全部評(píng)論(3條)
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- 還可以再次一點(diǎn) 2012-10-13 00:00:00
- 盡量不要手動(dòng)鋪板,會(huì)產(chǎn)生較大的variation,導(dǎo)致復(fù)孔之間產(chǎn)生差異。建議使用機(jī)器來(lái)完成這個(gè)步驟,如Thermo公司的Multidrop Combi,配合使用一個(gè)迷你磁力攪拌器,可以使細(xì)胞在鋪板時(shí)在每個(gè)孔內(nèi)是相對(duì)均勻的。
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- djickfjsjsjf 2012-10-11 00:00:00
- 細(xì)胞鋪板重在均勻。 細(xì)胞鋪板時(shí),要每孔分布的細(xì)胞數(shù)量一致,就是從瓶中吸取細(xì)胞懸液的時(shí)候,每次吸取都要混勻后吸取,盡量做到平均分配。 其次,鋪板后用手拍打板壁,動(dòng)作輕柔些。
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- dongmingru126 2017-10-07 14:57:22
- 1、一般96孔板,每孔是加100微升細(xì)胞懸液,從孔的左邊靠近底部加入,加完半邊板后,將未加的細(xì)胞懸液混一下再,繼續(xù)加剩余的半邊板子,都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(一般輕巧敲三下),太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)(逆時(shí)針效果不好),依次敲擊剩余三個(gè)邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱。 6孔板12孔板或24孔板,均采用將diyi個(gè)孔加入少量無(wú)血清培養(yǎng)基,晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤(rùn)孔底,其它孔一次類推,這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的,細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底,加細(xì)胞懸液的時(shí)候可以避免加在中間中間細(xì)胞多,而加在周邊晃勻后周邊細(xì)胞多中間少的現(xiàn)象,細(xì)胞分散較均勻,注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒(méi)有96孔板好掌握,效果沒(méi)有96孔板好,所以我放棄改用浸潤(rùn)孔底的方法。 2、細(xì)胞懸液加完后,將細(xì)胞培養(yǎng)板抬高,對(duì)著燈光,從底部往上看,看細(xì)胞有沒(méi)有抱團(tuán)。然后從底部敲擊,使之分散。 3、如果實(shí)驗(yàn)室有平板振蕩器的話,我建議用這個(gè)儀器稍振蕩一下,效果不錯(cuò),就是振幅小,頻率高的那種。 4、細(xì)胞要盡量打散,大部分呈單個(gè)狀態(tài)。離心后,要充分懸??!還有轉(zhuǎn)移到六孔板后,是要晃得!晃的時(shí)候Z好不要讓那個(gè)細(xì)胞液轉(zhuǎn)圈,不然細(xì)胞就全被帶到中間去了,就會(huì)不均勻! 5、一瓶細(xì)胞長(zhǎng)滿后,正常處理,在培養(yǎng)瓶里吹勻,然后鋪6孔板,每孔2毫升,鋪完之后不用觀察直接用酒精棉擦拭,然后放到培養(yǎng)箱里,輕微的左三圈 右三圈 前三圈 后三圈?;旧?4小時(shí)之后觀察 每孔的細(xì)胞都會(huì)很均勻。 6、計(jì)算好所需要的全部液體量和細(xì)胞量,混勻后,加到六孔板里,六孔板按橫8字型晃,顯微鏡下觀察,如果不均勻,按上述方法再晃。如果細(xì)胞未計(jì)數(shù)直接種的話,在種六孔板的過(guò)程中,隨時(shí)晃一下混勻用的瓶子,瓶子我通常是順時(shí)針或逆時(shí)針轉(zhuǎn)圈。 7、放在水平板面上先上下移動(dòng),再左右移動(dòng),每個(gè)方向5到6次,但關(guān)鍵的是搖完后Z好直接放入培養(yǎng)箱中,不要再做過(guò)多的運(yùn)動(dòng),例如放到鏡下去看,否則很容易就又聚到中間去了。
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本生PCR板—96孔板鋪板的小技巧
96孔板進(jìn)行鋪板的?當(dāng)細(xì)胞用96孔板接種時(shí),細(xì)胞經(jīng)常是不均勻分布。第二天就會(huì)發(fā)現(xiàn)有些地方出現(xiàn)堆積性生長(zhǎng),而還有不少地方細(xì)胞則很稀疏,細(xì)胞密集的地方因細(xì)胞與細(xì)胞之間的接觸抑制影響細(xì)胞的生長(zhǎng),這樣就很難評(píng)價(jià)干預(yù)因素對(duì)細(xì)胞的作用。因此,將96孔板種均勻也是進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)的提,現(xiàn)將以用的老辦法和用的新方法比較一下,以讓大家看看各自優(yōu)缺。
