前言

結(jié)核病（TB）仍然是單一傳染源的首要死亡原因。2017年，估計(jì)出現(xiàn)了超過55萬例耐多藥/利福平結(jié)核病（MDR/RR-TB）新病例，強(qiáng)調(diào)需要新的治療策略。利奈唑胺（LZD）是一種治療耐藥革蘭氏陽性感染的有效抗生素，也是結(jié)核病的有效治療方法。然而，長期使用LZD可導(dǎo)致LZD相關(guān)的宿主毒性，常見的是gusui抑制。LZD毒性可能由IL-1介導(dǎo)，IL-1是結(jié)核分枝桿菌感染期間早期免疫的重要炎癥途徑。然而，IL-1可導(dǎo)致結(jié)核病進(jìn)展后期的病理學(xué)和疾病嚴(yán)重性。

由于IL-1可能有助于LZD毒性，并確實(shí)影響結(jié)核病病理學(xué)，因此本實(shí)驗(yàn)將這一途徑作為潛在的宿主導(dǎo)向治療（HDT）的靶點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)假設(shè)LZD的療效可以通過調(diào)節(jié)IL-1途徑來增強(qiáng)，以減少gusui毒性和結(jié)核相關(guān)炎癥。

本文使用兩種結(jié)核病動(dòng)物模型進(jìn)行研究，一種是結(jié)核病易感小鼠模型和臨床相關(guān)獼猴。在本研究中應(yīng)用Echo Revolve正倒置一體熒光顯微鏡首先對(duì)小鼠肺組織的病變情況進(jìn)行觀察，以及肺組織病變面積的測(cè)量及可視化呈現(xiàn)；其次觀察獼猴胸骨gusui組織切片，比較細(xì)胞數(shù)量和差異性變化。熒光顯微鏡觀察鼠抗CD3e、鼠抗Ly-6G抗體在肺組織中的特異性表達(dá)情況。

通過蘇木精-伊紅（HE）染色對(duì)WT或Nos2-/-小鼠的單個(gè)肺葉進(jìn)行組織病理學(xué)分析。αIL-1R1治療降低了肺臟的平均細(xì)菌負(fù)荷（圖1）。αIL-1R1治療沒有加重任何一種小鼠株的疾病。

▲ 圖1 蘇木精-伊紅（HE）染色對(duì)WT或Nos2-/-小鼠單個(gè)肺葉的組織病理學(xué)分析結(jié)果

作者使用鼠抗CD3e、鼠抗Ly-6G抗體孵育，在Echo Revolve 4熒光顯微鏡DAPI FITC和RFP3個(gè)通道下分別觀察繼發(fā)性熒光和自發(fā)性熒光，將3個(gè)通道的圖像疊加，可觀察到圖像中的紫色為抗體在肺組織中特異性表達(dá)，見圖2。

由于對(duì)Mtb感染和LZD治療產(chǎn)生的IL-1β在很大程度上取決于NLRP3炎癥體，本文還研究了一種方案，其中在感染后56天和77天之間施用LZD和小分子NLRP3yizhi劑（MCC950）。如αIL-1R1所觀察到的，與LZD單獨(dú)相比，添加MCC950減少了肺中的PMN數(shù)量，并且沒有顯著改變細(xì)菌殺滅（圖2）。

▲ 圖2 不同治療組的肺部組織免疫熒光圖像

用DAPI染色的細(xì)胞核（藍(lán)色）、用鼠抗CD3ε染色的T細(xì)胞（綠色）和用鼠抗Ly-6G染色的中性粒細(xì)胞（紅色）

為了證實(shí)我們的觀察結(jié)果，病理學(xué)家評(píng)估了獼猴gusui組織切片。結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同治療組，如TB組、LZD組和LZD+IL-1Rn組在細(xì)胞數(shù)量（髓系：紅系比率）或異常方面沒有明顯差異（圖3）。

▲圖3 獼猴尸檢時(shí)獲得的胸骨gusui的代表性HE圖像

圖片中的左側(cè)圖像為20X拍攝結(jié)果，右側(cè)圖像為40X拍攝結(jié)果

研究亮點(diǎn)：

?  本文使用Echo Revolve正倒置一體熒光顯微鏡眀場(chǎng)清晰觀察到小鼠肺組織的病灶情況，還清晰觀察到獼猴胸骨gusui細(xì)胞分布狀況以及進(jìn)行不同治療組間細(xì)胞數(shù)量比較；眀場(chǎng)可一鍵快速切換到熒光成像，熒光觀察對(duì)不同治療組的肺部組織中的抗體特異性表達(dá)進(jìn)行清晰觀察。

?  闡明了小鼠和獼猴之間gusui抑制的差異突出了在人類實(shí)驗(yàn)之前評(píng)估多個(gè)模型中HDT的重要性；在兩種模型中，IL-1Rn給藥對(duì)宿主的影響，以及對(duì)Mtb和LZD功效的反應(yīng)，可以通過顯微鏡觀察兩種模型細(xì)胞中的病灶變化，細(xì)胞數(shù)量以及差異性變化來鑒定IL-1與LZD聯(lián)合抑制是否對(duì)結(jié)核病治療有效。本文研究數(shù)據(jù)為IL-1Rn作為結(jié)核病的潛在治療提供了臨床前數(shù)據(jù)。

