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- 寒煙殘雪入紅塵 2017-09-11 00:00:00
- 硫酸銨可能會(huì)損壞某些蛋白。加入硫酸銨晶體時(shí)應(yīng)小心：局部濃度過高可能會(huì)造成不需要的蛋白沉淀。 對(duì)于常規(guī)可再生的純化過程，可以避免使用硫酸銨沉淀以利于層析。 通常沉淀對(duì)于濃度低于1mg/ml的蛋白幾乎無效。 沉淀所需溶液： 飽和硫酸銨溶液（在100ml蒸餾水中加入100g硫酸銨，攪拌溶解）。 1M Tris-HCl，pH 8.0 用于diyi步純化的緩沖液。 方法： 1，過濾（0.45μm膜）或離心樣品（4°C 10000g）。 2，每10倍體積的樣品中加入一倍的1M Tris-HCl，pH 8.0以維持pH值。 3，溫和攪拌。逐滴加入硫酸銨溶液，Z高至50%飽和度。攪拌1小時(shí)。 4，10000g離心20min。 5，去除上清，用等體積相同濃度的硫酸銨溶液（如不能溶解沉淀也不會(huì)造成進(jìn)一步沉淀的溶液）洗滌重懸沉淀兩次。再次離心。 6，使用少量體積后面步驟所需的溶液溶解沉淀。 7，硫酸銨在凈化/更換緩沖液步驟中使用脫鹽柱除去。
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2008-03-21 01:00:12
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2012-04-01 06:52:30
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