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  wq1102521807 2011-06-04 00:00:00

  這是什么題，這么OPEN？ 初中，高中，大學，碩士，博士題？否則無法答，因為深度和廣度不同。

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  nimeinimei555 2011-06-05 00:00:00

  實驗方案: 查找人胰島素的基因序列，人工合成之后連接到酵母菌的質粒載體上，質粒上應有標記基因，培養(yǎng)并篩選連接成功的酵母菌，再進行培養(yǎng)，檢測其產物是否為胰島素，選擇產物是胰島素的酵母菌進行培養(yǎng)，收集所產胰島素，分離純化，實驗驗證，臨床應用。

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  教學的規(guī)劃 2011-06-03 00:00:00

  （1）配制選擇培養(yǎng)基，倒平板 （2）樣品前處理：液體或固體的處理方法不同 （3）梯度稀釋，涂平板 （4）挑單菌落，繼續(xù)純化 （5）生理生化實驗或者分子生物學方法進行菌種鑒定 還不明白給我發(fā)消息

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  我前天訂的 2011-06-02 00:00:00

  分子生物學作為基因工程的上游技術，其實驗的成果和準確性將決定下游所有的步驟和Z終的實驗結果。所以構建一個完備的分子生物學實驗室是非常重要的，以下就讓我們來看看構建一個分子生物學實驗室需要哪些儀器。 1.冰箱:根據藥品、試劑及多種生物制劑保存的需要，必須具備不同控溫級別的冰箱，Z常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃適合儲存某些溶液、試劑、藥品等。-20℃適用于某些試劑、藥品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白質樣品等。-80℃適合某些長期低溫保存的樣品、大腸桿菌菌種、純化的樣品、特殊的低溫處理消化液等的保存。0-10℃的層析冷柜適合低溫條件下的電泳、層析、透析等實驗。 2.培養(yǎng)箱：37℃恒溫箱用于細菌的平板培養(yǎng)及分子生物學實驗。 3.恒溫培養(yǎng)搖床：用于大腸桿菌等生物工程菌種的擴增。 4.水浴鍋：用于保溫并進行各類實驗。25-100℃水浴搖床可用于分子雜交試驗，各種生物化學酶反應等試驗的保溫。含低溫的水浴槽可以用于分子生物學的質粒與基因片段的連接等實驗及用于42度的大腸桿菌感受態(tài)的熱激。 5.烘箱：主用于烘干實驗器皿，有些需要溫度高些，有些需要溫度低些。用于RNA方面的實驗用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中進行烘干。 6.超純水機：隨著分子生物學的飛速發(fā)展，許多實驗對水純度的要求越來越高，用自來水、蒸餾水、離子交換水、反滲透純水做為供水，磁鐵耦合齒輪泵作用使水循環(huán)。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA測序、酶反應、組織和細胞培養(yǎng)等。 7.蒸汽消毒鍋：分子生物學所用大部分試劑，而且實驗用具都應嚴格消毒滅菌。用于小批量物品的隨時消毒。大批實驗物品、試劑、培養(yǎng)基可使用大型消毒且定時進行消毒。 8.濾器濾膜：不耐高溫、高壓的試劑用其處菌。 9.各種天平：臺秤、精密電子分析天平，用于精確稱量各類試劑。 10.