怎樣儲(chǔ)存純化蛋白質(zhì),4攝氏度和零下20度哪一種能長(zhǎng)時(shí)間保存蛋白質(zhì)活性?
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在一個(gè)老美的實(shí)驗(yàn)室打工,做的是病毒DNA在細(xì)菌內(nèi)擴(kuò)增后的蛋白質(zhì)提純。通常是用尿素提純完以后,應(yīng)該用什么溫度儲(chǔ)存更合適?求指點(diǎn)!
全部評(píng)論(5條)
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- zpzp78 2011-11-10 00:00:00
- Z好-80。為避免反復(fù)凍融,可根據(jù)用量分裝。
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- 實(shí)施實(shí)事 2011-11-11 00:00:00
- 我們一般是把蛋白質(zhì)凍干以后在-20°保存,活性可以保持一年左右,
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- fwjpdwfl283518 2011-11-10 00:00:00
- 一般來(lái)說(shuō)蛋白都放在-20℃冰箱里,有必要的話甚至要放到-80攝氏度,因?yàn)槟阍谔峒兊倪^(guò)程中沒(méi)法做到無(wú)菌,因此提純的蛋白液里肯定共有細(xì)菌的存在。而細(xì)菌在4°C中仍然是會(huì)活動(dòng)的,這樣它就會(huì)去水解蛋白質(zhì),辛辛苦苦提的蛋白也就質(zhì)量下降。不信你可以把蛋白放在4度里過(guò)一個(gè)星期,拿出來(lái)臭了,臭了就說(shuō)明降解了。 蛋白質(zhì)因?yàn)槠淙?jí),四級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜,一般不推薦反復(fù)凍融,這樣可能極大損害蛋白活性。而且在保存時(shí)Z好加入一點(diǎn)BSA,一般0.1%左右即可。 希望能夠幫到你~有問(wèn)題一起討論解決哦~
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- a340244226 2011-11-12 00:00:00
- 蛋白質(zhì)純化后保存不好的話,很容易失活,據(jù)一位有經(jīng)驗(yàn)的老師建議,4度和-80度保存,-20度保存等于白搭,效果不會(huì)比4度好到哪里去,Z好是保存在-80度,據(jù)說(shuō)是-80度保存一個(gè)月后活性下降一半吧,其他的會(huì)更快。自己沒(méi)試過(guò),這僅是我一位專業(yè)做蛋白老師給的建議。希望對(duì)你有幫助。
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- George926798 2011-11-10 00:00:00
- 尿素提純?你做refold?純化的蛋白應(yīng)該液氮或者干冰乙醇速凍,然后置于-80 freezer。4度肯定不適合長(zhǎng)期保存,而蛋白保存應(yīng)該速凍,減少蛋白在慢速溫度變化過(guò)程中的構(gòu)象改變。-20也不足以維持蛋白的構(gòu)象。
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