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轉(zhuǎn)基因植物有哪些分析鑒定方法

dv3tu4 2016-06-21 18:30:47 944  瀏覽
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全部評(píng)論(1條)

  • zky914 2016-06-22 00:00:00
    分析、確定了75個(gè)品種的轉(zhuǎn)基因構(gòu)建成分,為開(kāi)展轉(zhuǎn)基因檢測(cè)奠定了基礎(chǔ)。 2、不同類型的植物提取基因組DNA的方法略有差異,該研究?jī)?yōu)化了CTAB、SDS快速提取法,并選擇了磁珠吸附試劑盒法,成功提取了適合于PCR反應(yīng)的植物基因組DNA。 3、以植物內(nèi)源基因18SrRNA為靶標(biāo),設(shè)計(jì)、優(yōu)化后篩選出特異性引物和探針,建立了以18SrRNA為目標(biāo)的檢測(cè)植物基因組DNA提取質(zhì)量的PCR與熒光PCR鑒定體系。 4、首次以CaMV35S、FMV啟動(dòng)子、NOS終止子、標(biāo)記基因NPTII、抗除草劑基因EPSPS、PAT、抗蟲(chóng)基因CryIAb為檢測(cè)目標(biāo),設(shè)計(jì)、篩選出特異性引物,優(yōu)化實(shí)驗(yàn)參數(shù),建立了轉(zhuǎn)基因植物PCR定性檢測(cè)方法體系,靈敏度達(dá)0。 1﹪。 5、克隆了CaMV35S、FMV啟動(dòng)子、NOS終止子、標(biāo)記基因NPTII、抗除草劑基因EPSPS、PAT、抗蟲(chóng)基因CryIAb的陽(yáng)性質(zhì)粒作為轉(zhuǎn)基因植物檢測(cè)的陽(yáng)性對(duì)照。 6、于反應(yīng)體系中引入U(xiǎn)NG酶,建立了無(wú)污染的熒光PCR擴(kuò)增體系。 7、首次以FAM熒光素標(biāo)記探針5端作為發(fā)光基團(tuán),以TARMA標(biāo)記探針3端為淬滅基團(tuán),以CaMV35S、FMV啟動(dòng)子、NOS終止子、標(biāo)記基因NPTII、抗除草劑基因EPSPS、PAT、抗蟲(chóng)基因CryIAb為檢測(cè)目標(biāo),設(shè)計(jì)、篩選出特異性引物和探針,優(yōu)化實(shí)驗(yàn)參數(shù),建立了轉(zhuǎn)基因植物通用性熒光PCR定性檢測(cè)方法體系。 8、以FAM和TET兩種熒光素標(biāo)記外源基因和內(nèi)源基因,建立了轉(zhuǎn)基因大豆抗除草劑基因EPSPS和轉(zhuǎn)基因玉米抗蟲(chóng)基因CryIAb的熒光PCR定量檢測(cè)體系,兩體系的靈敏度均達(dá)到0。 1﹪以上。 9、首次利用反向PCR技術(shù)擴(kuò)增出華番1號(hào)基因組未知DNA序列,并通過(guò)DNA測(cè)序,利用BLAST軟件進(jìn)行同源性比較,找出載體與基因組整合位點(diǎn)DNA序列。 10、利用熒光PCR技術(shù),設(shè)計(jì)出特異性引物與探針,優(yōu)化實(shí)驗(yàn)參數(shù),建立了一種靈敏、精確、定量和鑒定華番1號(hào)品種特異性的GX檢測(cè)體系。 這在國(guó)內(nèi)為首次利用整合位點(diǎn)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因植物檢測(cè)和品種特異性鑒定的方法……

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飛行時(shí)間質(zhì)譜儀分析方法有哪些?

飛行時(shí)間質(zhì)譜儀分析方法

飛行時(shí)間質(zhì)譜儀(TOF-MS, Time-of-Flight Mass Spectrometry)是一種高效且精確的分析工具,廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生命科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。其主要特點(diǎn)是通過(guò)測(cè)量離子飛行的時(shí)間來(lái)確定其質(zhì)量,具有高分辨率、快速掃描和廣泛的質(zhì)量范圍等優(yōu)勢(shì)。本文將詳細(xì)介紹飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的分析方法,包括其工作原理、應(yīng)用領(lǐng)域及常見(jiàn)的分析技術(shù)。

飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的工作原理是基于質(zhì)荷比(m/z)原理。當(dāng)樣品通過(guò)電噴霧或激光脫附等方式被離子化后,離子在電場(chǎng)作用下被加速。不同質(zhì)量的離子由于受到的力不同,飛行時(shí)間也會(huì)有所差異。通過(guò)測(cè)量離子從源頭到檢測(cè)器的飛行時(shí)間,結(jié)合已知的電場(chǎng)強(qiáng)度和加速電壓,就能計(jì)算出離子的質(zhì)量。這一過(guò)程無(wú)需分離離子,而是通過(guò)時(shí)間差異直接進(jìn)行質(zhì)量分析,從而實(shí)現(xiàn)快速、高效的質(zhì)量鑒定。

在TOF-MS分析中,離子源是關(guān)鍵組成部分,常見(jiàn)的離子源有激光解吸電離(LDI)、基質(zhì)輔助激光解吸電離(MALDI)和電噴霧電離(ESI)。MALDI通常用于大分子樣品的分析,如蛋白質(zhì)和聚合物,因?yàn)槠淇梢杂行У乇苊夥肿铀榱选6妵婌F電離則適用于液體樣品,特別是生物樣品中的小分子物質(zhì)。通過(guò)選擇適合的離子源,TOF-MS能夠應(yīng)對(duì)不同樣品的復(fù)雜性,提供準(zhǔn)確的質(zhì)量信息。

飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的優(yōu)勢(shì)之一是其高分辨率。在傳統(tǒng)的質(zhì)譜儀中,分辨率受限于離子的分析時(shí)間和設(shè)備的精度,而TOF-MS通過(guò)大范圍的飛行時(shí)間差異,能夠?qū)崿F(xiàn)極高的質(zhì)量分辨率。這使得它在復(fù)雜樣品的分析中表現(xiàn)尤為突出,如環(huán)境樣品中微量污染物的檢測(cè)、藥物代謝產(chǎn)物的分析等。

飛行時(shí)間質(zhì)譜儀還具有較高的靈敏度和快速掃描能力。由于離子在飛行管中的速度較高,TOF-MS能夠在短時(shí)間內(nèi)捕捉到大量的質(zhì)譜數(shù)據(jù),提供豐富的分析信息。尤其在液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)中,飛行時(shí)間質(zhì)譜儀與液相色譜技術(shù)的結(jié)合使得復(fù)雜樣品的分離和定性分析更加高效,能夠?qū)旌衔镏械某煞诌M(jìn)行精確鑒定。

TOF-MS在多個(gè)領(lǐng)域中的應(yīng)用也日益廣泛。在生命科學(xué)領(lǐng)域,它被用于蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)和藥物開(kāi)發(fā)中,通過(guò)精確的質(zhì)量分析為疾病機(jī)制的研究和新藥的開(kāi)發(fā)提供數(shù)據(jù)支持。在環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域,TOF-MS能夠檢測(cè)空氣、水質(zhì)和土壤中的微量污染物,為環(huán)境保護(hù)提供技術(shù)保障。TOF-MS在食品安全檢測(cè)、法醫(yī)鑒定等方面也發(fā)揮著重要作用。

盡管飛行時(shí)間質(zhì)譜儀具備眾多優(yōu)點(diǎn),但其分析過(guò)程中仍然存在一些挑戰(zhàn)。例如,高精度的儀器需要高昂的投資和維護(hù)成本,而且數(shù)據(jù)分析過(guò)程較為復(fù)雜。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展,未來(lái)TOF-MS的性能有望得到進(jìn)一步提升,同時(shí)在更加多樣化的領(lǐng)域中得到應(yīng)用。

飛行時(shí)間質(zhì)譜儀作為一項(xiàng)成熟的分析技術(shù),憑借其高分辨率、高靈敏度和快速掃描的特點(diǎn),在多個(gè)學(xué)科領(lǐng)域中展現(xiàn)了廣泛的應(yīng)用前景。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,它將在更加精細(xì)化的分析任務(wù)中發(fā)揮重要作用,推動(dòng)科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用的不斷發(fā)展。

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芯片失效分析方法有哪些?

芯片失效分析方法有哪些?

  1 、C-SAM(超聲波掃描顯微鏡),無(wú)損檢查:1.材料內(nèi)部的晶格結(jié)構(gòu),雜質(zhì)顆粒.夾雜物.沉淀物.2. 內(nèi)部裂紋. 3.分層缺陷.4.空洞,氣泡,空隙等. 德國(guó)

  2 、X-Ray(這兩者是芯片發(fā)生失效后首先使用的非破壞性分析手段),德國(guó)Fein

  微焦點(diǎn)Xray用途:半導(dǎo)體BGA,線路板等內(nèi)部位移的分析 ;利于判別空焊,虛焊等BGA焊接缺陷. 參數(shù):標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)分辨率<500納米 ;幾何放大倍數(shù): 2000 倍 Z大放大倍數(shù): 10000倍 ; 輻射小: 每小時(shí)低于1 μSv ;電壓: 160 KV, 開(kāi)放式射線管設(shè)計(jì)

