凱氏定氮儀廣泛應(yīng)用于食品加工、谷物、飼料、水、土壤、制藥、煙草、畜牧、土肥、環(huán)境檢測、醫(yī)藥、農(nóng)藥、科研、教學(xué)、質(zhì)量監(jiān)督等領(lǐng)域，進(jìn)行氮或者蛋白質(zhì)含量的測定，還可用于銨鹽、揮發(fā)性鹽基氮等的檢測，因此也被稱為蛋白質(zhì)測定儀。凱氏定氮儀具有高靈敏度，分析速度快，應(yīng)用范圍廣，所需試樣少，設(shè)備和操作比較簡單等特點。

檢測樣品氮含量，如果你選擇的是凱氏定氮儀，那么diyi步是消解樣品，第二步是蒸餾的過程，第三步是滴定計算氮含量結(jié)果。不管凱氏定氮儀經(jīng)歷發(fā)展到什么階段，只要是凱氏法，都必須經(jīng)過前面提到的三個步驟。影響回收率的原因必然跟這三步有密切的關(guān)系。分析原因如下：

1.消解過程中，消解溫度過低或者時間不足，樣品未完全消解，或者消化樣品時有掛壁現(xiàn)象產(chǎn)生。

2.鹽酸或者硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液放置時間過長，造成溶度不準(zhǔn)。（建議時間不要超過1個月，超過需要重新配置）

3.定氮儀蒸餾裝置冷凝管或防濺管有破損，產(chǎn)生的氨氣泄漏。

4.收集液太少，未能沒過接收管出口。

5.鹽酸或者硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度太高。（手動滴定時容易出現(xiàn)回收率偏低）

6.收集氨氣的收集液溫度超過一定溫度時，氨氣容易被逃逸。

消化爐必須要有效地溫度控制，有消化爐程序升溫控制，就能有效滿足樣品的需要，而沛歐紅外石英消化爐是PID控溫，64階段的程序升溫，可根據(jù)樣品性質(zhì)設(shè)定分階段的調(diào)節(jié)溫度高低尤其是可調(diào)升溫速率，杜絕樣品在消化過程中的掛壁現(xiàn)象。消化爐孔間溫度如果不均勻，會使得樣品消化有些徹底有些會沒有消化好，而且沛歐紅外石英消化爐能解決一系列問題，消化爐是通過紅外加熱、石英輻射的方式來加熱的，加熱非常的均勻?？販乜煽兀瑯悠愤€原性好。

沛歐SKD-20S2紅外石英消化爐

冷凝管在定氮儀中是一個很重要的部件，他的冷凝效果決定了定氮儀的品質(zhì)， 沛歐的冷凝管是自有的磚利技術(shù)，可以達(dá)到延長冷凝時間，提高冷卻液的冷卻效果。

（冷凝管磚利技術(shù)）

沛歐半自動定氮儀，具有對蒸餾杯的溫度實時檢測，集液瓶內(nèi)溫度過高儀器停止蒸餾，溫度下降后自動繼續(xù)蒸餾剩余時間，確保氨氣不被逃逸。

在做樣品檢測試驗時，請嚴(yán)格按照凱氏定氮儀操作規(guī)程，包括消解時的溫度設(shè)置，催化劑的配比規(guī)則，消解時間等等，其次不管是手動滴定的半自動定氮儀，還是自動滴定打印計算數(shù)據(jù)的全自動凱氏定氮儀，蒸餾時堿液必須過量，完全反應(yīng)完成，實時觀察蒸餾時氨氣被收集的溫度，顏色的變化，Z后是滴定時，標(biāo)準(zhǔn)酸濃度的配比，滴定泵前期的校準(zhǔn)，如果是手動滴定時注意搖晃收集瓶手法等等，任何一個細(xì)節(jié)都會導(dǎo)致凱氏定氮儀回收率偏低。

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上海沛歐專業(yè)生產(chǎn)凱氏定氮儀、紅外消化爐、二氧化硫檢測儀、土壤陽離子交換量檢測儀、卡爾費(fèi)休水分儀等，歡迎來電：021-64086301

