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  nice000000c 2016-06-02 00:00:00

  營養(yǎng)缺陷型（auco troph）：因喪失合成某些生活必需物質的能力，不能在基本培養(yǎng)基上生長的，突變型菌株.營養(yǎng)缺陷型auxotroph 指微生物等不能在無機鹽類和碳源組成的合成培養(yǎng)基中增殖，必須補充一種或一種以上的營養(yǎng)物質才能生長.一如胸間氮苯缺陷型所表現(xiàn)的那樣.另外對這樣的性質則稱為營養(yǎng)缺陷性（auxotrophy）.營養(yǎng)缺陷型是作為原養(yǎng)型的對應詞來使用. 　　營養(yǎng)缺陷型式微生物遺傳學研究中重要的選擇標記和育種的重要手段，在發(fā)酵工業(yè)上有廣泛用途. 營養(yǎng)缺陷型的鑒定 （1）營養(yǎng)缺陷型鑒定步驟 　A、缺陷型類別的測定 通常分別用以下物質來代表氨基酸、維生素、核酸堿基： ①氨基酸混合物、酪素水解物或蛋白胨，代表氨基酸類 ②酵母浸出液，基中氨基酸、維生素、嘌呤、嘧啶均有 ③維生素混合物，代表維生素類 ④核酸堿基混合液，代表嘌呤、嘧啶類. 將待測微生物從斜面上用生理鹽水或緩沖液喬洗下來，離心洗滌，制成濃度為106~108ml-1菌懸液，取0.1ml加入到基本培養(yǎng)基中，混勻倒入平皿，制成平板.凝固后，用加圓濾紙分別浸濕沾取以上四類代表物質，覆于平板標定的位置上.培養(yǎng)后，觀察圓濾紙片周圍菌株生長情況，如出現(xiàn)混濁的生長圈，就可初步確定缺陷型所需的生長因子屬于哪一類別，進一步復證. B、缺陷型所需生長因子的測定 在同一平皿上測定一種缺陷型菌株對許多種生長因子的需求情況，稱為生長譜法. 單一生長因子：鑒定氨基酸或維生素的營養(yǎng)缺陷型，較為簡便的方法是分組測定法.將21種氨基酸，組合6組，每6種不同氨基酸歸為一組.如果以15種維生素進行測定，則把5種維生素歸為一組，共5個組合. 組別 氨基酸組合組 1 賴氨酸 精氨酸 蛋氨酸 胱氨酸 亮氨酸 異亮氨酸 2 纈氨酸 精氨酸 苯丙氨酸 酪氨酸 色氨酸 組氨酸 3 蘇氨酸 蛋氨酸 苯丙氨酸 谷氨酸 脯氨酸 天冬氨酸 4 丙氨酸 胱氨酸 酪氨酸 谷氨酸 甘氨酸 絲氨酸 5 鳥氨酸 亮氨酸 色氨酸 脯氨酸 甘氨酸 谷氨酰胺 6 胍氨酸 異亮氨酸 組氨酸 天冬氨酸 絲氨酸 谷氨酰胺 組別 維生素組合組 1 維生素A 維生素B1 維生素B2 維生素B6 維生素B12 2 維生素C 維生素B1 維生素D2 維生素E 煙酰胺 3 葉酸 維生素B2 維生素D2 膽堿 泛酸鈣 4 對氨基苯甲酸 維生素B6 維生素E 膽堿 肌醇 5 生物素 維生素B12 煙酰胺 泛酸鈣 肌醇 測定方法：缺陷型菌株和基本培養(yǎng)基混合制成平板，把5組或6組生長因子直接加于同一瓊脂平板上，或用濾紙片沾取后覆于瓊脂平板上，培養(yǎng)后，觀察哪一組或哪兩組區(qū)產生混濁生長圈，即可確定該菌株缺陷的生長因子. 如果要測定數(shù)十或上百個缺陷型菌株時，則可改成一個平皿中加入一種生長因子，制成平板，在翻轉平皿底部，幾十個方格子，把每株缺陷型按編號移接到瓊脂平板格子中.培養(yǎng)后，根據(jù)混濁圈出現(xiàn)情況，則可確定哪些缺陷型菌株是缺這種生長因子的. （二）、營養(yǎng)缺陷型菌株的應用 其在研究和實踐中都有極其重要的意義.它可作為研究代謝途徑和雜交、轉化、轉導、原生質體融合、質粒和轉座因子等遺傳規(guī)律所不可缺少的標記菌種；也可作為氨基酸、維生素、堿基等物質生物測定的實驗菌種；在生產中，可直接用作發(fā)酵生產核苷酸、氨基酸等代謝產物的生產菌株；也可作為菌種雜交、重組育種和利用基因工程進行育種時所不可缺少的帶有特定基因標記的親本菌株.

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