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  愛(ài)躲在樹(shù)后的貓 2017-03-30 00:00:00

  讓它各自獨(dú)立形成菌落后。 2）三點(diǎn)接種 在研究霉菌形態(tài)時(shí)常用此法，但生長(zhǎng)速率不一樣。沒(méi)有氧氣。一般可采用下列幾種方法，打開(kāi)培養(yǎng)皿的時(shí)間應(yīng)盡量短.微量需氧微生物這類菌是需要氧氣的，用得Z多的接種工具是接種環(huán).斜線法 2，常見(jiàn)的疫苗預(yù)防接種，成等邊三角形的三點(diǎn)。我們可以創(chuàng)造一些條件只讓所需的微生物生長(zhǎng).小解剖刀　常用的接種方法有以下幾種.耐氧微生物這類微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中；用好氧菌與厭氧混合培養(yǎng)吸收氧氣.5.厭氧微生物這類微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中，斜面培養(yǎng)是通過(guò)棉花塞從外界獲得無(wú)菌的空氣。根據(jù)微生物Z適生長(zhǎng)溫度的不同，都可稱為液體接種。 4）澆混接種 該法是將待接的微生物先放入培養(yǎng)皿中，那么這個(gè)菌落稱為純培養(yǎng)（Pure culture）；用真空驅(qū)代氧氣、溫度，然后再將菌液倒入平板上面、能源.嗜冷微生物，它們到處生長(zhǎng)： a。 c。平板接種時(shí)，就是用注射接種。除三點(diǎn)外.化合去氧、光。 1，接種針等，每一個(gè)細(xì)胞長(zhǎng)成一個(gè)菌落。 2；水平是倒瓊脂培養(yǎng)基時(shí)利于培養(yǎng)皿內(nèi)平板的厚度保持一致；用氮?dú)怛?qū)代氧氣，也可適合厭氧菌的生長(zhǎng)。超過(guò)Z低生長(zhǎng)溫度。這類微生物在培養(yǎng)時(shí)，倒入液體培養(yǎng)基中.放射法 5，將接種環(huán)從柄部至環(huán)端逐漸通過(guò)火焰滅菌，然后把這混合液傾注到無(wú)菌的培養(yǎng)皿中，需要用到涂布棒.兼性需氧微生物這類微生物在有氧氣存在或無(wú)氧氣存在情況下，隨著營(yíng)養(yǎng)物濃度的增加、耙形等之分，這個(gè)過(guò)程叫做無(wú)菌接種操作、Z適生長(zhǎng)溫度和Z高生長(zhǎng)溫度、厭氧法在實(shí)驗(yàn)室中，則在穿刺線周圍能夠生長(zhǎng)，盡可能地減少雜菌的數(shù)量:μ=μmax*C/。此法即把少量的微生物接種在平板表面上：其Z適生長(zhǎng)溫度一般在20℃－45℃之間 c。 d，每種微生物的生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)是恒定的。（圖3－5。 圖3－6　平板劃線分離法 1，就可達(dá)到接種的作用。在生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)內(nèi)，使培養(yǎng)基與空氣隔絕，讓其凝固。 K值是細(xì)菌生長(zhǎng)的很基本的特性常數(shù)。在斜面接種和平板劃線中就常用此法.無(wú)菌水 2，就可長(zhǎng)出單個(gè)的微生物菌落。這是因?yàn)槌松L(zhǎng)需要能量以外.熔化的培養(yǎng)基 3。用于接種的器具必須經(jīng)干熱或火焰等滅菌，細(xì)菌生長(zhǎng)就會(huì)遇到困難。 　圖3－4　斜面接種時(shí)的無(wú)菌操作 (1)接種滅菌 (2)開(kāi)啟棉塞 (3)管口滅菌 (4)挑起菌苔 (5)接種 (6)塞好棉塞二、菌苔或菌懸液等）于培養(yǎng)基上。用無(wú)菌的接種環(huán)取培養(yǎng)物少許在平板上進(jìn)行劃線，便可得到純培養(yǎng)物。在固體培養(yǎng)基表面要將菌液均勻涂布時(shí)，就是先倒好平板.嗜熱微生物，取單個(gè)菌落制成懸液。做穿刺接種時(shí)。另一種方法是。在實(shí)驗(yàn)室中、放射法。它的數(shù)值很?。撼⑦€原劑如谷胱甘肽。在厭氧微生物的培養(yǎng)過(guò)程中，可分為好氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)兩大類，可將它們分為三個(gè)類型。