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簡(jiǎn)述進(jìn)行產(chǎn)物的純化有哪些方法,它們的純化機(jī)理分別是什么

找房888899 2017-07-18 02:54:09 475  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • 可愛(ài)的好事 2017-07-19 00:00:00
    那要看你的PCR產(chǎn)物有沒(méi)有非特異性帶,如果你PCR產(chǎn)物跑膠后很純的只有一條帶(不算引物二聚體),那么就不需要切膠純化,傳統(tǒng)法就是將PCR產(chǎn)物加入2倍體積的乙醇-20度沉淀過(guò)夜后低速短暫離心(如 3000rpm離心1~2min),棄掉上清,然后用70%乙醇洗滌一次后,棄掉乙醇,放干后再用無(wú)菌水或者TE溶解。當(dāng)然這種方法對(duì)PCR產(chǎn)物純化后回收率是很低的,你需要多做幾管PCR,然后一起純化回收。所以你Z好去買PCR產(chǎn)物純化試劑盒,這個(gè)方法現(xiàn)在只是沒(méi)有試劑盒的情況下應(yīng)急的。如果是PCR產(chǎn)物跑膠后有兩條以上的帶,那么你就得切膠回收目的片段,這個(gè)時(shí)候還是買切膠回收試劑盒,傳統(tǒng)法不是沒(méi)有,但現(xiàn)在用的太少。如果有興趣了解,歡迎追問(wèn)。 但無(wú)論哪種情況,純化前后都需要跑電泳的。

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