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- fwjpdwfl283518 2010-05-20 00:00:00
- 二樓正解
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- 白巧克力0603 2010-05-20 00:00:00
- 模板DNA,酶,合適的溫度,酸堿度,游離的氨基酸
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- 穩(wěn)穩(wěn)雯雯98 2010-05-20 00:00:00
- 問的是pcr么?模版。引物。耐高溫的解旋酶、dna聚合酶。各種游離脫氧核甘酸。緩沖液。
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- 真真切切ii 2016-02-19 08:03:45
- 你是指PCR技術(shù)吧 反應(yīng)需要的物質(zhì):需要模板(要擴增的DNA)、引物(RNA,前后引物)、底物(dNTP,即dATP,dTTP,dGTP,dCTP)、DNA聚合酶(耐熱,常用的是Taq酶)、合適的緩沖液。 反應(yīng)體系為:變性溫度在90度以上,退火溫度在52度左右,延伸溫度在72度左右。
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DNA復(fù)制機制和共轉(zhuǎn)錄R環(huán)之間發(fā)生沖突時,會導(dǎo)致癌細胞基因組不穩(wěn)定性,進而影響DNA合成。本文中,我們展示了ATP依賴性染色質(zhì)重構(gòu)INO80復(fù)合體可以促進R環(huán)解析,防止癌細胞中的復(fù)制相關(guān)的DNA損傷。
我們使用STED超高分辨率顯微鏡進行測量,INO80和R環(huán)之間具有前所未有的精密共定位。
標題圖像:INO80(藍色)和R環(huán)(黃色)的3D體表面模型
在我們的實驗中,相比共聚焦成像(250?nm),STED能達到大約50?nm的分辨率,這使我們能夠有較高的確定性區(qū)分真假共定位事件。使用STED可以輕松觀察到INO80亞基和R環(huán)亞基之間的共定位,而通過共聚焦成像觀察到的INO80和R環(huán)之間的多個共定位事件,經(jīng)STED觀察是分離的不同亞基。
在所有分析的細胞中,我們發(fā)現(xiàn)相比非共定位R環(huán),INO80共定位的R環(huán)明顯更加緊密、體積和長度也更大。這些數(shù)據(jù)表明,INO80復(fù)合物與細胞核中最 大、最濃縮的R環(huán)域相關(guān)。
圖1:STED解析INO80和R環(huán)的相對位置。
閱讀完整文章:
Prendergast L., McClurg U.L., Hristova R., Berlinguer-Palmini R., Greener S., Veitch K., Hernandez I., Pasero P., Rico D., Higgins J.M.G., Gospodinov A. & Papamichos-Chronakis M.:
Resolution of R-loops by INO80 promotes DNA replication and maintains cancer cell proliferation and viability
Nature Communications volume 11, Article number: 4534 (2020)
https://doi.org/10.1038/s41467-020-18306-x
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