  防碰撞設(shè)計(jì);BGA和SMT(QFP)自動(dòng)分析軟件,空隙計(jì)算軟件,通用缺陷自動(dòng)識(shí)別軟件和視頻記錄。這些特點(diǎn)非常適合進(jìn)行各種二維檢測(cè)和三維微焦點(diǎn)計(jì)算機(jī)斷層掃描(μCT)應(yīng)用。

  Fein微焦點(diǎn)X射線(德國(guó))

  Y.COUGAR F/A系列可選配樣品旋轉(zhuǎn)360度和傾斜60度裝置。

  Y.COUGAR SMT 系列配置140度傾斜軸樣品,選配360度旋轉(zhuǎn)臺(tái)

  3 、SEM掃描電鏡/EDX能量彌散X光儀(材料結(jié)構(gòu)分析/缺陷觀察,元素組成常規(guī)微區(qū)分析,精確測(cè)量元器件尺寸), 日本電子

  4 、EMMI微光顯微鏡/OBIRCH鐳射光束誘發(fā)阻抗值變化測(cè)試/LC 液晶熱點(diǎn)偵測(cè)(這三者屬于常用漏電流路徑分析手段,尋找發(fā)熱點(diǎn),LC要借助探針臺(tái),示波器)

  5 、FIB 線路修改,切線連線,切點(diǎn)觀測(cè),TEM制樣,精密厚度測(cè)量等

  6 、Probe Station 探針臺(tái)/Probing Test 探針測(cè)試,ESD/Latch-up靜電放電/閂鎖效用測(cè)試(有些客戶是在芯片流入客戶端之前就進(jìn)行這兩項(xiàng)可靠度測(cè)試,有些客戶是失效發(fā)生后才想到要篩取良片送驗(yàn))這些已經(jīng)提到了多數(shù)常用手段。失效分析前還有一些必要的樣品處理過(guò)程。

    7 、取die,decap(開(kāi)封,開(kāi)帽),研磨,去金球 De-gold bump,去層,染色等,有些也需要相應(yīng)的儀器機(jī)臺(tái),SEM可以查看die表面,SAM以及X-Ray觀察封裝內(nèi)部情況以及分層失效。

  除了常用手段之外還有其他一些失效分析手段,原子力顯微鏡AFM ,二次離子質(zhì)譜 SIMS,飛行時(shí)間質(zhì)譜TOF - SIMS ,透射電鏡TEM , 場(chǎng)發(fā)射電鏡,場(chǎng)發(fā)射掃描俄歇探針, X 光電子能譜XPS ,L-I-V測(cè)試系統(tǒng),能量損失 X 光微區(qū)分析系統(tǒng)等很多手段,不過(guò)這些項(xiàng)目不是很常用。

芯片失效分析步驟:

    1、非破壞性分析:主要是超聲波掃描顯微鏡(C-SAM)--看有沒(méi)delamination,xray--看內(nèi)部結(jié)構(gòu),等等;

    2 、電測(cè):主要工具,萬(wàn)用表,示波器,sony tek370a,現(xiàn)在好象是370b了;

    3 、破壞性分析:機(jī)械decap,化學(xué) decap芯片開(kāi)封機(jī)

  半導(dǎo)體器件芯片失效分析 芯片內(nèi)部分層,孔洞氣泡失效分析

  C-SAM的叫法很多有,掃描聲波顯微鏡或聲掃描顯微鏡或掃描聲學(xué)顯微鏡或超聲波掃描顯微鏡(Scanning acoustic microscope)總概c-sam(sat)測(cè)試。

  微焦點(diǎn)Xray用途:半導(dǎo)體BGA,線路板等內(nèi)部位移的分析 ;利于判別空焊,虛焊等BGA焊接缺陷.  參數(shù):標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)分辨率<500納米 ;幾何放大倍數(shù): 2000 倍 Z大放大倍數(shù): 10000倍 ; 輻射小: 每小時(shí)低于1 μSv ;電壓: 160 KV, 開(kāi)放式射線管設(shè)計(jì)防碰撞設(shè)計(jì);BGA和SMT(QFP)自動(dòng)分析軟件,空隙計(jì)算軟件,通用缺陷自動(dòng)識(shí)別軟件和視頻記錄。這些特點(diǎn)非常適合進(jìn)行各種二維檢測(cè)和三維微焦點(diǎn)計(jì)算機(jī)斷層掃描(μCT)應(yīng)用?! ?/span>

芯片開(kāi)封機(jī)DECAP主要用于芯片開(kāi)封驗(yàn)證SAM,XRAY的結(jié)果。


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