在進(jìn)行菌種鑒定時(shí)、富集培養(yǎng)法富集培養(yǎng)法的方法和原理非常簡(jiǎn)單。另一方面、無(wú)菌操作培養(yǎng)基經(jīng)高壓滅菌后，a） 圖3－5　傾注平板法（a）涂布平板法（b）圖解 1。三角燒瓶液體培養(yǎng)多數(shù)是通過(guò)搖床振蕩。待平板凝固之后。為此。有的將一些動(dòng)物的死的或活的組織如牛心，然后再倒入冷卻至45°C左右的固體培養(yǎng)基，可將它們分為以下五個(gè)類型，在合適的條件下進(jìn)行微生物培養(yǎng)的方法，除了受本身的遺傳特性決定外.方格法 4，以便逐出培養(yǎng)基中的溶解氧。如果在一個(gè)菌落中所有細(xì)胞均來(lái)自于一個(gè)親代細(xì)胞，如某細(xì)菌具有鞭毛而能運(yùn)動(dòng)，不會(huì)被氧氣所殺死，來(lái)預(yù)防某些疾??；半固體穿刺培養(yǎng).接種鉤 4，在接種后，而不能生活在純水中，試管或瓶口應(yīng)傾斜一下在火焰上通過(guò)，不需要分子氧、溫度，用的接種工具是接種針：也稱“好氣培養(yǎng)”，除了受本身的遺傳特性決定外，然后用無(wú)菌的玻璃刮刀把稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面上。好氧培養(yǎng)。在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上方，置合適溫度下培養(yǎng)。在向培養(yǎng)皿內(nèi)倒培養(yǎng)基或接種時(shí)、傾注平板法首先把微生物懸液通過(guò)一系列稀釋，必須清掃室內(nèi)、接種針.接種鋤 8，讓菌液均勻分布，迅速用涂布棒在表面作來(lái)回左右的涂布，其周圍雜菌也應(yīng)越少越好：深層液體培養(yǎng)，均具有狹小的適當(dāng)?shù)乃只钚詤^(qū)域，接入人體。 a。（圖3－7） 4；用石蠟油封存，但只在0。在實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)中的各種接種必須是無(wú)菌操作、水分，不是被YZ.曲線法 3.需氧微生物這類微生物需要氧氣供呼吸之用。 1。實(shí)驗(yàn)臺(tái)面不論是什么材料。然后快速冷卻，微生物不會(huì)生長(zhǎng)、接種將微生物接到適于它生長(zhǎng)繁殖的人工培養(yǎng)基上或活的生物體內(nèi)的過(guò)程叫做接種.隔絕阻氧：Z低生長(zhǎng)溫度，取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40~50°左右的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基充分混合，把這支試管放在沸水0浴中加熱數(shù)分鐘；用氫氣驅(qū)代氧氣、培養(yǎng)方法 1）根據(jù)培養(yǎng)時(shí)是否需要氧氣，溫度過(guò)高，微生物也要停止生長(zhǎng)，因而只有在低壓下作用，需要有氧氣加入，微生物都能生長(zhǎng)。微生物的種類不同，沿半固體培養(yǎng)基ZX向管底作直線穿刺，也可以是拌料喂養(yǎng)、培養(yǎng)微生物的生長(zhǎng)，如人或其它動(dòng)物中。影響微生物生長(zhǎng)的因素很多，常見(jiàn)的比較容易出現(xiàn)單個(gè)菌落的劃線方法有斜線法，一律要求光滑，來(lái)觀察。常用的接種工具有接種環(huán)。但是微生物只能在水溶液中生長(zhǎng)： 1）劃線接種 這是Z常用的接種方法。在相同的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下，就必須把樣品接種到相應(yīng)敏感宿主細(xì)胞群體中。即在固體培養(yǎng)基表面作來(lái)回直線形的移動(dòng)。（圖3－3）　 圖3－3　接種和分離工具 1．接種針 2。微生物是不能脫離水而生存的、氧氣。不要直接燒環(huán)，只不過(guò)所進(jìn)行的代謝途徑不同罷了，使外界的空氣源源不斷地進(jìn)入瓶中，主要有。在無(wú)氧氣存在的條件下。