臺式萬用表，一種多用途電子測量儀器，一般包含安培計、電壓表、歐姆計等功能，也是電子工程師工作臺上必不可少的電測儀器，那么如果儀器出現(xiàn)問題該怎么辦呢？下面安泰測試分享一下臺式萬用表故障維修處理方法：

1、通過外部的設(shè)備情況判斷臺式萬用表是否出現(xiàn)故障，比如外觀檢查，觀察有沒有脫線。斷線、脫焊、燒壞元件等，或者是機械損傷或是斷裂等一些情況進行判斷。這時候可以戴上絕緣手套，直接用手檢查元件，勘察有誒有出現(xiàn)松動，之后再轉(zhuǎn)換開關(guān)，判斷是否卡帶。

2、通過測量各個部位的用電參數(shù)，例如電壓、電流、電阻等參數(shù)，因為一般情況下各關(guān)鍵點的工作電壓是恒定的，如果出現(xiàn)沒有電壓電流，或者電壓電阻過高過低的現(xiàn)象，這樣才可較快找出故障點。

3、測試臺式萬用表是否短路的方法，在我們知道其他原件設(shè)備完好的情況下，使用A/D轉(zhuǎn)換器來測量臺式萬用表是否出現(xiàn)短路了，這種方法對于臺式萬用表是很好使用的。

4、測量臺式萬用表是否斷路，因為如果沒有電流通過，任何參數(shù)都是沒有參考價值的，檢查電源是否接通，飯后對把整個臺式萬用表從整機或單元電路中斷開，若臺式萬用表有參數(shù)，表示就是臺式萬用表斷路了。

在最后，需要提醒大家一點就是，任何情況再在使用完臺式的萬用表后，必須將臺式萬用表的電源關(guān)掉，還有一種情況，如果臺式的萬用表使用的頻率不是那么高，不是經(jīng)常使用到，此時需要將萬用表中的電池取下，因為如果電池沒有取下來，很容易損傷臺式萬用表的電路元件。

臺式萬用表的保養(yǎng)：

1、不要接高于1000V直流電壓或高于700V交流有效值電壓。

2、不要在功能開關(guān)處于Ω和位置時，將電壓源接入。

3、在電池沒有裝好或后蓋沒有上緊時，請不要使用此表。

4、只有在測試表筆移開并切斷電源以后，才能更換電池或保險絲。

建議大家在使用臺式萬用表時，嚴(yán)格按照操作說明使用，減少人為損壞，如果您的臺式萬用表出現(xiàn)了故障無法修復(fù)，歡迎訪問安泰測試，安泰測試可維修臺式萬用表故障：不開機、開機異響、炸機、死機、無輸出、輸出不穩(wěn)定、輸出超差、顯示值亂跳、燒產(chǎn)品、無法連接電腦等。

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既然儀器已經(jīng)備好了，那么該怎樣選擇檢測方法呢？

眾所周知，qPCR依托于熒光檢測技術(shù)，通過使用DNA結(jié)合染料、熒光PCR引物或探針等實時監(jiān)測目的基因的擴增，從而對目的基因進行定量分析。為了避免在實驗時出差錯，下面就跟著小編一起來看一下常用的經(jīng)典方法吧~

1、 DNA結(jié)合染料—SYBR Green I 法

?  原理：SYBR Green I 是一種DNA結(jié)合染料，其與雙鏈DNA結(jié)合后，熒光大大增強，DNA與染料結(jié)合所釋放的熒光量與dsDNA的數(shù)量成正比。因此，檢測到的熒光信號可反映出PCR體系存在的雙鏈DNA數(shù)量。

?  特征：可逆熒光，Z大吸收波長497nm，Z大發(fā)射波長520nm。

?  適用情況：非特異性的熒光染料，不能識別特定的雙鏈，只要是雙鏈（包括非特異性擴增產(chǎn)物、引物二聚體等）就會結(jié)合發(fā)光，在臨床上使用可能會有假陽性發(fā)生。但該方法容易建立實驗體系，可進行熔點分析，通用性好，價格相對較低，在科研中使用比較普遍。

2 、TaqMan 探針法

?  原理：檢測時除了需要一對特異性引物外，還需要一條與靶序列互補配對的寡核苷酸鏈—TaqMan探針，其5’末端包含熒光報告基團R，3’末端為淬滅基團Q。當(dāng)探針與靶序列互補配對時，熒光基團發(fā)射的熒光因與3’端的淬滅基團接近而淬滅。在進行延伸反應(yīng)時，聚合酶的5’核酸外切酶活性將探針切斷，使得熒光基團與淬滅劑分離，發(fā)射熒光。熒光信號和產(chǎn)物的量相匹配。

