細(xì)胞離心是常見(jiàn)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中不可缺少的一步，它不僅可以使掛壁的樣品完全沉降到管底，也可以幫助確認(rèn)細(xì)胞濃度，用于后續(xù)的如原代細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞傳代培養(yǎng)、單細(xì)胞測(cè)序等相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

對(duì)于不同的細(xì)胞/細(xì)胞器分離，其離心分離法各不相同，適合的場(chǎng)合也不盡相同。那么常見(jiàn)的細(xì)胞離心分離方法都有哪些呢？

01差速離心法

差速離心法是利用在離心力場(chǎng)中不同的粒子沉降系數(shù)的差別，通過(guò)逐漸提高離心力，使非均勻混合液內(nèi)的不同大小、形狀的粒子分步沉淀的離心方法。主要用于實(shí)驗(yàn)室樣品分離，例如分離細(xì)胞器線粒體、葉綠體、蛋白質(zhì)和病毒等。

 分離步驟 第/一步：設(shè)置較低的離心速度（相對(duì)離心力），先讓較大的顆粒沉降到管底，而混合液中小的顆粒仍然懸浮在上清液中。

第二步：收集沉淀，設(shè)置較高的離心速度（相對(duì)離心力）離心懸浮液，將較小的顆粒沉降，后續(xù)依此類推，最終可分離不同大小顆粒的。

圖一.差速離心示意圖

 02密度梯度離心法

密度梯度離心法又稱為區(qū)帶離心法，可分為速率區(qū)帶離心法和等密度離心法。

 1.速率區(qū)帶離心法 

主要用于分離密度相近而大小不等的細(xì)胞或細(xì)胞器。離心管內(nèi)先裝入蔗糖、甘油、CsCl、Percoll等密度梯度介質(zhì)，樣品粒子的密度必須大于梯度液柱中任一點(diǎn)的密度，被分離的粒子在梯度液中沉降速度不同，離心時(shí)，混合樣品中不同的組分將在梯度液柱的不同位置分別形成各自的區(qū)帶，達(dá)到彼此分離的目的。

圖二.速率區(qū)帶離心示意圖

 2.等密度離心法 

適用于分離密度不等的顆粒。細(xì)胞或細(xì)胞器在連續(xù)梯度的介質(zhì)中經(jīng)足夠大離心力和足夠長(zhǎng)時(shí)間則沉降或漂浮到與自身密度相等的介質(zhì)處，并停留在那里達(dá)到平衡，從而將不同密度的細(xì)胞或細(xì)胞器分離。常用介質(zhì)有Percoll，而CsCl、Cs2SO4和三碘甲酰葡萄糖胺經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間離心后也可產(chǎn)生穩(wěn)定的梯度。

圖三.密度梯度離心示意圖

瑞沃德M1416R高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)

瑞沃德M1416R高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)，不僅可以應(yīng)用在細(xì)胞的密度梯度離心，還可應(yīng)用在細(xì)胞沉淀，細(xì)胞的懸浮純化；病毒的沉淀及PEG沉淀，病毒的密度梯度離心；蛋白質(zhì)、核酸分離；生物制品、化學(xué)高分子制品、納米材料純化處理；臨床的血液、體液、排泄物等的分離。應(yīng)用廣泛，性能卓越。

• 轉(zhuǎn)速可達(dá)30，000 X g，在較高轉(zhuǎn)速也可使樣品穩(wěn)定離心

• 9/10升降速可調(diào)節(jié)，有利于密度梯度離心

• 多種轉(zhuǎn)子可選，可實(shí)現(xiàn)單管2mL-400mL的離心需求

• 自鎖轉(zhuǎn)子搭配快鎖蓋子，實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)自切換及離心

• 搭配動(dòng)平衡實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，保證樣本安全

  
  

  
  

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