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正置熒光顯微鏡如何操作

廣州市明美光電技術(shù)有限公司 2019-05-30 11:33:00 899  瀏覽
  • 一.熒光顯微鏡主機(jī)操作步驟 

    1.開顯微鏡電源 
    2.需使用熒光才開熒光電源 
    (記?。喝缧枰褂脽晒庥^察,開啟熒光電源前,若感覺機(jī)盒很燙,請(qǐng)稍待10~20分鐘,等溫度降 回室溫3.再開啟?。?nbsp;
    4.開CCD開關(guān),CCD亮黃燈 
    5.開電腦,打開電腦桌面上的Piturefram軟件,此時(shí)CCD會(huì)由黃燈變成橘燈(代表 CCD與軟件連接成功)

    二. 熒光顯微鏡的設(shè)定

    1.選擇熒光濾鏡:1-DAPI、2-FITC、3-Rhod、4-DIC、5-明場(chǎng)視野 
    2.設(shè)定位于I / H(明場(chǎng)視野 ) 
    3.選擇藍(lán)色濾片(色溫會(huì)較接近白光) 
    4.光圈設(shè)定在MAX與MIN中間的位置 
    5.橘色鏡片在正確位置就定位 
    6.選擇光柵:明視野-推到底;熒光-拉出一段

    三.軟件的使用步驟

    1. 打開軟件后先至File,check Snap direct To Disk有ˇ時(shí),必須先點(diǎn)除或改存檔至預(yù)先 設(shè)好的資料夾\,以免存檔時(shí)照片存至上一位使用者的File內(nèi) 

    2. 重新設(shè)定存檔File時(shí),務(wù)必check File type為JPEG 24-Bit 

    3. 可至View點(diǎn)選Thumbnail Strip,按Snap拍照后會(huì)先顯示于右方暫存格上,只需將預(yù) 存檔之圖片拖曳至窗口即可存檔 

    4. 若影像畫面跳離主視窗時(shí),只要點(diǎn)擊那個(gè)由2個(gè)長(zhǎng)方形疊在一起按鈕,即可回到主窗口。

    5. 開啟工具列的鐵錘圖型(相機(jī)控制工具),可執(zhí)行的功能有: 

    • 拍照(Snap鍵) 

    • 白平衡(AWB圖)-游標(biāo)箭頭移至背景空白處按下,可校正圖片顏色 

    • 局部放大(放大鏡圖)-將影像放大,并按右鍵點(diǎn)選Zoom To Fit Window 可復(fù)原 

    • 曝光與增益比連動(dòng)鈕需呈按下狀態(tài)(連結(jié)圖型) 

    • 手動(dòng)曝光時(shí)間(Exposure藍(lán)色調(diào)節(jié)鈕)-調(diào)節(jié)影像明暗 圖型,即可回到主視窗 

    • 手動(dòng)調(diào)整增益(Gain鈕)-正常情形下請(qǐng)?jiān)O(shè)定在1 

    6. 開啟工具列的老虎鉗圖型(進(jìn)階工具),可執(zhí)行的功能有: 

    • 設(shè)定選取區(qū)域(ROI鍵)-可選取特定的區(qū)域放大,而游標(biāo)會(huì)呈手掌狀,欲回復(fù)原 

    • 狀則按 COLOR與Bin off Color及Gain=1 需為按下狀態(tài)


    (來源:廣州市明美光電技術(shù)有限公司)

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正置熒光顯微鏡如何操作

一.熒光顯微鏡主機(jī)操作步驟 

1.開顯微鏡電源 
2.需使用熒光才開熒光電源 
(記?。喝缧枰褂脽晒庥^察,開啟熒光電源前,若感覺機(jī)盒很燙,請(qǐng)稍待10~20分鐘,等溫度降 回室溫3.再開啟?。?nbsp;
4.開CCD開關(guān),CCD亮黃燈 
5.開電腦,打開電腦桌面上的Piturefram軟件,此時(shí)CCD會(huì)由黃燈變成橘燈(代表 CCD與軟件連接成功)

二. 熒光顯微鏡的設(shè)定

1.選擇熒光濾鏡:1-DAPI、2-FITC、3-Rhod、4-DIC、5-明場(chǎng)視野 
2.設(shè)定位于I / H(明場(chǎng)視野 ) 
3.選擇藍(lán)色濾片(色溫會(huì)較接近白光) 
4.光圈設(shè)定在MAX與MIN中間的位置 
5.橘色鏡片在正確位置就定位 
6.選擇光柵:明視野-推到底;熒光-拉出一段