1、老方法:植板后,用手拿起96孔板,左右搖動(dòng),然后來(lái)回?fù)u動(dòng)幾次,但這種方法通常在2-3個(gè)細(xì)胞的5口井中分布不均勻。 在大多數(shù)情況下,中間的孔會(huì)出現(xiàn)成堆的分布,會(huì)讓人感到一陣麻煩。 再一次,看到一位老師將電路板放在振動(dòng)器上并搖動(dòng)幾分鐘。 結(jié)果更糟。 細(xì)胞都在中間。
通常,會(huì)在96孔板的每個(gè)孔上,加入100微升的細(xì)胞懸浮液。把它從左邊加到洞底。加入一半板材后,與未加入的細(xì)胞懸浮液混合,然后繼續(xù)加入剩余的一半板材。蓋上蓋子后,用左手輕輕握住木板的左邊,然后用右手輕拍木板的右邊緣。注意力集中在力量上(通常敲擊它三次)。太多或太多次會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞堆積。順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)盤(pán)子(逆時(shí)針?lè)较虿缓? ,將剩下的三面逐一拍打,靜置5分鐘左右,然后放入37度的培養(yǎng)箱中。本生熒光定量PCR板
2、新方法:這種方法是非常好,非常均勻播種。使用等速吸引吸取細(xì)胞,然后吸移嘴對(duì)孔(注意尖不接觸孔槍頭底部)的側(cè)壁上,然后再慢慢敲除細(xì)胞吸管定植后,不要搖晃板,它只是可以直接在顯微鏡下被放置,這個(gè)方法可以被說(shuō)成是有效的。
補(bǔ)充:從6孔板到96孔板,細(xì)胞應(yīng)均勻分布分散。用培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋細(xì)胞,然后將培養(yǎng)板放置在適當(dāng)?shù)奈恢谩L砑右粋€(gè)細(xì)胞時(shí)和之后,請(qǐng)勿移動(dòng)能力培養(yǎng)板;如果在空氣中沒(méi)有介質(zhì)吹入,但是不要移動(dòng)培養(yǎng)板,加入細(xì)胞后,靜置20-30分鐘,然后可以將其移入培養(yǎng)箱。這樣,細(xì)胞結(jié)構(gòu)通常具有均勻生長(zhǎng)。當(dāng)然,提是細(xì)胞消化系統(tǒng)良好。
本生PCR板—96孔板 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。
- 天津本生-全黑全白96孔板鋪板技巧
天津本生-全黑全白96孔板鋪板技巧
剛開(kāi)始用96孔板種細(xì)胞 時(shí)細(xì)胞總是分布不均勻,第二天就會(huì)發(fā)現(xiàn)有些地方出現(xiàn)堆積性生長(zhǎng),而還有不少地方細(xì)胞則很稀疏,細(xì)胞密集的地方因細(xì)胞與細(xì)胞之間的接觸抑制影響細(xì)胞的生長(zhǎng),這樣就很難評(píng)價(jià)干預(yù)因素對(duì)細(xì)胞的作用,因此將96孔板種均勻也是進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)的前提,現(xiàn)將天津本生小編以前用的舊法和用的新法比較一下,以讓大家看看各自優(yōu)缺。
1、舊法:種過(guò)板子后,用手將96孔板平拿起,左右晃動(dòng)幾下,然后再前后晃動(dòng)幾下,不過(guò)這種方法5個(gè)復(fù)孔中總有2-3個(gè)孔中細(xì)胞分布不均勻,多數(shù)情況下是孔的中間出現(xiàn)成堆分布,為此苦惱了一陣子。還又一次見(jiàn)一師姐將種好的板子放在搖床上搖了幾分鐘,結(jié)果更慘了,細(xì)胞全部跑到中間了。
一般96孔板我每孔是加100微升細(xì)胞懸液,從孔的左邊靠近底部加入,加完半邊板后,將未加的細(xì)胞懸液混一下再,繼續(xù)加剩余的半邊板子,都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)(逆時(shí)針效果不好),依次敲擊剩余三個(gè)邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng) 箱。
2、新法:這種方法簡(jiǎn)直是太好了,種的很均勻。先用移液槍將吹打均勻的細(xì)胞吸起來(lái),讓后將槍頭緊貼著孔的一側(cè)壁(注意槍頭的尖不要接觸孔底),然后將槍頭中的細(xì)胞緩緩的打下去,種好之后千萬(wàn)不要搖晃板子,直接放到顯微鏡 下看就可以了,此方法可以說(shuō)是100%的有效吧。 希望對(duì)大家有幫助。
補(bǔ)充:從6孔板到96空板要細(xì)胞分散均勻,先用培養(yǎng)基把細(xì)胞稀釋好,再把培養(yǎng)板放在適當(dāng)?shù)奈恢?,加入?xì)胞時(shí)和加入細(xì)胞后不移動(dòng)培養(yǎng)板;如果空中有的地方?jīng)]有培養(yǎng)基可吹打,但不要移動(dòng)培養(yǎng)板,加入細(xì)胞后靜置20-30分鐘再移入培養(yǎng)箱。這樣細(xì)胞一般都能長(zhǎng)的很均勻。當(dāng)然,前提是細(xì)胞消化的很好。
