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實(shí)驗(yàn)室微生物檢驗(yàn)需要注意哪些問題

lxhf1987 2016-06-18 19:18:08 559  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • 陽光7679 2016-06-19 00:00:00
    微生物檢驗(yàn)無菌操作的注意事項(xiàng)有很多細(xì)節(jié),日常的微生物檢驗(yàn)過程中要注意無菌操作,除了要在潔凈臺(tái)和操作器皿上的消毒,還需要注意人員衛(wèi)生和環(huán)境的衛(wèi)生。 【操作技巧】 進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷,但又不必太快,以防空氣流動(dòng),增加污染機(jī)會(huì)。不能用手觸及已消毒器皿,如已接觸,要用火焰燒灼消毒或取備品更換。為拿取方便,工作臺(tái)面上的用品要有合理的布局,原則上應(yīng)是右手使用的東西放置在右側(cè),左手用品在左側(cè),酒精燈置于ZY。工作由始至終要保持一定順序性,組織或細(xì)胞在未做處理之前,勿過早暴露在空氣中。同樣,培養(yǎng)液在未用前,不要過早開瓶;用過之后如不再重復(fù)使用,應(yīng)立即封閉瓶口直立可增加落菌機(jī)會(huì)。吸取營(yíng)養(yǎng)液、PBS、細(xì)胞懸液及其它各種用液時(shí),均應(yīng)分別使用吸管,不能混用,以防擴(kuò)大污染或?qū)е录?xì)胞交叉污染。工作中不能面向操作野講話或咳嗽,以免唾沫把細(xì)菌或支原體帶入工作臺(tái)面發(fā)生污染。操作前用酒精擦拭超凈臺(tái)面及雙手。手或相對(duì)較臟的物品不能經(jīng)過開放的瓶口上方,瓶口Z易污染,加液時(shí)如吸管尖碰到瓶口,則應(yīng)將吸管丟掉。 【培養(yǎng)前準(zhǔn)備】 在開始實(shí)驗(yàn)前要制定好實(shí)驗(yàn)計(jì)劃和操作程序。有關(guān)數(shù)據(jù)的計(jì)算要事先做好。根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,準(zhǔn)備各種所需器材和物品、清點(diǎn)無誤后將其放置操作場(chǎng)所(培養(yǎng)室、超凈臺(tái))內(nèi),然后開始消毒。這可以避免開始實(shí)驗(yàn)后.囚物品不全往返拿取而增加污染機(jī)會(huì)。 【火焰消毒】 在無菌環(huán)境進(jìn)行培養(yǎng)或做其它無菌工作時(shí),首先要點(diǎn)燃酒精燈或煤氣燈。以后一切操作,如按裝吸管帽、打開或封閉瓶口等,都需在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意:金屬器械不能在為焰中燒的時(shí)間過長(zhǎng),以防退火,燒過的金屬鑷要待冷卻后才能挾取組織,以免造成組織損傷。吸取過營(yíng)養(yǎng)液后的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管頭中營(yíng)養(yǎng)液能燒焦形成炭膜,再用時(shí)會(huì)把有害物帶入營(yíng)養(yǎng)液中。開啟、關(guān)閉長(zhǎng)有細(xì)胞的培養(yǎng)瓶時(shí),火焰滅菌時(shí)間要短。防止因溫度過高燒死細(xì)胞。另外膠塞過火焰時(shí)也不能時(shí)間長(zhǎng),以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細(xì)胞。 【洗手和著裝】 原則上和外科手術(shù)相同。平時(shí)僅做觀察不做培養(yǎng)操作時(shí),可穿裝細(xì)胞培養(yǎng)室內(nèi)紫外線照射30min的清潔工作服。在利用超凈臺(tái)工作時(shí),因整個(gè)前臂要伸入箱內(nèi),應(yīng)著長(zhǎng)袖的清潔工作服,并于開始操作前要用75%酒精消毒手。如果實(shí)驗(yàn)過程中手觸及可能污染的物品和出入培養(yǎng)室都要重新用消毒液洗手。進(jìn)入原代培養(yǎng)室需徹底洗手還要戴口罩、著消毒衣帽。 【操作臺(tái)消毒】 體外培養(yǎng)細(xì)胞缺乏抗感染能力,所以防止污染是決定培養(yǎng)成功或失敗的首要條件。即便使用設(shè)備完善的實(shí)驗(yàn)室。若實(shí)驗(yàn)者粗心大意,技術(shù)操作不規(guī)范,也會(huì)導(dǎo)致污染。因而.為在一切操作中為Z大可能的保證無菌.每一項(xiàng)工作都必須做到有條不紊和完全靠。無菌培養(yǎng)室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖洗地面—次(拖布要專用).紫外線照射消毒30-50min,超凈工作臺(tái)臺(tái)面每次實(shí)驗(yàn)前要用75%酒精擦洗。然后紫外線淌毒30min。在工作臺(tái)面消毒時(shí)切勿將培養(yǎng)細(xì)胞和培養(yǎng)用液同時(shí)照射紫外線,消毒時(shí)工作臺(tái)面上用品不要過多或重疊放置.否則會(huì)遮擋射線降低消毒效果?!┎僮饔镁呷缫埔浩?、廢液缸、污物盒、試管架等用75%酒精擦洗后置于臺(tái)內(nèi)同時(shí)紫外線消毒。 微生物無菌檢測(cè)培訓(xùn)小編溫馨提醒您關(guān)注食品檢驗(yàn)員報(bào)名時(shí)間安排!

