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請教高手:如何制作薩氏培養(yǎng)基(請詳細寫明過程)?謝謝

人參娃娃66 2005-11-06 13:44:01 427  瀏覽
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全部評論(1條)

  • rknh010 2005-11-07 00:00:00
    依據(jù)微生物生長繁殖的需要配制的營養(yǎng)物質,用于分離、培養(yǎng)、保藏及產品制作。其成分因微生物的種類而異,一般均含有碳素營養(yǎng)(碳源)、氮素營養(yǎng)(氮源)、礦質營養(yǎng)和水,并根據(jù)不同微生物的需要,將其酸堿度(pH)調至一定范圍。按所用原料不同,可分為:天然培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基。按照培養(yǎng)基的物理性質又可分為:液體培養(yǎng)基(營養(yǎng)的物質溶于水中制成);固體培養(yǎng)基(天然固體原料加適量的水,或是液體培養(yǎng)基中加入1.5%~2%的瓊脂作為凝固劑)等。 薩氏(Sabouraud)培養(yǎng)基:蛋白胨10g,葡萄糖10g,瓊脂15g,水1000ml。 滅菌法: (1)干熱滅菌:一般玻璃用具,如培養(yǎng)皿、吸管等用報紙包好后,放烘箱中,使溫度逐漸升至150~160℃,保持2小時后,關閉電源,使緩慢冷卻(降溫太快時玻璃易碎),即滅菌完畢。 (2)濕熱滅菌:利用蒸氣殺菌。 ①常壓法(間歇滅菌法):是用蒸汽鍋(或普通鍋)蒸,溫度不超過100℃。在沒有高壓滅菌設備或在高溫滅菌設備或在高溫滅菌易破壞的培養(yǎng)基情況時用此法。每次一小時,共三次,因為diyi次蒸后,其中營養(yǎng)細胞被殺死,而孢子還保持著活力,所以蒸后,將培養(yǎng)基放入溫箱中24小時,待其孢子萌發(fā),再蒸第二次。同樣再經24小時,蒸第三次,這樣才算滅菌完善。 ②高壓法:鍋內增加壓力時則溫度隨之。 壓力0.56kg/cm2=8磅/英寸2時,溫度為112.6℃;滅菌30分鐘。 壓力1kg/cm2=15磅/英寸2時,溫度為120~121℃;120℃,滅菌20分鐘。 (3)火焰滅菌:對于接種針或其它金屬用具滅菌,可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱。此外在接種過程中,試管或三角瓶口,也采取通過火焰達到滅菌的目的。見圖3-5。 (4)藥物滅菌: ①70%的酒精:冷卻燒紅后的接種針,操作前手或器皿的表面殺菌,載玻片,蓋玻片的浸泡等。 ②0.1%液:用于材料表面殺菌,以及對用具或實驗后廢棄的培養(yǎng)物的處理。 ③(40%甲醛液):用于空間熏蒸滅菌,加熱或加高錳酸鉀使其放出甲醛氣體。注意將空間密閉并維持24小時。 (5)紫外線滅菌:用于接種室等空氣滅菌。

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