三.軟件的使用步驟

1. 打開軟件后先至File,check Snap direct To Disk有ˇ時(shí),必須先點(diǎn)除或改存檔至預(yù)先 設(shè)好的資料夾\,以免存檔時(shí)照片存至上一位使用者的File內(nèi) 

2. 重新設(shè)定存檔File時(shí),務(wù)必check File type為JPEG 24-Bit 

3. 可至View點(diǎn)選Thumbnail Strip,按Snap拍照后會(huì)先顯示于右方暫存格上,只需將預(yù) 存檔之圖片拖曳至窗口即可存檔 

4. 若影像畫面跳離主視窗時(shí),只要點(diǎn)擊那個(gè)由2個(gè)長(zhǎng)方形疊在一起按鈕,即可回到主窗口。

5. 開啟工具列的鐵錘圖型(相機(jī)控制工具),可執(zhí)行的功能有: 

  • 拍照(Snap鍵) 

  • 白平衡(AWB圖)-游標(biāo)箭頭移至背景空白處按下,可校正圖片顏色 

  • 局部放大(放大鏡圖)-將影像放大,并按右鍵點(diǎn)選Zoom To Fit Window 可復(fù)原 

  • 曝光與增益比連動(dòng)鈕需呈按下狀態(tài)(連結(jié)圖型) 

  • 手動(dòng)曝光時(shí)間(Exposure藍(lán)色調(diào)節(jié)鈕)-調(diào)節(jié)影像明暗 圖型,即可回到主視窗 

  • 手動(dòng)調(diào)整增益(Gain鈕)-正常情形下請(qǐng)?jiān)O(shè)定在1 

6. 開啟工具列的老虎鉗圖型(進(jìn)階工具),可執(zhí)行的功能有: 

  • 設(shè)定選取區(qū)域(ROI鍵)-可選取特定的區(qū)域放大,而游標(biāo)會(huì)呈手掌狀,欲回復(fù)原 

  • 狀則按 COLOR與Bin off Color及Gain=1 需為按下狀態(tài)


(來源:廣州市明美光電技術(shù)有限公司)

2019-05-30 11:33:00 899 0
正置熒光顯微鏡與倒置熒光顯微鏡

正置熒光顯微鏡與倒置熒光顯微鏡:選擇與應(yīng)用分析

在生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域,熒光顯微鏡已成為一種不可或缺的工具。隨著熒光顯微鏡技術(shù)的發(fā)展,市場(chǎng)上涌現(xiàn)出了不同類型的熒光顯微鏡,其中正置熒光顯微鏡和倒置熒光顯微鏡是兩種常見且用途各異的設(shè)備。本文將對(duì)這兩種顯微鏡的特點(diǎn)、應(yīng)用場(chǎng)景及選擇依據(jù)進(jìn)行詳細(xì)分析,幫助科研人員和實(shí)驗(yàn)室工作人員做出合理的設(shè)備選擇,以滿足不同的研究需求。

正置熒光顯微鏡的特點(diǎn)與應(yīng)用

正置熒光顯微鏡(upright fluorescence microscope)以其獨(dú)特的設(shè)計(jì),廣泛應(yīng)用于細(xì)胞學(xué)、分子生物學(xué)及病理學(xué)等領(lǐng)域。其結(jié)構(gòu)通常將光學(xué)元件布置在顯微鏡頂部,觀察時(shí)樣品位于鏡頭下方。這種設(shè)計(jì)可以更方便地進(jìn)行細(xì)胞切片或活體樣品的觀察。其優(yōu)點(diǎn)之一是可以通過簡(jiǎn)單的操作輕松獲取高分辨率的熒光圖像,同時(shí)對(duì)于樣品的處理及拍攝角度也有一定的靈活性。

正置顯微鏡特別適用于薄切片樣品的觀察,因?yàn)闃悠吠ǔ1环胖迷谳d玻片上,能夠在較短的距離內(nèi)對(duì)其進(jìn)行有效觀察。由于光源和檢測(cè)設(shè)備位于顯微鏡的上方,可以有效減少樣品的熱損傷和其他不必要的干擾。由于這種設(shè)備能夠提供更為直觀的熒光圖像,常被用于細(xì)胞計(jì)數(shù)、標(biāo)記分子定位及疾病標(biāo)志物的研究等任務(wù)。

