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  839852376 2016-07-03 00:00:00

  細(xì)菌鑒定是指將分離培養(yǎng)獲得的病原菌，通過純化培養(yǎng)使其達(dá)到不含有其他微生物的純培養(yǎng)程度，繼而進(jìn)行系統(tǒng)鑒定。而菌種保藏機(jī)構(gòu)在收集一些已經(jīng)凍干的菌種時(shí)，應(yīng)在開啟后經(jīng)過兩代的適應(yīng)性培養(yǎng)方可進(jìn)行復(fù)核性的系統(tǒng)鑒定。系統(tǒng)鑒定是通過細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生長特性、抗原性、病原性以及目前流行的核酸測定方法等檢測，并用已知標(biāo)準(zhǔn)免疫血清確定分離細(xì)菌的屬、種和型(群)。目前菌種保藏機(jī)構(gòu)通常使用的細(xì)菌鑒定方法大致有以下幾種： 1、傳統(tǒng)方法 常規(guī)宏觀菌落形態(tài)學(xué)觀察，主要觀察菌落在其適合的培養(yǎng)基上的生長狀況：細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上的生長形態(tài)、大孝顏色是否均勻一致，菌落個(gè)體表面及邊緣的生長狀況;在液體培養(yǎng)基上的渾濁狀況、沉淀狀況、液面菌膜狀況;半固體上穿刺接種后，觀察細(xì)菌是否沿著接種線生長以及其生長狀態(tài)是呈毛刷樣生長還是均勻生長，上下生長是否一致。在鑒別培養(yǎng)基上培養(yǎng)。 細(xì)菌的個(gè)體形態(tài)學(xué)觀察，即通過顯微鏡觀察。觀察前細(xì)菌需要著色，要根據(jù)預(yù)先確定的觀察項(xiàng)目選擇與之相對應(yīng)的染色方法，目前常用的染色方法包括革蘭氏染色法、美藍(lán)染色法、Ziehl—Neelsen染色法、姬姆薩染色法、鞭毛染色法、芽胞染色法等。盡量挑選對數(shù)生長期的細(xì)菌進(jìn)行染色觀察，此時(shí)的細(xì)菌生長處于幼期，利于觀察，因?yàn)橐恍╆惻f細(xì)菌的染色結(jié)果會有變化，如本為革蘭氏陽性菌經(jīng)過長期擱置后染色結(jié)果可能為革蘭氏陰性。同時(shí)細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)要注意培養(yǎng)基的挑選，一些細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)如莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞等，其表達(dá)是需要在特定的培養(yǎng)基上才能正常發(fā)育，有的細(xì)菌如炭疽在一般的培養(yǎng)基上不形成莢膜，只在動物體內(nèi)形成明顯的莢膜，所以需先接種實(shí)驗(yàn)動物后用病料進(jìn)行涂片鏡檢。在鏡檢時(shí)觀察細(xì)菌基本形態(tài)結(jié)構(gòu)和大小及其排列狀態(tài)、菌端形狀、有無兩極染色、有無形成芽胞和莢胞等。

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  博學(xué)女生 2016-07-22 00:00:00

  細(xì)菌鑒定的基本原則是通過細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生長特性、抗原性、病原性以及目前流行的核酸測定方法等檢測，并用已知標(biāo)準(zhǔn)免疫血清確定分離細(xì)菌的屬、種和型。 細(xì)菌鑒定提取基因組DNA，然后PCR擴(kuò)增16s rDNA片段，上GeneBank對比即可。一般序列相似度在97%以上就可以認(rèn)為是同種細(xì)菌。常規(guī)鑒定內(nèi)容有形態(tài)特征和理化特性。形態(tài)特征包括顯微形態(tài)和培養(yǎng)特征；理化特性包括營養(yǎng)類型、碳氮源利用能力、各種代謝反應(yīng)、酶反應(yīng)和血清學(xué)反應(yīng)等，可以檢測微生物的特征指紋圖譜，建立與微生物種類相對應(yīng)的數(shù)據(jù)庫。通過軟件將待測微生物與數(shù)據(jù)庫參比，得出鑒定結(jié)果。

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