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體外DNA復(fù)制需要什么條件

day這樣吧 2010-05-19 03:11:34 415  瀏覽
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全部評論(4條)

  • fwjpdwfl283518 2010-05-20 00:00:00
    二樓正解

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  • 白巧克力0603 2010-05-20 00:00:00
    模板DNA,酶,合適的溫度,酸堿度,游離的氨基酸

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  • 穩(wěn)穩(wěn)雯雯98 2010-05-20 00:00:00
    問的是pcr么?模版。引物。耐高溫的解旋酶、dna聚合酶。各種游離脫氧核甘酸。緩沖液。

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  • 真真切切ii 2016-02-19 08:03:45
    你是指PCR技術(shù)吧 反應(yīng)需要的物質(zhì):需要模板(要擴增的DNA)、引物(RNA,前后引物)、底物(dNTP,即dATP,dTTP,dGTP,dCTP)、DNA聚合酶(耐熱,常用的是Taq酶)、合適的緩沖液。 反應(yīng)體系為:變性溫度在90度以上,退火溫度在52度左右,延伸溫度在72度左右。

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我們使用STED超高分辨率顯微鏡進行測量,INO80和R環(huán)之間具有前所未有的精密共定位。


標題圖像:INO80(藍色)和R環(huán)(黃色)的3D體表面模型


在我們的實驗中,相比共聚焦成像(250?nm),STED能達到大約50?nm的分辨率,這使我們能夠有較高的確定性區(qū)分真假共定位事件。使用STED可以輕松觀察到INO80亞基和R環(huán)亞基之間的共定位,而通過共聚焦成像觀察到的INO80和R環(huán)之間的多個共定位事件,經(jīng)STED觀察是分離的不同亞基。


在所有分析的細胞中,我們發(fā)現(xiàn)相比非共定位R環(huán),INO80共定位的R環(huán)明顯更加緊密、體積和長度也更大。這些數(shù)據(jù)表明,INO80復(fù)合物與細胞核中最 大、最濃縮的R環(huán)域相關(guān)。



圖1:STED解析INO80和R環(huán)的相對位置。


閱讀完整文章:

Prendergast L., McClurg U.L., Hristova R., Berlinguer-Palmini R., Greener S., Veitch K., Hernandez I., Pasero P., Rico D., Higgins J.M.G., Gospodinov A. & Papamichos-Chronakis M.:

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Nature Communications volume 11, Article number: 4534 (2020)

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