全部評(píng)論(1條)
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- 發(fā)給e5r5r 2015-12-23 00:00:00
- 1、減少影響試驗(yàn)結(jié)果的因素 2、用合適的試驗(yàn)方法 3、用精確的實(shí)驗(yàn)儀器 4、讀數(shù)要精確 5、多次試驗(yàn)取平均值
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- 怎樣減少ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中的誤差?
怎樣減少ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中的誤差?
ELISA檢測(cè)試劑盒是用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。ELISA檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。但是您知道嗎?如果您在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中犯了以下幾個(gè)小錯(cuò)誤的話(huà)也會(huì)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)誤差的哦!下面跟隨天津本生小編來(lái)看看下:
1.做實(shí)驗(yàn)時(shí)少說(shuō)話(huà),防止唾液掉進(jìn)酶標(biāo)條中。
2.加入一抗二抗需要放入37°。
3.如果同時(shí)做多個(gè)板子,多個(gè)板子別羅一起;盡量少用排槍。
4.加樣時(shí),由低濃度向高濃度加,這樣減少跳孔的幾率。
5.勤換槍頭。
注:
一、移液器的使用,加樣(抗體)等需要準(zhǔn)確定量的試劑時(shí)不使用排槍?zhuān)?jīng)驗(yàn)證明排槍很不準(zhǔn)確,極易跳孔,不要圖便宜買(mǎi)低檔的tips 因?yàn)镋LISA不但會(huì)放大被檢測(cè)的目的蛋白,也會(huì)放大非特異結(jié)合的雜質(zhì)蛋白。
二、倍比稀釋樣品時(shí),稀釋倍數(shù)要小于10。
三、所有的裝跟ELISA檢測(cè)試劑盒相關(guān)試劑的容器,玻璃制品的要干烤過(guò)或者使用一次性的樹(shù)脂容器。
怎樣減少ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中的誤差?我司由具有行業(yè)背景和豐富市場(chǎng)經(jīng)驗(yàn)的業(yè)人士組成,于為生命科學(xué)研究域提供產(chǎn)品,為廣大科研工作者提供服務(wù)。 既能滿(mǎn)足研發(fā)類(lèi)客戶(hù)對(duì)產(chǎn)品種類(lèi)、包裝的特殊要求,也能滿(mǎn)足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)模化生產(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。
- 減少ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中的誤差您知道嗎?
減少ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中的誤差您知道嗎?
ELISA檢測(cè)試劑盒是用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。ELISA檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。但是您知道嗎?如果您在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中犯了以下幾個(gè)小錯(cuò)誤的話(huà)也會(huì)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)誤差的哦!
1.做實(shí)驗(yàn)時(shí)少說(shuō)話(huà),防止唾液掉進(jìn)酶標(biāo)條中。
2.加入一抗二抗需要放入37°。
3.如果同時(shí)做多個(gè)板子,多個(gè)板子別羅一起;盡量少用排槍。
4.加樣時(shí),由低濃度向高濃度加,這樣減少跳孔的幾率。
5.勤換槍頭。
注:
一、移液器的使用,加樣(抗體)等需要準(zhǔn)確定量的試劑時(shí)不使用排槍?zhuān)?jīng)驗(yàn)證明排槍很不準(zhǔn)確,極易跳孔,不要圖便宜買(mǎi)低檔的tips 因?yàn)镋LISA不但會(huì)放大被檢測(cè)的目的蛋白,也會(huì)放大非特異結(jié)合的雜質(zhì)蛋白。
二、倍比稀釋樣品時(shí),稀釋倍數(shù)要小于10。
三、所有的裝跟ELISA檢測(cè)試劑盒相關(guān)試劑的容器,玻璃制品的要干烤過(guò)或者使用一次性的樹(shù)脂容器。
怎樣減少ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中的誤差?我司由具有行業(yè)背景和豐富市場(chǎng)經(jīng)驗(yàn)的業(yè)人士組成,于為生命科學(xué)研究域提供產(chǎn)品,為廣大科研工作者提供服務(wù)。 既能滿(mǎn)足研發(fā)類(lèi)客戶(hù)對(duì)產(chǎn)品種類(lèi)、包裝的特殊要求,也能滿(mǎn)足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)?;a(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。
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- 如何減少ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中背景因素?
如何減少ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中背景因素?