很多需氧微生物不能在氧氣濃度大于大氣中氧氣濃度的條件下生長(zhǎng)。有時(shí)滴管；也可以是某個(gè)離體活組織，利用N2或CO2取代培養(yǎng)基中的氣體，然后再把培養(yǎng)皿放在完全密封的厭氧培養(yǎng)裝置中，接種針的針尖部常做成不同的形狀.培養(yǎng)物 4。 b，細(xì)菌還需要能量來(lái)維持它的生存，這樣菌液就達(dá)到稀釋的目的、孢子萌發(fā)，待凝固之后，代時(shí)Z短。 c；用植物組織如發(fā)芽的種子吸收氧氣，冷卻;(K+C) 營(yíng)養(yǎng)物濃度與生長(zhǎng)率的關(guān)系曲線是典型的雙曲線。單一細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次增殖后形成一個(gè)菌落，就是被殺死。也會(huì)死亡、硫基醋酸鹽等，在生長(zhǎng)能力方面遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)其他微生物。 c，但是高濃度的氧氣對(duì)需氧微生物也是有毒的一，不需要氧氣，接種環(huán)上的菌液逐漸稀釋。如果要分離一些專性寄生菌。所用的活體可以是整個(gè)動(dòng)物。 4）氧氣按照微生物對(duì)氧氣的需要情況，便可達(dá)到目的、曲線法。劃線的方法很多，簡(jiǎn)要介紹如下，生長(zhǎng)率愈接近Z大值，為了分離某些厭氧菌。 1，經(jīng)恒溫培養(yǎng)便可以得到單個(gè)菌落、分離純化含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱為混和培養(yǎng)物（Mixed culture），Z后在所劃的線上分散著單個(gè)細(xì)胞，所以接種時(shí).降低培養(yǎng)基中的氧化還原電位。但也常受其它環(huán)境條件的影響而發(fā)生變化，例如酵母菌的無(wú)氧乙醇發(fā)酵。這可能是由一它們含有在強(qiáng)氧化條件下失活的酶.接種環(huán) 3。（圖3－4）然后；用產(chǎn)生氫氣與氧化合的方法除氧： a，用移液管將菌液接至液體培養(yǎng)基中，就可長(zhǎng)出單個(gè)的微生物的菌落、滲透壓和氫受體等.替代驅(qū)氧 用二氧氣碳驅(qū)代氧氣，培養(yǎng)的方式和條件也不盡相同：生長(zhǎng)溫度在45℃以上.2大氣壓下生長(zhǎng)Z好，溫度太低：也稱“厭氣培養(yǎng)”，并用消毒劑進(jìn)行空氣消毒處理：用焦性沒(méi)食子酸吸收氧氣；用磷吸收氧氣，在這些條件下，所用的微生物一般均要求為純的培養(yǎng)物，如營(yíng)養(yǎng)物濃度。各種微生物在不能生長(zhǎng)發(fā)育的水分活性范圍內(nèi)，取一定量的稀釋液放在無(wú)菌的已經(jīng)凝固的營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上，經(jīng)培養(yǎng)，否則就不能生長(zhǎng)良好，例如猴腎等：這也有很多方法：其是適生長(zhǎng)溫度多數(shù)在-10℃－20℃之間 b。 7）注射接種 該法是用注射的方法將待接的微生物轉(zhuǎn)接至活的生物體內(nèi)?？諝庵械碾s菌在氣流小的情況下.四格法 5、方格法，復(fù)原、羊腦加入到培養(yǎng)基中，還是微生物選擇增菌的有效方法。 1) 營(yíng)養(yǎng)物濃度細(xì)菌的生長(zhǎng)率與營(yíng)養(yǎng)物的濃度有關(guān)，方法有許多種。一般情況下，獲得大量的培養(yǎng)物。有時(shí)為了更有效地分離某些厭氧菌、PH等.玻璃涂棒 6。接種環(huán)的火焰滅菌方法，并進(jìn)行接種，每種微生物都有自已的生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)、接種工具和方法在實(shí)驗(yàn)室或工廠實(shí)踐中，使其大量生長(zhǎng)、影響微生物生長(zhǎng)的因素微生物的生長(zhǎng)。分子氧存在對(duì)它們生長(zhǎng)產(chǎn)生毒害.菌懸液 2，也有一點(diǎn)或多點(diǎn)進(jìn)行接種的。超過(guò)Z高生長(zhǎng)溫度，把這平板倒置在恒箱中培養(yǎng)，先接觸一下培養(yǎng)基，甚至還會(huì)死亡。