體膜蛋白單克隆抗體和反向間接血凝法直接檢測分泌物和體液中支原體抗原的報道，具有很高的特異度和靈敏度。人體感染肺炎支原體后，能產(chǎn)生特異性IgM和IgG類抗體。IgM類抗體出現(xiàn)早，一般在感染后1周出現(xiàn)，3～4周達高峰，以后逐漸降低。由于肺炎支原體感染的潛伏期為2～3周，當(dāng)患者出現(xiàn)癥狀而就診時，IgM抗體已達到相當(dāng)高的水平，因此IgM抗體陽性可作為急性期感染的診斷指標(biāo)。如IgM抗體陰性，則不能否定肺炎支原體感染， 需檢測IgG抗體。IgG較IgM出現(xiàn)晚，需動態(tài)觀察，如顯著升高提示近期感染，顯著降低說明處于感染后期。由此提示IgG與IgM同時測定，可提高診斷率，達到指導(dǎo)用藥、提高LX之目的。Savyon公司提供支原體IgM、IgG和IgA抗體ELISA檢測試劑盒。 ??支原體分子生物學(xué)檢測方法有基因探針和聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）等方法?；蛱结樀暮怂犭s交法，雖然敏感性和特異性都很高，但基因探針常用同位素標(biāo)記，放射性危害大，設(shè)備要求高且繁瑣難以推廣，近年來發(fā)展的PCR技術(shù)，使得支原體檢測變得簡便、快速、敏感、特異，為支原體的檢測和實驗研究開辟了一個廣闊的前景。 tu1血清標(biāo)本中的MP抗體與板上包被的MP抗原結(jié)合 tu2抗人IgG／IgM/IgA-HRP和板上的抗原抗體復(fù)合物結(jié)合 tu3加入的底物被酶分解的產(chǎn)物的顏色深度與標(biāo)本中抗體的濃度成正比 SeroMP支原體ELISA試劑盒 本試劑盒是檢測支原體肺炎的第三代產(chǎn)品，它通過ELISA法在酶標(biāo)板上完成人血清的IgM、IgG和IgA抗體檢測。沙眼衣原體感染的診斷方法有細胞培養(yǎng)、直接抗原檢測、分子生物學(xué)和血清學(xué)方法。直接抗原檢測法中獲取標(biāo)本（在感染部位取材）較困難，所得結(jié)果可靠性也不強。而本試劑盒采用的血清學(xué)檢測以血清為標(biāo)本，可檢測各個部位和各個時期的肺炎衣原體感染，并且某一類型的抗體象征疾病處于一定發(fā)展階段。 細胞培養(yǎng)支原體感染 ??細胞培養(yǎng)（特別是傳代細胞）被支原體污染是個世界性問題。國內(nèi)外研究表明，95％以上是以下四種支原體：口腔支原體（M.orale）、精氨酸支原體（M.arginini）、豬鼻支原體（M.hyorhinis）和萊氏無膽甾原體（A.laidlawii），為牛源性。以上是Z常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。 ??支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染（一些支原體在人體是正常菌群）、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。 ??組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染；嚴(yán)格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體Z突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如 -內(nèi)酰胺類、萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素（polymycin）、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體Z有YZ活性及常用于支原體感染ZL的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些氟喹諾酮；其他類抗生素如氨基糖苷類、氯霉素對支原體有較小YZ作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)ZL劑。InvivoGen公司研究開發(fā)的新一代支原體抗生素M-Plasmocin能有效地殺滅支原體，不影響細胞本身的代謝，并且用M-Plasmocin處理過的培養(yǎng)細胞，不會重新感染支原體。 參考資料：http://www.labsky.com/data/02/09/clinic/0902172737387.htm

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