抗生素的過度使用會導(dǎo)致人類細(xì)菌感染對抗生素的耐藥性增加，已成為目前全 球十大公共衛(wèi)生威脅之一。根據(jù)世界衛(wèi)生組織（世衛(wèi)組織）最 新報(bào)告顯示，根據(jù)87個(gè)國家在2020年報(bào)告的數(shù)據(jù)，常見細(xì)菌感染對治 療的耐受性越來越強(qiáng)，導(dǎo)致致命血流感染的細(xì)菌耐藥性很高，并且造成社區(qū)常見感染的幾種細(xì)菌對治 療的耐受性也在增加。由于臨床上很難及時(shí)有效地區(qū)分細(xì)菌和病毒感染，可能是導(dǎo)致抗生素過度使用的原因之一。

目前臨床上檢測感染類型的方法有很多，以下是一些常見的方法：

癥狀和體征：

雖然某些癥狀和體征可能與細(xì)菌和病毒感染都有關(guān)，但一些癥狀和體征可能更常見于特定類型的感染。例如，喉嚨痛和咳嗽可能是細(xì)菌感染的跡象，而流鼻涕和打噴嚏可能是病毒感染的跡象。

細(xì)菌和病毒檢測：

醫(yī)生可以通過分析患者的血液、尿液或其他生物體液樣本來檢測細(xì)菌或病毒的存在。細(xì)菌感染可以通過培養(yǎng)細(xì)菌并觀察其在培養(yǎng)基上的生長來檢測，而病毒感染通常需要使用特殊的檢測方法，例如PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）。

白細(xì)胞計(jì)數(shù)：

細(xì)菌感染通常導(dǎo)致白細(xì)胞計(jì)數(shù)升高，而病毒感染則不一定如此。

C反應(yīng)蛋白（CRP）和其他生化指標(biāo)：

在細(xì)菌感染中，CRP和某些細(xì)胞因子等其他生化指標(biāo)通常會升高，而在病毒感染中，它們通常會保持正常水平或輕微升高。

這些方法可以幫助臨床醫(yī)生在一定程度上區(qū)分細(xì)菌感染和病毒感染，但在靈敏度、特異性、操作便捷性和報(bào)告及時(shí)性仍存在一定的挑戰(zhàn)，因此研究者們也一直在尋找更及時(shí)有效的檢測方法，這一次，研究者們把目光聚焦在對機(jī)體對感染的免疫應(yīng)答上！免疫系統(tǒng)作為機(jī)體對抗外來病原體的重要防線，會對感染做出及時(shí)響應(yīng)，通過觀察免疫細(xì)胞在感染中的免疫應(yīng)答是否也可以及時(shí)有效地區(qū)分細(xì)菌和病毒感染？

先天免疫系統(tǒng)是免疫應(yīng)答的第 一道防線，髓系細(xì)胞，如粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、NK細(xì)胞、DC，有助于先天免疫系統(tǒng)識別入侵的病原體和組織損傷。這些細(xì)胞在與微生物和損傷模式（PAMP、DAMP）接觸時(shí)被激活，引發(fā)強(qiáng)烈的炎癥反應(yīng)，并釋放各種促炎介質(zhì)，如細(xì)胞因子、干擾素（IFN）和特異性細(xì)胞標(biāo)志物。這是由先天免疫系統(tǒng)提供的對感染的即時(shí)反應(yīng)。研究表明當(dāng)機(jī)體受到細(xì)菌或病毒攻擊時(shí)，先天免疫系統(tǒng)的髓樣細(xì)胞會做出不同的反應(yīng)1。在機(jī)體受到炎癥刺激、自身免疫疾病、細(xì)菌或病毒感染后激活干擾素（I型和II型）信號傳導(dǎo)，I型和II型干擾素（IFN）是調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的核心參與者，I型IFN介導(dǎo)病毒性免疫應(yīng)答，II型IFN介導(dǎo)細(xì)菌性免疫應(yīng)答。因此，髓系細(xì)胞活化指標(biāo)是感染早期檢測的理想標(biāo)志。

圖1病毒和細(xì)菌感染的特異性干擾素應(yīng)答；I型IFN（IFNα、IFNβ）：病毒感染；II型IFN（IFNγ）：細(xì)菌感染

CD169、CD64和HLA-DR是中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等髓樣細(xì)胞表達(dá)的活化標(biāo)志物，它們在感染檢測和免疫功能評估中具有重要作用。

CD169，也稱為Siglec-1，是一種膜上糖蛋白，屬于蛋白質(zhì)家族Siglec。CD169主要表達(dá)在樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的表面，并與細(xì)胞外病毒顆粒的糖基結(jié)構(gòu)特異性結(jié)合，促進(jìn)病毒的吞噬和清除。因此，CD169在感染檢測中具有重要作用。研究表明，病毒感染后，CD169的表達(dá)水平會上調(diào)，這表明CD169可能是一種早期的病毒感染指標(biāo)。在肝炎病毒和愛滋病毒感染中，CD169的表達(dá)與病毒的傳播和清除有關(guān)。因此，檢測CD169在病毒感染中的表達(dá)水平可以幫助了解病毒感染的程度和病情。