天津本生-全黑全白96孔板鋪板技巧,我司由具有行業(yè)背景和豐富市場(chǎng)經(jīng)驗(yàn)的業(yè)人士組成,于為生命科學(xué)研究域提供產(chǎn)品,為廣大科研工作者提供服務(wù)。 既能滿足研發(fā)類客戶對(duì)產(chǎn)品種類、包裝的特殊要求,也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)?;a(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。
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- 本生闡述:96孔板在實(shí)驗(yàn)中的作用及鋪板技巧
本生闡述:96孔板在實(shí)驗(yàn)中的作用及鋪板技巧
96孔板是一種用于測(cè)量流量的差壓產(chǎn)生裝置。可與各種差壓表或差壓變送器配套使用,測(cè)量管道中各種流體的流量。設(shè)備采用特殊工藝制作,使細(xì)胞達(dá)到適宜吸附狀態(tài),所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)伽馬射線滅菌。那么96孔板通??梢园l(fā)揮出什么樣的作用呢?接下來(lái)就由96孔板的供應(yīng)商天津本生小編來(lái)講解一下吧,希望能夠?qū)Υ蠹矣兴鶐椭?/p>
1、儲(chǔ)存樣品:
96孔板可替代常規(guī)的1.5毫升離心管樣品儲(chǔ)存,儲(chǔ)存方便,可承受-80 °c冰箱。因此它也被稱為存儲(chǔ)塊。
2、加工樣品:
96孔板可與放電槍、高通量自動(dòng)控制液體操作儀及軟件可以結(jié)合,實(shí)現(xiàn)對(duì)生物處理樣品的高通量操作,如蛋白質(zhì)沉淀、液液提取等,并大大提高了樣品處理效率。 PP材質(zhì)可承受121℃高溫高壓以及滅菌技術(shù)處理。
3、采樣操作:
常用于各類自動(dòng)取樣器,可直接放置在自動(dòng)取樣器的樣品室進(jìn)行進(jìn)樣。與傳統(tǒng)的進(jìn)樣瓶相比,它不僅可以使進(jìn)樣室中的樣品數(shù)量增加一倍,而且可以實(shí)現(xiàn)進(jìn)樣室進(jìn)樣。在96孔板上處理后,樣品直接進(jìn)樣,省去了來(lái)回吸樣、放置樣品、加蓋、插入插件、洗瓶等繁瑣工作。
96孔板鋪板的技巧:
方法1:種植板后,用手拿起96孔板,左右搖動(dòng)幾次,然后來(lái)回?fù)u動(dòng)幾次,但是這種方法總是使細(xì)胞在2中分布不均5口多口井中的-3口。 ,再一次看到一個(gè)姐姐將種植好的木板放在搖床上,搖了幾分鐘,結(jié)果更糟,所有的細(xì)胞都跑到了中間。
通常我將100微升的細(xì)胞懸液添加到96孔板的每個(gè)孔中?!∥覍⑵鋸淖髠?cè)添加到井的底部。加入一半的平板后,我混合未添加的細(xì)胞懸浮液,并繼續(xù)添加剩余的一半平板。涂完石膏后,左手輕輕支撐板子的左側(cè),右手輕拍板子的右邊緣。注意力量(我通常輕拍三下)。順時(shí)針旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)板(逆時(shí)針?lè)较虿缓?,將剩下的三面一一拍打,讓其靜置約5分鐘,然后將其放入培養(yǎng)箱中。
方法2:該方法簡(jiǎn)直很棒,種植非常均勻。首先使用移液器吸取均勻吸取的細(xì)胞,然后將移液器吸頭靠近孔的開(kāi)口(請(qǐng)注意,移液器吸頭的不接觸孔的底部),然后緩慢敲低細(xì)胞在移液器。種植后,請(qǐng)勿搖動(dòng)木板,只需將其放在顯微鏡下即可。
本生闡述:96孔板在實(shí)驗(yàn)中的作用及鋪板技巧,本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。
- 制作面包板有什么技巧和注意事項(xiàng)嗎?
- 我是個(gè)新手,diyi次做面包板調(diào)試電路,有如下幾個(gè)問(wèn)題: 1)連線用什么,難道用細(xì)電線?電路簡(jiǎn)單點(diǎn)還行,復(fù)雜點(diǎn)不是亂七八糟的嗎?用焊錫做導(dǎo)線可以嗎? 2)可以把接地接在電源接頭上嗎?所有的接地都接一起可以嗎?如果要分開(kāi)的話,怎么接地? 3)可以只用... 我是個(gè)新手,diyi次做面包板調(diào)試電路,有如下幾個(gè)問(wèn)題: 1)連線用什么,難道用細(xì)電線?電路簡(jiǎn)單點(diǎn)還行,復(fù)雜點(diǎn)不是亂七八糟的嗎?用焊錫做導(dǎo)線可以嗎? 2)可以把接地接在電源接頭上嗎?所有的接地都接一起可以嗎?如果要分開(kāi)的話,怎么接地? 3)可以只用一個(gè)香蕉頭做電源接頭吧,當(dāng)然,前提是我所有源器件所需電源都是一樣的,這個(gè)板上都是9V就可以了 4)有什么布局上的注意嗎?防止干擾什么的? 5)大家在做面包板的時(shí)候有什么注意事項(xiàng)推薦給新手的? 謝謝~~~ 展開(kāi)
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