液體體積的度量：量筒、移液管、微量取液器、刻度試管、燒杯、錐形瓶等。 11.pH計：測定溶液中H+的直接電位的儀器，主要通過一對電極，在不同的pH溶液中產生不同的電動勢用pH值表示出來； pH試紙：只適用于培養(yǎng)液、酚飽和液、緩沖液或其它試劑溶液的pH值的粗略估計。而大部分試劑的配制要求嚴格的pH值，需精確度高（小數點后兩位）的pH計。 12.分光光度計：光密度、分光光度計是利用物質在可見光和紫外線區(qū)域中的吸收光譜來鑒定該物質的性質及其含量的一種儀器。它是由光源、單色器、吸收池、接收器、測量儀表或顯示屏幕所組成。OD值是許多溶液中溶質定量的方便指標之一，通過所產生的單色光而測定某一溶液對該單色光的吸收值，利用它可進行核酸溶液定量和純度的初步判斷。OD值也可以作為菌濃的檢測指標。 13.高速離心機：Z大轉速25000r/m，Z大離心力89000g。有冷凍和常溫兩種，多用于制備和手收集微生物、細胞碎片、細胞、大的細胞器、硫酸銨沉淀物以及免疫沉淀物等。 14.超凈工作臺：內有紫外燈、照明燈、還應有酒精燈火焰、75%乙醇等滅菌的設備，是一種提供局部潔凈度的設備。其原理是鼓風機驅動空氣，經過低、中效的過濾器后，通過工作臺面，使實驗操作區(qū)域成為無菌的環(huán)境。 15.電泳系統：電泳技術是檢測、鑒定各種生物大分子的純度、含量及描述它們的特征，甚至還是分離、純化、回收和濃縮樣品的工具之一。電泳系統分為電源和電泳槽，電源需經穩(wěn)流通過穩(wěn)壓器，既能提供穩(wěn)定的直流電，又能輸出穩(wěn)定的電壓；水平式電泳槽：一般分為微型電泳槽和大號水平式電泳槽 16.PCR儀：PolymeraseChainReaction儀，也稱DNA熱循環(huán)儀，基因擴增儀，它是使一對寡核苷酸引物結合到正負DNA鏈上的靶序列兩側，從而酶促合成拷貝數百萬倍的靶序列DNA片段，它的每一循環(huán)包括在三種不同溫度進行的DNA變性，引物復性，DNA聚合酶催化的延伸反應三個過程。需要說明的是，有些實驗室可能還需要梯度PCR儀或實事定量熒光PCR儀來進行一些特殊的分子生物學實驗。 17.凝膠成像分析系統：對電泳后含溴乙錠（EB）核酸樣品的觀察分析。 18.其他設備 （1）微波爐：便于一些溶液的快速加熱和定溫加熱，電泳瓊脂糖凝膠配制、溶化等。 （ 2）制冰機：用于制造大多數核酸、蛋白質的實驗操作所需的低溫環(huán)境，以減少核酸酶或蛋白質酶的水解。 （3）層析裝置：（色譜分離）是一種分離多組分混合物的有效物理方法。 真空印記系統，DNA合成/測序儀：這些都是對核酸進行深入研究的必備儀器。 （4）磁力攪拌器：多角度旋轉混勻器、快速振蕩混合器：用于混合儀器。 （5）組織勻漿器：超聲組織及細胞破碎器，用其進行樣品的分離提純實驗。 （6）通風櫥：很多溶劑能逸出毒氣，必備柜，放射性試驗還要有有機玻璃屏蔽。 （7）玻璃蒸餾器、電熱加帽、變壓器：用于酚等有機溶劑的蒸餾。 （8 ）Tip頭、Eppendorf管：微管移液器tip頭（吸液尖）、Eppendorf管（微量離心管）可洗滌，硅化消毒后反復使用。對一些要求嚴格的實驗，如RNA的提取、保存等操作，應使用新的消毒tip頭與Eppendorf管。另外還應備有常用規(guī)格的離心管（1000ml、500ml、250ml、50ml、7ml等）及96孔、24孔、12孔、6孔的細胞培養(yǎng)塑料平板等。 （9）小型設備、用具：定時器、濾膜、保鮮膜、防護眼鏡鴨嘴鑷、常規(guī)的玻璃或塑料器皿（包括平皿、試管、燒杯、量瓶、試劑分液漏斗、避光保存的試劑應使用棕色試劑瓶，如飽和酚、巰基乙醇等）、記號筆、各種手套PE、乳膠、家用、防酸的等）

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