圖2 CD169+髓細(xì)胞對先天免疫和適應(yīng)性免疫不同細(xì)胞亞群的潛在影響2。CD169+的表達(dá)是由病毒感染后的I型IFN信號誘導(dǎo)，啟動下游IFN途徑，促進(jìn)病毒滴度控制和適應(yīng)性免疫細(xì)胞啟動和募集。

有研究顯示，外周血單核細(xì)胞CD169的檢測可以作為COVID-19高敏及快速篩查的方法3。

圖3 根據(jù)疾病分期和SARS-CoV-2 RT-PCR結(jié)果，與健康獻(xiàn)血者相比，新冠肺炎患者單核細(xì)胞CD169的表達(dá)3。方框圖A-C總結(jié)了健康獻(xiàn)血者（HBD，n=25，綠點(diǎn)）與新冠肺炎患者早期（A，黑點(diǎn)）、晚期（B，藍(lán)點(diǎn)）或無癥狀（C，紅點(diǎn)）的CD169指數(shù)水平（單核細(xì)胞與淋巴細(xì)胞信號的比率）與RT-PCR結(jié)果的比較；藍(lán)線表示陽性閾值（3.5）。圖D計(jì)算每組的ROC曲線，然后計(jì)算3.5閾值下的靈敏度、特異性、PPV(positive predictive value)和NPV（negative predictive value）。

CD64是一種Fcγ受體，也稱為FcγRI。CD64主要表達(dá)在單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞的表面，可以結(jié)合抗體的Fc部分，并在體內(nèi)介導(dǎo)胞吞作用和抗體介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。CD64的表達(dá)水平可以反映細(xì)菌或真菌感染的嚴(yán)重程度，CD64感染指數(shù)是一種用于評估感染嚴(yán)重程度的生物標(biāo)志物。在臨床上，CD64感染指數(shù)已被廣泛應(yīng)用于評估感染的早期診斷、疾病監(jiān)測和預(yù)后評估4。通過流式細(xì)胞術(shù)檢測CD169與CD64的表達(dá)可以幫助急診科對感染類型的鑒別進(jìn)行臨床研究評估5。

圖4 三組不同患者nCD64和mCD169的表達(dá)差異5。圖A 第 一組（無感染）、第二組（細(xì)菌感染）和第三組（病毒感染）中性粒細(xì)胞上CD64的表達(dá)。圖B 對于相同的三組，CD169在單核細(xì)胞上的表達(dá)。數(shù)據(jù)以平均誤差和標(biāo)準(zhǔn)誤差表示。使用t檢驗(yàn)計(jì)算各組之間的p值，如果p≤0.05，則顯示顯著差異。MFI表示平均熒光強(qiáng)度。

HLA-DR是人類白細(xì)胞抗原中的一種MHC II分子，主要在抗原呈遞細(xì)胞（如樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、）表面表達(dá)，參與調(diào)節(jié)T細(xì)胞免疫應(yīng)答。在感染疾病中，HLA-DR的表達(dá)水平可以發(fā)生變化6-7，主要表現(xiàn)為以下兩種情況：

增加：

HLA-DR的表達(dá)增加通常發(fā)生在早期感染階段，是機(jī)體對感染的一種免疫反應(yīng)。感染時(shí)，免疫細(xì)胞受到刺激后會釋放促炎性因子，這些因子會刺激抗原呈遞細(xì)胞表達(dá)HLA-DR，從而引發(fā)T細(xì)胞免疫應(yīng)答。HLA-DR的增加也可以作為評估感染早期診斷和嚴(yán)重程度的生物標(biāo)志物。

降低：

HLA-DR的表達(dá)降低則常常發(fā)生在感染的晚期階段，是機(jī)體免疫功能的抑 制反應(yīng)。在感染后的幾天或幾周，免疫細(xì)胞受到長期的刺激和激活，容易導(dǎo)致抗原呈遞細(xì)胞功能異常和免疫耗竭。這時(shí)，HLA-DR的表達(dá)通常會下降，表明機(jī)體的免疫反應(yīng)受到了抑 制。HLA-DR的降低也可以作為評估感染后免疫抑 制狀態(tài)的生物標(biāo)志物。

為了幫助研究者更及時(shí)有效地對感染早期的免疫應(yīng)答進(jìn)行評估，從而幫助鑒別細(xì)菌和病毒感染，貝克曼庫爾特也推出了一款3色的髓系活化檢測試抗體組合(貨號C63854)*用于外周血的髓系活化標(biāo)志物進(jìn)行檢測。

該試劑方案無需進(jìn)行補(bǔ)償操作，支持免洗檢測，檢測過程便捷高效一步到位。

除了可用幫助區(qū)分細(xì)菌感染和病毒感染之外，還于以下領(lǐng)域的研究：

抗生素耐藥性：

感染源和感染性質(zhì)識別錯(cuò)誤問題嚴(yán)重，易導(dǎo)致抗生素濫用和機(jī)體耐藥性8。利用nCD64快速識別細(xì)菌感染，將有助于生物標(biāo)志物的研究和新抗生素的開發(fā)9。