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全自動(dòng)氮吹儀在實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)分析中的作用：
環(huán)境分析：
全自動(dòng)氮吹儀還廣泛運(yùn)用于環(huán)境監(jiān)測(cè)中，如飲用水、地下水和污染水水樣檢測(cè)分析。如今工業(yè)飛速發(fā)展，地下水、應(yīng)用水均受到較大程度的污染，氮吹儀在水質(zhì)檢測(cè)時(shí)，將水質(zhì)加熱結(jié)晶，通過氣相色譜儀對(duì)水中的雜質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)分析。
生物分析：
全自動(dòng)氮吹儀在生物分析中的應(yīng)用以血清、血漿、血液、尿液的檢測(cè)為例，它們是人體的重要組成部分，使人體維持平衡狀態(tài)并正常運(yùn)行，通過對(duì)血清、血漿、血液、尿液的檢測(cè)分析中，有利于病因分析。
食品飲料：
人們?nèi)粘：鹊娘嬃?，如牛奶、酒、飲料等的質(zhì)量如何監(jiān)測(cè)？前幾年奶粉中毒事情、白酒中工業(yè)酒精超標(biāo)事情都常有發(fā)生，市面上賣的可樂、果汁等飲料都是對(duì)人體有害的。如今食品安全問題已經(jīng)引起人們的高度重視，相關(guān)部門對(duì)食品飲料的檢測(cè)也越來越嚴(yán)格。

隨著實(shí)驗(yàn)室教學(xué)、醫(yī)療工業(yè)等領(lǐng)域的深入研究，常規(guī)的雙目觀察顯微鏡已經(jīng)普遍滿足不了研究的基本需求，因此三目觀察顯微鏡，即可連接顯微鏡相機(jī)的顯微鏡，來滿足當(dāng)代研究的需求，其中，顯微鏡相機(jī)的連接需要一個(gè)至關(guān)重要的附件——顯微鏡相機(jī)接口。
顯微鏡相機(jī)接口是連接顯微鏡和數(shù)碼設(shè)備顯微鏡相機(jī)所必需的設(shè)備，它不僅只是起到連接作用，對(duì)顯微鏡所成的圖像真實(shí)地顯示在顯示器起至關(guān)的作用。由于光學(xué)成像是一個(gè)很復(fù)雜的過程，顯微鏡相機(jī)接口對(duì)光的補(bǔ)償、透過率、色散、平衡、強(qiáng)弱等都有很大的影響，對(duì)圖像的矯正、補(bǔ)償都起了很大的作用。通過接口，顯微鏡可以將樣品的顯微圖像通過相機(jī)進(jìn)行高清展現(xiàn)，而相機(jī)也可以捕捉到常規(guī)拍攝中無法呈現(xiàn)的顯微鏡下的微觀圖像。所以顯微鏡接口對(duì)真實(shí)圖像的分析和攝錄影像也是一個(gè)重要的環(huán)節(jié)。

實(shí)驗(yàn)室顯微鏡放大倍數(shù)計(jì)算

失效分析 趙工 半導(dǎo)體元器件失效分析可靠性測(cè)試 昨天

很多實(shí)驗(yàn)室都在使用顯微鏡，但對(duì)顯微鏡的相關(guān)專業(yè)知識(shí)并不了解，只是知道怎么去操作，但對(duì)于一些基本常識(shí)可能都不怎么清楚，那么今天我們就來講講有關(guān)顯微鏡的放大倍率是如何計(jì)算的？ 

也許有人會(huì)說這不是很簡單的問題嘛，但實(shí)際還是有點(diǎn)小復(fù)雜的。

首先我們來舉個(gè)例子來說：當(dāng)體視顯微鏡目鏡的倍率為10倍，變倍體變倍范圍是：0.7X-4.5X，附加物鏡為：2X。那它的光學(xué)放大倍率為：10乘0.7乘2得到這款顯微鏡的Z低倍率為：14倍，那Z大倍數(shù)為：10乘4.5乘2等于90倍，那這款體視顯微鏡的光學(xué)總放大倍率就是14倍到90倍。當(dāng)然這只是顯微鏡主機(jī)的實(shí)際放大倍率。接下來是顯微鏡數(shù)碼放大倍率。

比如顯示器的尺寸為17寸，用的是1/3的顯微鏡攝像頭，那對(duì)照下面的表顯微鏡攝像頭的數(shù)字放大倍率是：72倍。那顯微鏡的數(shù)碼放大倍率安計(jì)算公式計(jì)法是：以上面體視顯微鏡的配置算，變倍體是變倍體是0.7X-4.5X,附加物鏡是2X。攝像目鏡為1（如攝像目鏡無倍數(shù)不用加入計(jì)算）。按照公式：物鏡X攝像目鏡放大率X數(shù)字放大率，數(shù)碼放大Z小倍率為：0.7乘2乘1乘72等于：100.8倍，數(shù)碼放大Z大倍率為：4.5乘2乘1乘72等于：648倍.那數(shù)碼放大倍數(shù)范圍就是100.8倍到648倍。

這樣的話就會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)公式：

1、光學(xué)總放大倍率=目鏡的倍率X物鏡放大倍率

2、數(shù)字總放大倍率=物鏡X攝像目鏡放大率X數(shù)字放大率

這公式對(duì)于任何一臺(tái)顯微鏡都合適，無論是金相顯微鏡，生物顯微鏡等等。