倒置熒光顯微鏡的特點(diǎn)與應(yīng)用

與正置顯微鏡不同,倒置熒光顯微鏡(inverted fluorescence microscope)的光學(xué)系統(tǒng)設(shè)計(jì)是將鏡頭置于樣品的上方,光源和反射鏡位于樣品下方。這一結(jié)構(gòu)使得倒置顯微鏡在觀察培養(yǎng)在培養(yǎng)皿中的細(xì)胞、活體組織和更大體積樣品時(shí)具有明顯的優(yōu)勢(shì)。倒置顯微鏡可以方便地從樣品的底部進(jìn)行觀察,從而避免了細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要過多的操作及擾動(dòng)。

倒置熒光顯微鏡在細(xì)胞培養(yǎng)和組織學(xué)研究中得到了廣泛的應(yīng)用,特別是在活細(xì)胞成像及動(dòng)態(tài)觀察中,具有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì)。其大的特點(diǎn)是可以直接在細(xì)胞培養(yǎng)皿中觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化、遷移等生物學(xué)現(xiàn)象,對(duì)于長(zhǎng)期動(dòng)態(tài)觀察以及細(xì)胞互動(dòng)研究具有不可替代的作用。由于倒置顯微鏡在設(shè)計(jì)上較為緊湊,樣品放置便捷,適合用于高通量篩選等實(shí)驗(yàn)操作。

選擇正置或倒置熒光顯微鏡的考慮因素

選擇適合的顯微鏡需要綜合考慮實(shí)驗(yàn)的具體需求及研究目標(biāo)。若實(shí)驗(yàn)需要對(duì)細(xì)胞切片或薄片樣品進(jìn)行高分辨率的觀察,正置顯微鏡可能更為適合。而如果實(shí)驗(yàn)對(duì)象是培養(yǎng)在培養(yǎng)皿中的活細(xì)胞或大尺寸的樣品,倒置顯微鏡則更為高效。在實(shí)際應(yīng)用中,科研人員應(yīng)根據(jù)樣品的性質(zhì)、觀察目標(biāo)以及實(shí)驗(yàn)操作的便捷性,做出合理的選擇。

專業(yè)總結(jié)

正置與倒置熒光顯微鏡各有特點(diǎn),選擇時(shí)需要充分考慮實(shí)驗(yàn)的實(shí)際需求。正置顯微鏡擅長(zhǎng)處理薄切片及提供高分辨率圖像,而倒置顯微鏡則在細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)態(tài)觀察中具有明顯優(yōu)勢(shì)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需求及操作環(huán)境,選擇合適的顯微鏡設(shè)備,是確保實(shí)驗(yàn)成功與數(shù)據(jù)精確性的關(guān)鍵。

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正置顯微鏡和偏光顯微鏡

正置顯微鏡和偏光顯微鏡是顯微鏡領(lǐng)域中的兩種常見設(shè)備,它們各自具有獨(dú)特的功能和優(yōu)勢(shì)。正置顯微鏡主要用于常規(guī)觀察,適合各類生物學(xué)和化學(xué)樣本的檢測(cè),具有較高的分辨率和清晰度。而偏光顯微鏡則主要用于研究物質(zhì)的光學(xué)特性,尤其是在礦物學(xué)、材料學(xué)等領(lǐng)域,能夠幫助科研人員分析材料的光學(xué)行為和晶體結(jié)構(gòu)。本文將對(duì)比這兩種顯微鏡的結(jié)構(gòu)、功能和應(yīng)用,幫助讀者深入了解它們的異同。

正置顯微鏡的特點(diǎn)與應(yīng)用

正置顯微鏡是顯微鏡設(shè)計(jì)中為常見的一種類型,其顯微鏡體的物鏡和照明系統(tǒng)位于樣本上方,光線從下方穿透樣本。這種設(shè)計(jì)使得樣本可以更容易地進(jìn)行觀察和聚焦。正置顯微鏡具有很高的應(yīng)用廣泛性,適用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、病理學(xué)等領(lǐng)域的日常樣本檢測(cè)。尤其是在觀察細(xì)胞、組織切片、血液樣本等時(shí),正置顯微鏡提供了較為清晰的圖像。

正置顯微鏡的優(yōu)勢(shì)在于其簡(jiǎn)單、直觀的操作方式,它提供了較高的物理空間和操作便利,使得實(shí)驗(yàn)人員可以方便地更換樣本,調(diào)整焦距和放大倍率。隨著技術(shù)的發(fā)展,現(xiàn)代的正置顯微鏡還配備了熒光觀察、相差觀察等功能,進(jìn)一步增強(qiáng)了其多樣化的應(yīng)用。

