全部評(píng)論(2條)
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- yuzmzz 2011-11-21 00:00:00
- 特異性DNA序列體外引物定向酶促擴(kuò)增技術(shù)
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- CH68453622 2011-11-21 00:00:00
- 聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ，PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。 PCR技術(shù)的基本原理 類似于DNA的 天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加 熱至93℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；②模板DNA與引 物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合 物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA 鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需 2～4分鐘，2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍。到達(dá)平臺(tái)期(Plateau)所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。 定點(diǎn)誘變：設(shè)計(jì)引物時(shí)對(duì)引物進(jìn)行修改，使其在某些位點(diǎn)上與擴(kuò)增模板不相配對(duì)，但是又不影響引物與模板的退火，這種引物擴(kuò)增后的到的產(chǎn)物就是在這些不配對(duì)區(qū)發(fā)生了定點(diǎn)突變。 分子標(biāo)記的鑒別：RAPD擴(kuò)增的片斷是引物之間的區(qū)域，不同個(gè)體引物之間的序列長(zhǎng)度不同，可以作為物種或個(gè)體的一種標(biāo)記，這是分子水平的標(biāo)記，也稱分子標(biāo)記。 基因克?。悍聪騊CR。
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接觸角（contact angle）是指在氣、液、固三相交點(diǎn)處所作的氣-液界面的切線，此切線在液體一方的與固-液交界線之間的夾角θ，是衡量該液體對(duì)材料表面潤(rùn)濕性能的重要參數(shù)。若θ<90°，則固體表面是親水性的，即液體較易潤(rùn)濕固體，其角越小，表示潤(rùn)濕性越好；若θ>90°，則固體表面是疏水性的，即液體不容易潤(rùn)濕固體，容易在表面上移動(dòng)。
測(cè)量液體在固體表面的接觸角一般有二種方法：天平稱量法和光學(xué)法。
1. 天平稱量法是間接測(cè)量法，這一方法只適用于幾何形狀規(guī)則的固體表面（如圓柱體和長(zhǎng)方形薄板），而且測(cè)量的也只能是整個(gè)接觸周邊表面上的平均接觸角值，不能只限于測(cè)量其中的一個(gè)面。
2. 光學(xué)法是建立在直接觀測(cè)液滴在固體表面的接觸界面的測(cè)量法，是一種直接測(cè)量法。它幾乎不受固體表面幾何形狀和尺寸的限制，適用性廣，測(cè)量模式眾多，而且測(cè)量多可在與實(shí)際應(yīng)用相同或相似的條件下進(jìn)行。
接觸角測(cè)量不僅可用于常見的材料表面性能的表征, 而且在石油工業(yè)、浮選工業(yè)、醫(yī)藥材料、芯片產(chǎn)業(yè)、低表面能無毒防污材料、油墨、化妝品、農(nóng)藥、印染、造紙、織物整理、洗滌劑、噴涂、污水處等領(lǐng)域也有著重要的應(yīng)用。
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