（來源：上海沛歐分析儀器有限公司）

關(guān)于熱膨脹測定的熱膨脹系數(shù)的影響因素：  

    GB/T16535-2008精細(xì)陶瓷線熱膨脹系數(shù)試驗方法頂桿法  

（來源：林賽斯（上海）科學(xué)儀器有限公司）

在決定實時熒光定量PCR檢測靈敏度、準(zhǔn)確性和可靠性的眾多因素中，模板質(zhì)量是決定重復(fù)性和生物學(xué)相關(guān)性的重要因素之一。諸多報告中也描述了生物樣品中常見的YZ成分會導(dǎo)致qPCR分析靈敏度和動力學(xué)的顯著降低。

如何檢測YZ劑：

多種方法可用于評估生物樣品中是否存在YZ劑。常用方法是通過連續(xù)稀釋樣品來評估樣品的PCR效率，PCR效率的高低一定程度上反映出樣品質(zhì)量的好壞。一個GX的PCR反應(yīng)要求擴(kuò)增效率在90%-110%之間，當(dāng)擴(kuò)增效率＞110%或＜90%，無論是相對定量還是JD定量其ZZ結(jié)果都會不準(zhǔn)確。那么怎么來判斷是由于YZ劑引起的擴(kuò)增效率異常呢？如圖1所示，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線的狀態(tài)判斷，當(dāng)原液的數(shù)據(jù)點位于標(biāo)曲上方（紅色箭頭），則極有可能是樣本YZ劑YZPCR反應(yīng)導(dǎo)致Cq值偏大。

內(nèi)部擴(kuò)增控制（IACs）是一種與目標(biāo)核酸共純化和共擴(kuò)增的方法，可用來檢測YZ劑和指示加工過程中的模板丟失。IACs可包裝在噬菌體外殼中，也可以是包含引物結(jié)合序列和探針檢測序列的單鏈寡核苷酸。在熒光信號采集過程中，探針結(jié)合位點的部分不匹配阻止了與IACs雜交，隨后可對熔解曲線進(jìn)行分析，用以區(qū)分IACs和目標(biāo)擴(kuò)增子。IACs將是檢測病原體的優(yōu)質(zhì)方案，但這種方法不適用于細(xì)胞mRNA定量，因為考慮為每個單一mRNA設(shè)計模擬物是不現(xiàn)實的。

另外，也可以通過使用外源性對照來測試YZ劑，也稱為Spikes。該方法無論是在其構(gòu)造技術(shù)的復(fù)雜性方面，還是在分析之后與它們的準(zhǔn)確檢測相關(guān)的額外工作方面，相對都是比較簡單的。Spikes可以是RNA也可以是DNA分子，這取決于靶標(biāo)類型。mRNA表達(dá)分析選RNA Spikes，DNA靶標(biāo)分析選DNA Spikes。Spikes通常是幾千個堿基/堿基對異型序列，所以不會與任何已知目標(biāo)交叉反應(yīng)。

YZ劑類型：

YZ劑可以是核酸提取過程中使用的試劑，也可以是從生物樣品中提取的成分。YZ劑的影響，較好的情況是YZ劑會產(chǎn)生不準(zhǔn)確的定量結(jié)果；最壞的情況是高度YZ會產(chǎn)生假陰性結(jié)果。常見的YZ劑類型如下：

1）樣品本身的成分：許多生物樣品本身就含有嚴(yán)重YZ逆轉(zhuǎn)錄和PCR反應(yīng)的成分，如血液中的血紅蛋白、免疫球蛋白G，肌肉中的肌紅蛋白、膽鹽、腐殖酸、尿素和膠原蛋白，植物中的多糖多酚等。

2）提取和純化試劑的成分：許多用于純化核酸的試劑，如苯酚、氯仿、硫氰酸胍、鹽酸胍、乙二胺四乙酸、二甲基亞砜、十二烷基硫酸鈉、噻唑、三唑和核糖核酸等。

如何降低YZ劑的影響：

當(dāng)樣本中存在YZ劑，高濃度模板中YZ劑濃度較高，對PCR反應(yīng)的影響較大。低濃度模板由于稀釋使得YZ劑濃度有所下降，YZ劑的YZ作用也相應(yīng)降低。如果是樣品本身的成分，可對模板進(jìn)行稀釋，或者進(jìn)一步純化，又或者改進(jìn)提取方法來降低YZ劑的干擾。如果提取和純化試劑的成分，其本身就是最有效的逆轉(zhuǎn)錄和聚合酶鏈反應(yīng)的YZ劑，因此需要在提取和純化過程中注意對試劑成分的去除，F(xiàn)Z污染模板。

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