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的原理在我們平時(shí)看來(lái)覺(jué)得很簡(jiǎn)單,無(wú)非就是固定抗原,添加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗滌和閉。然而,即使是平常的洗滌和封閉,如果做得不太好,也有可能影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)。在做完實(shí)驗(yàn)時(shí),我們是否能獲得有用的信息,這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。背景噪音會(huì)直接關(guān)系到結(jié)果的判斷。那么怎樣才能降低ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的背景因素呢,我們一起來(lái)了解。
洗滌很重要
洗滌步驟看似很無(wú)聊,其實(shí)很重要,因?yàn)槿绻唇Y(jié)合的材料(如非特異結(jié)合的抗體或檢測(cè)試劑)殘留在微孔板中,那么它會(huì)增加背景噪音。如有必要,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會(huì)阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過(guò)高,而您懷疑洗滌不夠時(shí),可以嘗試增加洗滌次數(shù)。
封閉更關(guān)鍵
封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這就降低了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會(huì)。您當(dāng)然也希望抗體只與目的蛋白結(jié)合吧。如果您的背景過(guò)高,懷疑封閉不充分,那么您可以嘗試使用更高濃度的封閉液,或適當(dāng)延長(zhǎng)封閉時(shí)間。如果您一直被背景問(wèn)題所困擾,那么也許您該花些時(shí)間來(lái)優(yōu)化封閉液。這可能需要時(shí)間,但也是值得的。目前主要有兩種類(lèi)型的封閉液:蛋白和非離子型去污劑。您使用的類(lèi)型須取決于多個(gè)因素,包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、您的抗體和檢測(cè)試劑。好的封閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合,但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測(cè)試劑發(fā)生相互作用。zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩(wěn)定,在去除洗滌過(guò)程中的一些非特異結(jié)合上很有用。但它們只在存在時(shí)起作用,因?yàn)楹苋菀妆幌吹?。因此所有洗滌液中也必須添加封閉液。請(qǐng)勿使用高濃度(正常濃度為0.01-0.1%),它會(huì)降低特異結(jié)合,產(chǎn)生假陰性。另一個(gè)選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液,后者可協(xié)助洗滌過(guò)程中的封閉。蛋白封閉液則有所不同。它們與開(kāi)放位點(diǎn)結(jié)合并封閉,同時(shí)穩(wěn)定與微孔板結(jié)合的抗原分子。常用的蛋白封閉液包括牛血清白蛋白(BSA)、脫脂奶粉、正常血清和魚(yú)明膠。
抗體濃度須優(yōu)化
如果試劑稍有不同,則可能需要優(yōu)化抗體的量。記住,非特異的抗體結(jié)合會(huì)增加背景。為了防止這一點(diǎn),切勿使用過(guò)多的一抗或二抗。
檢測(cè)試劑要適量
另一點(diǎn)也很顯而易見(jiàn):切勿使用過(guò)多的檢測(cè)試劑。如果濃度過(guò)高,或者未正確稀釋?zhuān)瑒t會(huì)導(dǎo)致高背景。也不要顯色過(guò)度,如有必要,優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)加入終止液。
相信在注意這些細(xì)節(jié)后,我們就可以降低ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中背景因素,才可以獲得我們想要的結(jié)果信息。
本生(天津)健康科技有限公司由具有行業(yè)背景和豐富市場(chǎng)經(jīng)驗(yàn)的專(zhuān)業(yè)人士組成,于為生命科學(xué)研究領(lǐng)域提供產(chǎn)品,為廣大科研工作者提供服務(wù)。 既能滿(mǎn)足研發(fā)類(lèi)客戶(hù)對(duì)產(chǎn)品種類(lèi)、包裝的特殊要求,也能滿(mǎn)足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)模化生產(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。
產(chǎn)品涵蓋有熒光定量PCR耗材(八聯(lián)管,單管,96孔板,384孔板,封板膜,輔助器等),ELISA試劑盒,移液器吸嘴,離心管,凍存管,培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,吸頭,儀器及手套,培養(yǎng)基,抗體,血清,色譜耗材,針頭過(guò)濾器及實(shí)驗(yàn)室常用耗材。 品種類(lèi)超過(guò)萬(wàn)種,廣泛應(yīng)用于科研院校、ZX實(shí)驗(yàn)室、分子生物學(xué)等科研領(lǐng)域。
如何減少ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中背景因素?本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。
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