2022年的春節(jié)已接近尾聲，科研的小伙伴已經(jīng)開始忙碌起來了，對于新學(xué)期是不是也有新的計劃，發(fā)一篇sci的文章順利畢業(yè)，脫單flag，頭發(fā)多一點點，細(xì)胞養(yǎng)好，科研項目進(jìn)展順利，老師能給買臺心儀已久的顯微鏡；你想知道選擇什么種類的顯微鏡，正置還是倒置，寬場顯微鏡、超高分辨率顯微鏡、激光共焦顯微鏡等等，小本本備好，我們開始了。

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不同成像原理，不同分辨率的顯微鏡如何選擇

顯微鏡作為生命科學(xué)領(lǐng)域研究的必須工具，其結(jié)構(gòu)復(fù)雜，配置繁多，根據(jù)不同的配置和結(jié)構(gòu)，相應(yīng)的價格有很大的差異。那很多用戶在實際采購過程中，看到長串的配置不知如何去選擇，怎么用合理的價格去買到一個完全能夠滿足自己實驗需求的顯微鏡呢？從今天這期推文開始，將會著重介紹選擇顯微鏡的幾個關(guān)鍵核心問題，目的是讓用戶能夠在自己的預(yù)算范圍內(nèi)選擇出符合自己實驗需求的顯微鏡。

首先要知道顯微鏡從開始誕生發(fā)展到現(xiàn)在，主要通過分辨率來劃分，分為寬場顯微鏡、超高分辨率顯微鏡、激光共焦顯微鏡以及電鏡。這一系列顯微鏡的分辨率從光鏡的200納米到超高與共聚焦的100多到幾十納米再到電鏡的0.2納米。

并不是說顯微鏡的分辨率越高，就越適合我們的研究。分辨率越高，意味著其價格和操作的難度系數(shù)是逐級增長的。那我們?nèi)绾稳ミx擇一個適合我們的顯微鏡呢？要根據(jù)老師和用戶自己樣品的大小去選擇。

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不同機(jī)型的選擇

我們在根據(jù)樣品的大小和觀察的實驗需求，確定了某一類型的顯微鏡之后。我們需要根據(jù)實驗樣品去選擇相對應(yīng)的合適機(jī)型。顯微鏡的主要機(jī)型，根據(jù)其光路設(shè)計的不同，主要分為體視顯微鏡、正置顯微鏡和倒置顯微鏡。

體視顯微鏡：體視顯微鏡，是一種具有正像立體感的顯微鏡，被廣泛應(yīng)用于材料宏觀表面觀察、失效分析、斷口分析等工業(yè)領(lǐng)域。以及生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、農(nóng)林、工業(yè)及海洋生物各部門。因為體視顯微鏡的光路設(shè)計，符合人體眼睛夾角的偏角，所以通過體視顯微鏡觀察物體時，類似于我們眼睛的成像光路，這樣會讓我們看到立體的圖像呈現(xiàn)。正是由于此設(shè)計，體視顯微鏡的分辨率要遠(yuǎn)低于傳統(tǒng)的正置或倒置顯微鏡。體視顯微鏡更多的是觀察小物體的宏觀表象，而不是更為精細(xì)的細(xì)節(jié)。

正置顯微鏡：正置顯微鏡更多的是要配合玻片來對樣品實現(xiàn)顯微觀察。如何來定義正置顯微鏡呢？顯微鏡物鏡朝下，觀察的樣品在物鏡的下方，這樣的顯微鏡我們稱之為正置顯微鏡。一般適用于的觀察樣品為：透明樣品、薄的樣片、生物切片、涂片等。

但由于正置顯微鏡的機(jī)械設(shè)計，樣品位于載物臺與物鏡中間。低倍物鏡齊焦時，與載物臺之間的距離大約為三厘米左右。像無法切割的厚樣品，類似礦石、零件或者是在孔板、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的細(xì)胞，就無法在正置顯微鏡下進(jìn)行觀察，那由此人們設(shè)計了倒置顯微鏡。

倒置顯微鏡：顧名思義，倒置顯微鏡與正置顯微鏡正好相反，那么定義也是相反的，物鏡朝上，要觀察的樣品在物鏡的上方，此類顯微鏡我們稱之為倒置顯微鏡。我們可以看到倒置顯微鏡，物鏡和載物臺之間不再放觀察的樣品，樣品是放于載物臺的上面，所以樣品的厚度就不會受到載物臺與物鏡之間距離的限制。因此倒置顯微鏡主要用于微生物、細(xì)胞、細(xì)菌、組織培養(yǎng)、懸浮體、沉淀物等的觀察。

介紹了三種不同形式的顯微鏡，相信我們的老師和用戶對自己的樣品適用于什么類型的顯微鏡已經(jīng)有了一個大體的判斷。當(dāng)我們更多的去觀察樣品的立體結(jié)構(gòu)，對細(xì)節(jié)和分辨率沒有更高追求的時候，我們通常會選擇體視顯微鏡。當(dāng)我們的樣品無法制成玻片或者不能放在玻片上時，我們就去選擇倒置顯微鏡。如果能制成玻片就選擇正置。為什么說能制成玻片就去選擇正置呢？因為對于倒置顯微鏡來說，正置顯微鏡的高倍數(shù)觀察更方便，比如60X和100X的油鏡。同時，因為它的光路要比倒置更短，搭配高分辨率聚光器后分辨率更高，對比度更好。

通過我們這期推文的介紹，老師對于選擇哪種分辨率水平的顯微鏡，以及什么類型的顯微鏡會有一個較為清楚的了解。這些只是我們采購或選擇顯微鏡的第一步，就是我們確定顯微鏡的類型。針對不同的觀察樣品，又會有其更為適應(yīng)的觀察方式，又有不同的光源，不同品質(zhì)的物鏡，供我們?nèi)ミx擇。欲知后事如何，且聽下回分解。

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