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蛋白質(zhì)純化制備需考慮哪些問題?原則是什么

愛zhaochen123 2016-12-01 06:06:21 450  瀏覽
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全部評論(1條)

  • 幻雪夜57 2016-12-02 00:17:41
    答:蛋白純化要利用不同蛋白間內(nèi)在的相似性與差異,利用各種蛋白間的相似性來除去非蛋白物質(zhì)的污染,而利用各蛋白質(zhì)的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來。每種蛋白間的大小、形狀、電荷、疏水性、溶解度和生物學活性都會有差異,利用這些差異可將蛋白從混合物如大腸桿菌裂解物中提取出來得到重組蛋白。蛋白的純化大致分為粗分離階段和精細純化階段二個階段。一般蛋白純化采用的方法為樹脂法。粗分離階段主要將目的蛋白和其他細胞成分如DNA、RNA等分開,由于此時樣本體積大、成分雜,要求所用的樹脂高容量、高流速、顆粒大、粒徑分布寬.并可以迅速將蛋白與污染物分開,必要時可加入相應的保護劑(例如蛋白酶YZ劑),防止目的蛋白被降解。精細純化階段則需要更高的分辨率,此階段是要把目的蛋白與那些分子量大小及理化性質(zhì)接近的蛋白區(qū)分開來,要用更小的樹脂顆粒以提高分辨率,常用離子交換柱和疏水柱,應用時要綜合考慮樹脂的選擇性和柱效兩個因素。選擇性指樹脂與目的蛋白結(jié)合的特異性,柱效則是指各蛋白成分逐個從樹脂上集中洗脫的能力,洗脫峰越窄,柱效越好。僅有好的選擇性,洗脫峰太寬,蛋白照樣不能有效分離。

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選擇離心管需考慮哪些性能?

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  離心管的定義是管狀試樣容器,可帶密封蓋或壓蓋,在實驗室里離心管是和離心機配套使用的。相信很多朋友在選擇離心管時不知道從哪方面考慮,下面BUNSEN本生小編整理了一些內(nèi)容,供大家參考。

  1、容量:由樣品的體積決定。注意在有些應用中(如高速離心)離心管必須裝滿。

  2、形狀:收集沉淀時,用圓錐性管底的離心管較好,而進行密度梯度離心時圓底試管更有用。

  3、相對離心力:詳細信息由廠家提供。

  4、耐腐蝕性:玻璃管是惰性物質(zhì),聚碳酸酯管對有機溶劑(如乙醇、丙酮)敏感,而聚丙烯具有更好的耐腐蝕性。詳細信息可參考廠家的說明書。

  5、滅菌:塑料離心管出廠時通常是消過毒的。玻璃管及聚丙烯管可重復滅菌使用。多次高壓滅菌可能會導致聚碳酸酯崩裂或變形。

  6、透明度:玻璃管和聚碳酸酯是透明的,而聚丙烯管為半透明。

  7、能否刺穿:若你想用刺穿管壁的方法收集樣品,纖維素乙酸管和聚丙烯管易于用注射管針頭刺穿。

  8、管帽:大多數(shù)角式及垂直管式轉(zhuǎn)子要求離心管有管帽,用以防止使用過程中樣品漏出并在離心過程中支撐離心管,防止其離心時變形。對于放射性樣品,即使是低速離心也一定要蓋管帽,并且要使用與所用離心管配套的管帽。

  選擇離心管需考慮哪些性能?本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。

2022-07-05 11:22:05 231 0
選擇離心管需考慮哪些性能?

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  1、容量:由樣品的體積決定。注意在有些應用中(如高速離心)離心管必須裝滿。

  2、形狀:收集沉淀時,用圓錐性管底的離心管較好,而進行密度梯度離心時圓底試管更有用。

  3、相對離心力:詳細信息由廠家提供。

  4、耐腐蝕性:玻璃管是惰性物質(zhì),聚碳酸酯管對有機溶劑(如乙醇、丙酮)敏感,而聚丙烯具有更好的耐腐蝕性。詳細信息可參考廠家的說明書。

  5、滅菌:BUNSEN塑料離心管出廠時通常是消過毒的。玻璃管及聚丙烯管可重復滅菌使用。多次高壓滅菌可能會導致聚碳酸酯崩裂或變形。

  6、透明度:玻璃管和聚碳酸酯是透明的,而聚丙烯管為半透明。

  7、能否刺穿:若你想用刺穿管壁的方法收集樣品,纖維素乙酸管和聚丙烯管易于用注射管針頭刺穿。

  8、管帽:大多數(shù)角式及垂直管式轉(zhuǎn)子要求離心管有管帽,用以防止使用過程中樣品漏出并在離心過程中支撐離心管,防止其離心時變形。對于放射性樣品,即使是低速離心也一定要蓋管帽,并且要使用與所用離心管配套的管帽。

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氮氣發(fā)生器所制氮氣純度不達標時需考慮的問題

高純氮氣發(fā)生器作為氣相色譜中的載氣設(shè)備,受到大家的廣泛青睞,空氣經(jīng)壓縮凈化后,進入空氣緩沖罐緩沖上游壓力變化引起的波動,自下而上流經(jīng)帶有CMS(碳分子篩)的吸附塔,在此過程中O2分子被吸附在CMS表面,N2從吸附塔上端流出,進入氮氣緩沖罐。一段時間后,吸附塔中的CMS被吸附的氧飽和,需要再生。兩個吸附塔交替進行吸附和再生,保證氮氣的連續(xù)輸出。


當高純氮氣發(fā)生器所制氮氣的純度不達標時,可以先考慮以下幾個問題。

1、分子篩的性能,分子篩是氮氣發(fā)生器的核心部件,它的性能好壞對于制得的氮氣純度有著很大的聯(lián)系,同時還需要根據(jù)實際需要的氮氣流量和純度來計算出分子篩的合適裝填量。如果操作不當,可能會造成碳分子篩粉化,篩粉化是由于碳分子篩壓不嚴實、碳分子篩松動造成的。儀器在生產(chǎn)組裝過程中由于粗心大意,碳分子篩沒有被壓緊,碳分子沖刷成粉從氮氣出口或者靜音器出口排出,有的壓緊裝置為氣缸壓緊,氣缸下限報警未能及時添加碳分子篩造成碳分子粉化。儀器使用過程中受震動或者設(shè)備移動等原因?qū)е挛剿Y(jié)構(gòu)性故障如吸附塔管道脫焊,碳分子外流,碳分子篩松動而粉化。

2、氣體原料的質(zhì)量,氣體是要經(jīng)壓縮后進入空氣緩沖罐,那么壓縮空氣中如含有水汽、油霧,這些都會堵塞分子篩的微孔,從而嚴重影響分離效果及CMS的使用壽命,因此,要想獲得高純度的氮氣,保證高質(zhì)量的空氣至關(guān)重要,并且要經(jīng)多次凈化過濾,濾芯需要定期檢查或者更換。

3、吸附塔的工作時間,長時間的工作周期也即是閥門的切換時間間隔,有利于降低儀器能耗,且節(jié)約空氣原料,不過純度也會因周期過長,分子篩會飽和而受到影響。


2022-01-18 14:28:09 287 0

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