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  少林絕學(xué)意精經(jīng) 2017-11-25 00:00:00

  乳膠凝集法 原理： 被檢血漿中D-二聚體與包被在乳膠顆粒上的單抗相作用，產(chǎn)生絮狀沉淀反應(yīng)。 優(yōu)點(diǎn)： 快速 缺點(diǎn)： 定性實(shí)驗(yàn)； 半定量測(cè)定須多次倍比稀釋測(cè)定費(fèi)試劑，且結(jié)果重復(fù)性差。 酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA) 原理： 采用2 個(gè)針對(duì)D-二聚體的單抗建立的抗原為ZX，兩種抗體夾心法，并加入辣根過(guò)氧化酶的底物以作顯色反應(yīng)。 缺點(diǎn)： 1) 抗體與纖維蛋白（原）的D片斷有部分反應(yīng)。一般情況下D片斷吸有一個(gè)抗體結(jié)合部位，因此不再與帶顯色物的抗體結(jié)合，但有時(shí)掛鉤現(xiàn)象干涉實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 2) 操作步驟復(fù)雜、費(fèi)時(shí)，抗原抗體反應(yīng)受溫度時(shí)間影響。 3）每次實(shí)驗(yàn)需帶標(biāo)準(zhǔn)曲線，因此需留一批標(biāo)本同時(shí)測(cè)定，不適用于臨床病人及時(shí)診斷及ZL的需要。 NycoCard D-二聚體測(cè)定 原理：免疫過(guò)濾膠體金顯色反應(yīng)法采用同種抗體夾心，即以包被的抗體捕獲血漿中抗原（D-二聚體），加入偶聯(lián)有膠體金的同種抗體顯色。因此也是以抗原為ZX，抗體為三明治兩側(cè)，但為同種抗體。因抗體特異性高，可與含D-二聚體的 多種片斷結(jié)合使試驗(yàn)靈敏度。雖偶可與D片斷結(jié)合，但不發(fā)生掛鉤現(xiàn)象。 優(yōu)點(diǎn)： 快速（2min），定量檢測(cè)，靈敏度高，無(wú)掛鉤，高溫不溶 缺點(diǎn)： 特異性不強(qiáng)，受脂質(zhì)顆粒干擾，肉眼比色，不可信影響，但閱讀儀結(jié)果與ELISA結(jié)果可媲美。 D-二聚體在深靜脈血栓中的診斷價(jià)值，其實(shí)D-二聚體不僅在深靜脈血栓形成中具有很大價(jià)值，在其他疾病中也有著非常重要的意義，當(dāng)然，對(duì)這意義的理解是和對(duì)D-二聚體的了解分不開(kāi)的。 D-二聚體的形成和檢測(cè)方法 在凝血過(guò)程中，凝血酶使纖維蛋白原水解，釋放出纖維蛋白FPA和FPB，然后形成纖維蛋自單體（SFM），SFMY鏈之間形成ε（—γ谷氨酰胺）—賴氨酸交聯(lián)，然后形成纖維蛋白。這種γ鏈之間的共價(jià)交聯(lián)是形成DD的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。交聯(lián)纖維蛋白在溶解過(guò)程中，釋放出X’、Y’、D’、E’等碎片，并形成DD、DD/E、YD/YD、YY/DD等復(fù)合物。這些碎片進(jìn)一步降解為Z小的片段DD和DD/E復(fù)合物，DD分子量約62000D，在體內(nèi)半衰期>3h，主要經(jīng)腎臟排泄（1，2）。因此可以作為鉸鏈的纖維蛋白溶解的一個(gè)標(biāo)志，而單鏈的D可以來(lái)源于纖維蛋白原和沒(méi)有鉸鏈的纖維蛋白。目前有許多單克隆抗體能夠區(qū)分D—二聚體和單體的D，可以在纖維蛋白原存在的情況下，監(jiān)測(cè)纖維蛋白降解產(chǎn)物。這些抗D—二聚體的抗體不僅可以檢測(cè)游離的D—二聚體，而且可以檢測(cè)大的纖維蛋白復(fù)合物中聚合的D域，包括在凝血過(guò)程早期形成的鉸鏈的纖維蛋白復(fù)合體。對(duì)D—二聚體抗原的測(cè)定因此可以早期發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)凝血。很多的試驗(yàn)說(shuō)明低水平的D—二聚體可以排除靜脈血栓形成或者肺動(dòng)脈栓塞。升高的D—二聚體可能是靜脈血栓性疾病，也有可能是其他一些原因，造成血管內(nèi)外的纖維蛋白的形成。 目前，應(yīng)用較多的檢測(cè)主要有：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA）、乳膠顆粒凝集試驗(yàn)（LATEX）、免疫過(guò)濾膠體金染色法、雙抗體RBC凝集法和放免法。臨床Z常用是：ELISA、LATEX和免疫過(guò)濾膠體金染色法，其中LATEX法測(cè)定速度快，但敏感度不如ELISA法；ELISA法敏感度高，但檢測(cè)時(shí)耗時(shí)較長(zhǎng)（3，4）。由于不同的檢測(cè)方法其靈敏度不同，其正常參考值隨檢測(cè)方法的不同而不同，且隨年齡的增長(zhǎng)而有所⑵。

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