偏光顯微鏡的特點(diǎn)與應(yīng)用

偏光顯微鏡是一種專為觀察具有各向異性光學(xué)特性的樣品而設(shè)計(jì)的顯微鏡。它通過偏振光來探測(cè)樣品的光學(xué)行為,能夠揭示樣品的晶體結(jié)構(gòu)和物質(zhì)的光學(xué)各向異性。這使得偏光顯微鏡在材料科學(xué)、礦物學(xué)、地質(zhì)學(xué)等領(lǐng)域具有不可替代的作用。通過偏光顯微鏡,科研人員能夠分析礦物的光學(xué)性質(zhì),如雙折射、色散等,進(jìn)而研究其結(jié)構(gòu)特性。

偏光顯微鏡的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)在于其對(duì)復(fù)雜材料的觀察能力,尤其在晶體結(jié)構(gòu)、光學(xué)異性物質(zhì)的檢測(cè)方面。相比正置顯微鏡,偏光顯微鏡更適合在顯微尺度下深入分析固體樣品的物理特性,尤其在化學(xué)合成、新材料研發(fā)等領(lǐng)域中發(fā)揮了重要作用。

正置顯微鏡與偏光顯微鏡的區(qū)別

正置顯微鏡與偏光顯微鏡在光學(xué)設(shè)計(jì)、樣品觀察方式以及適用領(lǐng)域上有所不同。正置顯微鏡主要依賴透射光進(jìn)行觀察,而偏光顯微鏡則通過偏振光對(duì)樣品進(jìn)行照明,檢測(cè)樣品的各向異性光學(xué)性質(zhì)。正置顯微鏡適用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)樣本觀察,而偏光顯微鏡更適合用于研究具有晶體結(jié)構(gòu)和光學(xué)各向異性的固體樣品,如礦物、晶體材料等。兩者在結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)上的差異,也使得它們?cè)趯?shí)驗(yàn)室應(yīng)用中扮演著不同的角色。

結(jié)語

總體而言,正置顯微鏡和偏光顯微鏡各自擁有獨(dú)特的應(yīng)用領(lǐng)域和優(yōu)勢(shì)。正置顯微鏡因其簡(jiǎn)便的操作和高效的觀察性能,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域;而偏光顯微鏡則因其能夠揭示材料的光學(xué)特性,成為材料科學(xué)、礦物學(xué)等領(lǐng)域的重要工具。了解這兩種顯微鏡的特性與區(qū)別,有助于科研人員在選擇設(shè)備時(shí)做出更的決策。

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倒置顯微鏡和正置顯微鏡區(qū)別?

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正子斷層掃描PET如何操作

本篇文章聚焦正子斷層掃描PET的實(shí)際操作流程,圍繞前期準(zhǔn)備、示蹤劑應(yīng)用、掃描執(zhí)行及影像質(zhì)量控制等關(guān)鍵環(huán)節(jié)展開,旨在幫助放射科醫(yī)師與技師規(guī)范化操作、提升診斷效率與安全性。


PET是一種通過放射性示蹤劑顯像代謝活動(dòng)的影像技術(shù),通常與CT或MRI結(jié)合以提供解剖定位。要完成PET操作,需要遵循標(biāo)準(zhǔn)化流程:藥劑管理、患者評(píng)估、設(shè)備檢查、放射安全和圖像后處理等環(huán)節(jié)的有序銜接,確保數(shù)據(jù)可重復(fù)、結(jié)果可靠。


術(shù)前準(zhǔn)備包括對(duì)患者的綜合評(píng)估與禁忌篩查。需明確患者禁食時(shí)長(zhǎng)、糖代謝狀態(tài)以及對(duì)糖負(fù)荷的特殊要求,核對(duì)妊娠、哺乳及腎功能等禁忌。注射前建立靜脈通道、核對(duì)身份與,向患者解釋檢查期望與不適感,減少運(yùn)動(dòng)和情緒波動(dòng)對(duì)代謝信號(hào)的干擾。


示蹤劑的選擇與劑量依檢查目的而定,常見的是FDG,用于腫瘤、炎癥及代謝疾病的評(píng)估。劑量需按體重、年齡與設(shè)備規(guī)范調(diào)整,注射后一般安排約60分鐘的等待期以實(shí)現(xiàn)更佳組織攝取。等待期間要求患者靜息,避免劇烈運(yùn)動(dòng)和低糖飲食,以降低代謝波動(dòng)對(duì)圖像的影響。