?  特征：檢測到的是積累熒光，隨著循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團不斷積累。

?  適用情況：特異性較強，可進行多重qPCR分析，但成本較染料法要高一些，實驗構(gòu)建相對復(fù)雜。常用的熒光基團推薦：FAM、VIC、HEX、CY5等。

3 、分子信標(biāo)(molecular beacon)

?  原理：分子信標(biāo)方法在檢測時除了需要一對引物以外，還需要一條呈發(fā)夾結(jié)構(gòu)的寡核苷酸探針（25-40nt），分子信標(biāo)的 5'端附有熒光報告基團，3'端附有淬滅基團，環(huán)被設(shè)計成與靶序列互補的15–30核苷酸，其兩端各有5-7個核苷酸互補形成莖結(jié)構(gòu)，將報告基團與淬滅基團連接到一起。發(fā)夾結(jié)構(gòu)中，由于報告基團接近淬滅基團，監(jiān)測不到熒光信號，當(dāng)環(huán)的部分與核酸序列互補配對，分子信標(biāo)打開成鏈狀，使得熒光基團與淬滅劑分開，發(fā)射熒光。

?  特征：莖環(huán)結(jié)構(gòu)，也是積累熒光。

?  適用情況：高特異性、可以用于多重反應(yīng)，適合區(qū)分等位基因。但不能做熔點分析；發(fā)夾的莖結(jié)合過強過弱都不合適，過強的話，信標(biāo)不能與靶標(biāo)正確雜交，過弱的話，會隨機折疊成非發(fā)夾結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致產(chǎn)生雜信號。常用的熒光基團有FAM 、Texas Red等。

4  、熒光共振能量傳遞(FRET)

?  原理：FRET探針又稱雙雜交探針，由兩條相鄰探針組成。一個探針3'端帶有供體基團，第二個探針的5'端帶有受體基團，在PCR反應(yīng)的退火步驟，兩條探針頭尾相連地分別雜交在靶標(biāo)序列上，熒光分子接近，從供體到受體產(chǎn)生熒光共振能量傳遞，受體熒光信號的增加與擴增子出現(xiàn)的量成比例。

?  特征：由于FRET探針是靠近發(fā)光，所以檢測信號是實時信號，而非積累熒光。

?  適用情況：除引物外需要設(shè)計兩條探針，通用性不高；需挑選合適的供體及受體基團，供體基團發(fā)射波長與受體基團的激發(fā)波長需顯著重疊，而供體基團發(fā)射波長與受體基團的發(fā)射波長要明顯分離?？勺鋈埸c分析，特異性較強。

5 、 LUX Primers

?  原理：LUX (light upon extention) 引物是通過熒光標(biāo)記的引物，使引物可以實現(xiàn)探針的功能。其原理和分子信標(biāo)類似，LUX引物也是發(fā)夾結(jié)構(gòu)，其中一條引物3’端用熒光報告基團標(biāo)記。在沒有單鏈模板的情況下，該引物自身配對，形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，使熒光淬滅。在模板存在的情況下，引物與模板配對，發(fā)夾結(jié)構(gòu)打開，產(chǎn)生熒光信號。

?  特征：積累熒光；不需要額外設(shè)計探針。

?  適用情況：不能進行熔點分析，通用性比不上SYBR Green I。但不需要專門設(shè)計探針，同時不會受非特異性擴增產(chǎn)物和引物二聚體的影響，特異性較SYBR Green I強。

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看完了上面關(guān)于經(jīng)典qPCR檢測方法的介紹，您是不是有想去跑一輪qPCR的沖動呢？

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在小伙伴們的千呼萬喚中，廈門海關(guān)技術(shù)中心的徐敦明博士3月31日給大家?guī)砹嘶瘜W(xué)檢驗方法驗證的講座； 因為這是正在修訂中的食品安全國家強制性標(biāo)準(zhǔn)，所以大家的期待都非常高。  

化學(xué)檢驗方法驗證

  感謝徐老師的精彩講解，直播間的小伙伴們熱情高漲，一個多小時的講座很快結(jié)束了，但學(xué)員們?nèi)曰匚稛o窮，紛紛在留言區(qū)問什么時候可以看回放；還沒有參加直播的小伙伴們也趕快來學(xué)習(xí)啦，可以讓您在方法驗證上少走很多彎路。   

廈門海關(guān)技術(shù)中心研究員