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使用示波器過程中需要注意哪些問題

工程師在使用測(cè)試儀器的時(shí)候首先應(yīng)該要了解測(cè)量?jī)x器的基本原理才能正確的使用儀器,那么示波器的基本工作原理是什么呢?使用中需要注意的事項(xiàng)又有哪些呢?下面由安泰測(cè)試為大家介篩一些示波器的基本原理以及使用中的注意事項(xiàng):

一、示波器--原理簡(jiǎn)介

模擬示波器:在本質(zhì)上,模擬示波器工作方式是直接測(cè)量信號(hào)電壓,并通過從左到右穿過示波器屏幕的電子束在垂直方向描繪電壓。

二、示波器--原理簡(jiǎn)介

與模擬示波器不同,數(shù)字示波器通過模數(shù)轉(zhuǎn)換器(ADC)把被測(cè)電壓轉(zhuǎn)換為數(shù)字信息。它捕獲的是波形的一系列樣值(采樣定理),并對(duì)樣值進(jìn)行存儲(chǔ),處理。隨后,數(shù)字示波器在顯示屏上重構(gòu)波形。

三、示波器--原理簡(jiǎn)介

數(shù)字存儲(chǔ)示波器(DSO):組成DSO的一些子系統(tǒng)與模擬示波器的一些部分相似。但是,DSO包含更多的數(shù)據(jù)處理子系統(tǒng),它能夠收集顯示整個(gè)波形的數(shù)據(jù),并以數(shù)字形式表示波形信息。這樣,利用示波器本身或外部計(jì)算機(jī),方便對(duì)信號(hào)進(jìn)行分析、存檔、打印和其他的處理。

從捕獲信號(hào)到在屏幕上顯示波形,DSO采用串行的處理體系結(jié)構(gòu)。

四、示波器--原理簡(jiǎn)介

數(shù)字熒光示波器(DPO):DPO的diyi階段(輸入)與模擬示波器相似,第二階段與DSO相似(ADC)。但是,在模數(shù)轉(zhuǎn)換后,DPO與原來的示波器相比就有顯著的不同之處。

DPO使用并行體系結(jié)構(gòu)來捕獲、顯示和分析信號(hào)。

五、示波器--特別注意:浮地測(cè)量

示波器的通道地、機(jī)殼都通過AC輸入地線與大地相連,在測(cè)量浮地目標(biāo)(如電源輸出端,相對(duì)大地電平不可預(yù)計(jì))時(shí),可能會(huì)形成回路燒毀探頭/示波器。

通過斷開與大地的連接(使用2芯電源線/隔離變壓器),將示波器“浮地”。這種做法不但會(huì)導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果不準(zhǔn)確,會(huì)使示波器機(jī)殼帶電,容易造成人身安全問題。

六、示波器--浮地測(cè)量解決方法

使用差分探頭,可以通過大部分示波器進(jìn)行浮地測(cè)量。但差分 探頭仍有仍有一條電阻路徑接地,存在很小的泄露電流;