病毒性疾病進(jìn)展：

髓系細(xì)胞活化標(biāo)志物（CD169）已廣泛應(yīng)用于病毒性疾病的進(jìn)展監(jiān)測和病毒清除，如HIV和肺部病毒感染，包括COVID-19 10-13。

干擾素信號傳導(dǎo)：

干擾素是一類細(xì)胞因子介質(zhì)，在感染時(shí)向細(xì)胞免疫系統(tǒng)報(bào)警。I型和II型干擾素對髓樣細(xì)胞的作用取決于炎癥刺激程度13-14。

自身免疫性炎癥性疾?。?/b>

研究表明，在RA、SLE、干燥綜合征等系統(tǒng)性自身免疫性疾病出現(xiàn)的慢性炎癥中，干擾素介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)等重要作用15。

如果您對這個(gè)方案感興趣請點(diǎn)擊左下角“閱讀原文”與我們聯(lián)系，或者聯(lián)系貝克曼庫爾特的業(yè)務(wù)代表了解更多信息！

 ● 參考文獻(xiàn)： 

1.Bourgoin P, Biéchelé G, Ait Belkacem I, Morange PE, Malergue F. Role of the interferons in CD64 and CD169 expressions in whole blood: Relevance in the balance between viral- or bacterial-oriented immune responses. Immun Inflamm Dis. 2020;8(1):106-123.

2.Herzog S, Fragkou PC, Arneth BM, Mkhlof S, Skevaki C. Myeloid CD169/Siglec1: An immunoregulatory biomarker in viral disease. Frontiers in Medicine. 2022;9.

3.Michel M, Malergue F, Belkacem IA, Bourgoin P, Morange PE, Arnoux I, Miloud T, Million M, Tissot-Dupont H, Mege JL, Busnel JM. An ultra-sensitive, ultra-fast whole blood monocyte CD169 assay for COVID-19 screening. medRxiv. 2020 Oct 26:2020-10.

4.Ajmani S, Agarwal V, Gurjar M. State of Globe: Neutrophil CD64: Is It a Reliable Biomarker for Sepsis? J Glob Infect Dis. 2018 Apr-Jun;10(2):33-34.

5.Bourgoin P, Soliveres T, Ahriz D, Arnoux I, Meisel C, Unterwalder N, Morange PE, Michelet P, Malergue F, Markarian T. Clinical research assessment by flow cytometry of biomarkers for infectious stratification in an Emergency Department. Biomarkers in Medicine. 2019 Nov;13(16):1373-86.

6.Juskewitch, J.E., Abraham, R.S., League, S.C., Jenkins, S.M., Smith, C.Y., Enders, F.T., Grebe, S.K., Carey, W.A. and Huskins, W.C.,  Monocyte HLA-DR expression and neutrophil CD64 expression as biomarkers of infection in critically ill neonates and infants. Pediatric research,2015; 78(6), pp.683-690.

7.Gatti, A., Fassini, P., Mazzone, A., Rusconi, S., Brando, B. and Mistraletti, G., Kinetics of CD169, HLA-DR, and CD64 expression as predictive biomarkers of SARS-CoV2 outcome. Journal of Anesthesia, Analgesia and Critical Care, 2023;3(1), pp.1-10.

8.Shallcross LJ, Davies DS. Antibiotic overuse: a key driver of antimicrobial resistance. Br J Gen Pract. 2014 Dec;64(629):604-5.

9.Ajmani S, Agarwal V, Gurjar M. State of Globe: Neutrophil CD64: Is It a Reliable Biomarker for Sepsis? J Glob Infect Dis. 2018 Apr-Jun;10(2):33-34.

10.Akiyama H, Ramirez NP, Gibson G, et al. Interferon-Inducible CD169/Siglec1 Attenuates Anti-HIV-1 Effects of Alpha Interferon. J Virol. 2017;91(21):e00972-17.

11.Stegelmeier AA, van Vloten JP, Mould RC, Klafuric EM, Minott JA, Wootton SK, Bridle BW, Karimi K. Myeloid Cells during Viral Infections and Inflammation. Viruses. 2019 Feb 19;11(2):168.

12.Bedin AS et al. Monocyte CD169 expression as a biomarker in the early diagnosis of COVID-19, medRxiv 2020.06.28.20141556.

13.Park MD. Macrophages: a Trojan horse in COVID-19? Nat Rev Immunol. 2020 Jun;20(6):351.

14.Hadjadj J, Yatim N, Barnabei L, et al. Impaired type I interferon activity and inflammatory responses in severe COVID-19 patients. Science. 2020;369(6504):718-724.

15.Rose T, Szelinski F, Lisney A, et al. SIGLEC1 is a biomarker of disease activity and indicates extraglandular manifestation in primary Sj?gren's syndrome. RMD Open. 2016;2(2):e000292.