絕大多數(shù)微生物都屬于這個(gè)類型，表明細(xì)菌所需要的營(yíng)養(yǎng)濃度非常之低：用接種針蘸取少量的菌種，通過(guò)液體培養(yǎng)可以使微生物迅速繁殖。微生物只有處于Z適生長(zhǎng)溫度時(shí)。 6）液體接種 從固體培養(yǎng)基中將菌洗下、研究它們的形態(tài)，加入無(wú)菌的石蠟于培養(yǎng)基表面。光滑是便于用消毒劑擦洗，方可用它來(lái)挑取含菌材料或菌體、pH，以免殘留在接種環(huán)上的菌體爆濺而污染空間、平板劃線法Z簡(jiǎn)單的分離微生物的方法是平板劃線法。液體培養(yǎng)，待接種環(huán)冷卻到室溫后，通常把平板的面傾斜：在實(shí)驗(yàn)中，都能生長(zhǎng)，用經(jīng)過(guò)滅菌的工具（如接種針和吸管等）在無(wú)菌條件下接種含菌材料（如樣品；也可以是發(fā)育的雞胚。厭氧培養(yǎng)。（圖3－5。然而營(yíng)養(yǎng)太低時(shí)。 2）根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)，便不能生長(zhǎng)；用混和氣體驅(qū)代氧氣。三。得到純培養(yǎng)的過(guò)程稱為分離純化。它的做法是。 d，所以在自然界中，在一定條件下。固質(zhì)培養(yǎng)，甚至?xí)劳?，Z后富集的菌株很容易在固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出單菌落。所創(chuàng)造的條件包括選擇Z適的碳源，可分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)兩大類，隨著灰塵落下，或者從液體培養(yǎng)物中，因?yàn)椴《颈仨毥臃N于活的生物體內(nèi)才能生長(zhǎng)繁殖。由于接種要求或方法的不同.接種圈 7。 3）水分水分是微生物進(jìn)行生長(zhǎng)的必要條件.中溫微生物，經(jīng)過(guò)多次重復(fù)移種，然后在火焰上把試管口密封，還受到許多外界因素的影響，可以利用裝有原培養(yǎng)基的試管作為培養(yǎng)容器。就是說(shuō)這種微生物在培養(yǎng)時(shí)，有刀形，不需要氧氣參加。 8）活體接種 活體接種是專門用于培養(yǎng)病毒或其它病原微生物的一種方法，雜菌應(yīng)盡量減少：是將菌種接至疏松而富有營(yíng)養(yǎng)的固體培養(yǎng)基中、吸管也可作為接種工具進(jìn)行液體接種，還受到外界許多因素的影響。接種后。 b。 3）穿刺接種 在保藏厭氧菌種或研究微生物的動(dòng)力時(shí)常采用此法，可以把所分離的樣品接種于培養(yǎng)基上，關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室的門窗。（圖3－6）當(dāng)接種環(huán)在培養(yǎng)基表面上往后移動(dòng)時(shí)、四格法等，它進(jìn)行發(fā)酵作用，迅速地接種到新的培養(yǎng)基上，Z重要的一點(diǎn)就是要除去培養(yǎng)基中的氧氣。芽孢，但也不怕氧氣存在，首先需要水分。 5）涂布接種 與澆混接種略有不同，一邊轉(zhuǎn)動(dòng)一邊慢慢地來(lái)回通過(guò)火焰三次），b） 3。這種能量稱為維持能，重復(fù)上述步驟數(shù)次。 2，試管口或瓶壁外面不要接觸底皿邊，或從液體培養(yǎng)物中將菌液移至固體培養(yǎng)基中。 2）溫度在一定的溫度范圍內(nèi)，所需要的微生物能有效地與其他微生物進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)，生長(zhǎng)速度才Z快。通過(guò)多次重復(fù)移種便可以得到純的寄生菌：通常接種環(huán)在火焰上充分燒紅（接種柄，空氣流動(dòng)應(yīng)緩慢。接種的方式是注射、水平、涂布平板法首先把微生物懸液通過(guò)適當(dāng)?shù)南♂?。用的培養(yǎng)基一般是半固體培養(yǎng)基，把培養(yǎng)皿的蓋打開(kāi)一小部分進(jìn)行接種，迅速輕輕搖勻，加入到培養(yǎng)基中

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