“A-B”測(cè)量(偽差分測(cè)量):使用傳統(tǒng)示波器和兩個(gè)相同型號(hào)的無源電壓探頭分別測(cè)量?jī)蓚€(gè)測(cè)試點(diǎn),兩個(gè)探頭的地線接到大地。CH1-CH2即可得到被測(cè)兩點(diǎn)之間的電壓波形;

選用TPS2000B/THS3000系列隔離輸入示波器。提供真正的、完整的通道到通道和通道到電源線隔離能力。在使用隔離輸入示波器進(jìn)行浮地測(cè)量時(shí),必須使用專門實(shí)際的無源探頭。

以上內(nèi)容轉(zhuǎn)載于安泰測(cè)試網(wǎng),如果大家在使用示波器過程中有什么問題歡迎咨詢安泰測(cè)試。


2019-08-12 14:46:53 519 0
做ELISA實(shí)驗(yàn)需要注意哪些問題?

  做ELISA實(shí)驗(yàn)需要注意哪些問題?

  Elisa實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該注意的問題,包括樣品稀釋、試劑盒平衡、樣品和試劑的混勻、加樣、溫育等問題.Elisa試劑盒有著準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)的諸多優(yōu)點(diǎn),深受廣大用戶朋友的喜愛.然而,在實(shí)驗(yàn)過程中,也需要注意很多問題.對(duì)此,上海哈靈生物提醒你您,需要遵守一些規(guī)則,才能更好地進(jìn)行實(shí)驗(yàn),取得較好的實(shí)驗(yàn)成果.

  Elisa方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定.在Elisa測(cè)定中影響因素較多,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果.引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:標(biāo)本因素;試劑因素;操作因素.

  1.樣品稀釋

  一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過大量試驗(yàn)確定,以保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性.酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng),如果血清不稀釋,不可避免會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng),出現(xiàn)假陽性.

  2.試劑盒平衡

  Elisa中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗(yàn)前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上.平衡時(shí)間太短會(huì)造成試劑混勻不夠,樣品孵育時(shí)間相對(duì)縮短,ELISA反應(yīng)不夠充分.冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘.

  3.樣品和試劑的混勻

  在稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗(yàn)的均一性.

  4.加樣

  加樣是一項(xiàng)很重要的步驟.加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡.加樣太快,無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性.加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附.

  5.溫育

  溫育是ELISA測(cè)定中影響測(cè)定成敗為關(guān)鍵的一個(gè)因素.ELISA作為一種固相免疫測(cè)定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時(shí)間.

  6.洗板

  固相免疫測(cè)定技術(shù)是一種非均相免疫測(cè)定技術(shù),需以洗滌操作將特異結(jié)合于固相的抗原或抗體與反應(yīng)溫育過程中吸附的非特異成份分離開來,以保證ELISA測(cè)定的特異性.洗液盡量不要溢出孔外;加洗液后要靜置1分鐘,甩去板孔中洗液后,一定要大力拍干;及時(shí)更換吸水紙,尤其是拍過酶標(biāo)記物的吸水紙一定要棄去,否則可能影響試驗(yàn)結(jié)果.

  7.顯色

  顯色一定要控制時(shí)間,根據(jù)試劑盒說明操作即可.一般來說,顯色時(shí)間過短,結(jié)果偏低;顯色時(shí)間過長(zhǎng),空白增高或者非特異性顯色增加.

  8.比色

  比色要注意波長(zhǎng)的選擇.以TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用,而前者比色波長(zhǎng)為450nm,后者為492nm,濾光片需根據(jù)要求隨時(shí)更換.因此,容易出現(xiàn)濾光片錯(cuò)用的問題.

  做ELISA實(shí)驗(yàn)需要注意哪些問題? 我司由具有行業(yè)背景和豐富市場(chǎng)經(jīng)驗(yàn)的業(yè)人士組成,于為生命科學(xué)研究域提供產(chǎn)品,為廣大科研工作者提供服務(wù)。 既能滿足研發(fā)類客戶對(duì)產(chǎn)品種類、包裝的特殊要求,也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)?;a(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。

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