掃描執(zhí)行階段,患者平躺置于PET/CT混合系統(tǒng)的掃描臺(tái)上,醫(yī)護(hù)人員記錄注射部位和靜息狀態(tài),以便后續(xù)對(duì)照。系統(tǒng)先進(jìn)行低劑量CT用于襯底定位、襯散和校正,隨后執(zhí)行PET采集。掃描時(shí)間取決于目標(biāo)區(qū)域與研究需求,通常從數(shù)分鐘到十幾分鐘不等,過程中要控制患者移動(dòng)并配合呼吸節(jié)律,以減少偽影。


圖像獲取后進(jìn)入后處理階段,技術(shù)團(tuán)隊(duì)進(jìn)行圖像重建、偽影排除和定量分析,并將代謝活性與解剖定位整合成可解讀的報(bào)告。質(zhì)量控制覆蓋儀器性能、放射劑量記錄、注射量核對(duì)以及與對(duì)比劑或其他模態(tài)的對(duì)照,確保結(jié)果具有可追溯性與穩(wěn)定性,同時(shí)遵守輻射防護(hù)規(guī)范。


結(jié)果解讀需要結(jié)合患者病史、臨床表現(xiàn)以及CT/MRI的解剖信息,醫(yī)生關(guān)注病灶的代謝強(qiáng)度、分布特征及與周圍組織的關(guān)系,必要時(shí)進(jìn)行多期對(duì)比或定量指標(biāo)對(duì)比。報(bào)告應(yīng)語言簡(jiǎn)練、要點(diǎn)清晰,避免模糊描述,確保臨床團(tuán)隊(duì)能夠據(jù)此制定策略。整體而言,PET操作是多學(xué)科協(xié)作的綜合性流程,規(guī)范執(zhí)行是提升診斷價(jià)值與患者安全的關(guān)鍵。


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倒置顯微鏡成像與正置顯微鏡成像的區(qū)別??
能從成像原理上解釋為什么在顯微鏡下觀察的移動(dòng)方向與玻片移動(dòng)方向的區(qū)別。... 能從成像原理上解釋為什么在顯微鏡下觀察的移動(dòng)方向與玻片移動(dòng)方向的區(qū)別。 展開
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金相顯微鏡的正置/倒置應(yīng)用有哪些區(qū)別?

金相顯微鏡是進(jìn)行金屬顯微分析的主要工具。專門將制備的金屬試樣放在金相顯微鏡下進(jìn)行放大和觀察,可以研究金屬組織與其成分和性能之間的關(guān)系;確定各種金屬經(jīng)不同加工及熱處理后的顯微組織;鑒別金屬材料質(zhì)量的優(yōu)劣,如各種非金屬夾雜物在組織中的數(shù)量分布情況以及金屬晶粒度大小等。

因此,利用金相顯微鏡來觀察金屬內(nèi)部組織與缺陷是金屬材料研究中的一種基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)。簡(jiǎn)單地講,金相顯微鏡是利用光的反射將不透明物件放大后進(jìn)行觀察的。金相顯微鏡不同于生物顯微鏡,它利用光的反射來觀察物體。金相顯微鏡不像放大鏡那樣由單個(gè)透鏡組成,而是由兩級(jí)特定透鏡組成,靠近被觀察物體的透鏡叫做物鏡,而靠近眼睛的透鏡叫做目鏡,借助物鏡與目鏡的兩次放大,就能將物體放大到很高的倍數(shù)(大概2000倍)。

顯微鏡的放大作用由物鏡跟目鏡共同完成。物體位于物鏡的焦點(diǎn)以外,經(jīng)物鏡放大而成倒立的實(shí)像,這一實(shí)像恰巧落在目鏡的另外一個(gè)焦點(diǎn)以內(nèi),Z后由目鏡再次放大成虛像。通常在觀察組織時(shí)所見到的像,就是經(jīng)過物鏡、目鏡兩次放大,在距人眼約250mm明視距離處形成的虛像。

在金相顯微鏡中照明光束從物鏡方向射到被觀察物體表面,被物面反射后再返回物鏡成像。金相顯微鏡的基本分類:正置金相顯微鏡和正交偏光金相顯微鏡。正置金相顯微鏡適用于電子、冶金、化工和儀器儀表行業(yè),用于觀察透明、半透明或不透明的物質(zhì),如金屬陶瓷、集成塊、印制電路板、液晶板、薄膜、纖維、鍍涂層以及其他非金屬材料,也適合在醫(yī)藥、農(nóng)林、學(xué)校、科研部門作觀察分析用。

2020-04-13 10:14:55 473 0

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