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- vg枯產(chǎn)喏 2011-12-12 00:00:00
- 給你畫了個圖，才發(fā)現(xiàn)不能上傳，自個從diyi次擴(kuò)增畫畫，很容易
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- jinjijinn 2011-12-12 00:00:00
- 你好，在PCR擴(kuò)增中，目標(biāo)片段的長度主要是由引物的特異性結(jié)合來控制的。在diyi次擴(kuò)增中，因為DNA兩條鏈分別只有一條引物結(jié)合，這樣taq聚合酶理論上是延伸很長的距離的，但由于我們控制了延伸時間，新合成的鏈不會長的非常多。所以diyi次擴(kuò)增得到的DNA是兩條長（原始鏈），兩條中等長（新鏈）。 第二次擴(kuò)增反應(yīng)時，引物和上次反應(yīng)合成的鏈結(jié)合，之前上游引物指導(dǎo)和成的鏈現(xiàn)在在3‘端和下游引物結(jié)合，而下游指導(dǎo)合成的鏈在它的3’端上游引物結(jié)合，此時，新合成的鏈只會合成到上一次合成的鏈引物的起始處，因為這條鏈的5’端只有這么長。這樣第二次合成的DNA，就有兩條目標(biāo)DNA分子長度的鏈（新鏈），和diyi次合成的中等長度的鏈（舊鏈）。 第三次反應(yīng)的時候，第二次反應(yīng)的鏈再次結(jié)合引物的時候，就是我們的目標(biāo)雙鏈DNA分子了。
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