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  wq1102521807 2015-04-26 00:00:00

  PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是1986 年由Kallis Mullis 發(fā)現(xiàn)。這項技術(shù)已廣泛地應(yīng)用于分子生物學(xué)各個領(lǐng)域，它不僅可用于基因分離克隆和核酸序列分析，還可用于突變體和重組體的構(gòu)建，基因表達(dá)調(diào)控的研究，基因多態(tài)性的分析，遺傳病和傳染病診斷，腫瘤機(jī)制探查，法醫(yī)鑒定等方面。PCR技術(shù)已成為方法學(xué)上的一次革命，它必將大大推動分子生物學(xué)各學(xué)科的研究發(fā)展。

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  厄爾多思2 2015-04-25 00:00:00

  PCR是一種體外DNA 擴(kuò)增技術(shù)，是在模板DNA、引物和４種脫氧核苷酸存在的條件下，依賴于DNA聚合酶的酶促合反應(yīng)，將待擴(kuò)增的DNA片段與其兩側(cè)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈引物經(jīng)“高溫變性——低溫退火——引物延伸”三步反應(yīng)的多次循環(huán)，使DNA片段在數(shù)量上呈指數(shù)增加，從而在短時間內(nèi)獲得我們所需的大量的特定基因片段。 在環(huán)境檢測中，靶核酸序列往往存在于—個復(fù)雜的混合物如細(xì)胞提取液中，且含量很低，對于探測這種復(fù)雜群體中的特異微生物或某個基因，雜交就顯得不敏感。使用PCR技術(shù)可將靶序列放大幾個數(shù)量級，再用探針雜交探測對被擴(kuò)增序列作定性或定量研究分析微生物群體結(jié)構(gòu)。PCR技術(shù)常與其他技術(shù)結(jié)合起來使用， 如RT-PCR、競爭PCR、槽式PCR、RAPf)、ARDRA等。 RT-PCR不僅能檢測出不能培養(yǎng)微生物，還能測量mRNA基因的轉(zhuǎn)錄水平。 競爭性PCR是一種定量PCR，通過向PCR反應(yīng)體系中加入人工構(gòu)建的帶有突變的競爭模板、控制競爭模板的濃度來確定目的模板的濃度，對目的模板作定量研究。 將PCR技術(shù)和限制酶切技術(shù)結(jié)合使用，用限制酶酶切目的基因的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，通過對酶切產(chǎn)物的分析，探測該基因的多態(tài)性。 RAPD(randomly amplified polymorphic DNA， RAPD)也是應(yīng)用比較廣泛的一項技術(shù)。RAPD是用那些對某—特定基因的非特異性的引物來擴(kuò)增某些片段。RAPD分析用于探測含有混合微生物種群的各種生物反應(yīng)器中的微生物多樣性。用RAPD分析所得到的基因組指紋圖譜在比較一段時間內(nèi)微生物種群的變化以及比較小試規(guī)模和中試規(guī)模的反應(yīng)器方面是有用的，但還不足以用來估測群落的生物多樣性。 記得采納啊

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