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- xinxin0106搜狐 2017-10-08 16:27:36
- 合理應(yīng)用抗生素,是指在正確選擇適應(yīng)癥的前提下確保安全、有效。然而,在一般情況下,大多數(shù)新開發(fā)的抗生素在若干年后都會(huì)因細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性而失去效力,而不正確的使用,更加快了耐藥菌的變異、生長(zhǎng)。臨床上,幾乎所有醫(yī)生都基本了解抗生素在應(yīng)用過(guò)程中可能出現(xiàn)的不良反應(yīng),如青霉素類的致敏性,氨基苷類的耳腎毒性;大環(huán)內(nèi)脂類的肝腎損害等等。雖然大家有意識(shí)地防止,但由于聯(lián)合用藥的日趨增多,預(yù)防用藥日趨廣泛,抗生素不良反應(yīng)發(fā)生率及耐藥性仍然逐年增加。 首先要掌握不同抗生素的KJ譜:各種抗生素都有不同的作用特點(diǎn),因此所選藥物的KJ譜務(wù)必須與所感染的細(xì)菌相適應(yīng)。例如青霉素主要對(duì)大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌和一些革蘭氏陰性菌有效,對(duì)青霉素高度敏感,故臨床上應(yīng)shou選青霉素;不能使用青霉素的患者應(yīng)選擇紅霉素或diyi代頭孢菌素。diyi、二、三代頭孢菌素的KJ作用也各有特點(diǎn),對(duì)金黃色葡萄球菌,diyi代頭孢菌素作用Z強(qiáng);第二代頭孢菌素次之;第三代頭孢菌素較弱;但對(duì)陰性桿菌的作用則三代頭孢菌素明顯超過(guò)第二代與diyi代。因此,如果金黃色葡萄球菌感染不應(yīng)首先第三代頭孢菌素,應(yīng)選shou選diyi代的頭孢噻吩或頭孢唑啉。 其二,根據(jù)致病菌的敏感性選擇抗生素:致病菌對(duì)抗生素的敏感性不是固定不變的,一些容易產(chǎn)生耐藥性的細(xì)菌如金黃色葡萄球萄、綠膿桿菌、大腸桿菌屬等近年對(duì)不少常用抗生素耐藥。有報(bào)道稱北京地區(qū)金黃色葡萄球菌對(duì)紅霉素的耐藥性高達(dá)60%~70%;紅霉素不能作為抗耐藥金葡菌的有效藥,而只能作為備用藥物;羧芐青霉素、磺芐青霉素等抗綠桿菌作用也因細(xì)菌的敏感度下降而被酰尿類青霉素(呋芐青霉素、苯咪唑青霉素和氧哌嗪青霉素等)所取代。因此,各種致病菌對(duì)不同KJ藥的敏感性不同,相同菌種不同菌株對(duì)同一種抗生素的敏感性也有差異,加上抗生素的廣泛使用,使細(xì)菌耐藥性逐年有所增加。 其三,根據(jù)疾病的感染規(guī)律及其嚴(yán)重程度選擇抗生素:嚴(yán)重感染、深部組織感染選擇KJ作用強(qiáng)、與組織濃度較高的抗生素。如早期金葡菌性敗菌癥,頭孢噻吩與頭孢唑啉都有效,但病程較長(zhǎng)者并已引起深度感染的金葡萄敗血癥,頭孢唑啉的抗感染LX明顯優(yōu)于頭孢噻吩,因?yàn)轭^孢唑啉的有效血濃度與組織濃度都比頭孢噻吩要高,半衰期也比較長(zhǎng),因此可深入深部感染部位;酰尿類青霉素不僅具有強(qiáng)大抗鏈球菌與綠膿桿菌的作用,而具具有有血濃度和組織濃度高、穿透力較強(qiáng)等特點(diǎn),對(duì)鏈球菌屬、綠膿桿菌引起的肺部感染、腎盂腎炎、亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎等有較好的LX。
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貼壁細(xì)胞培養(yǎng)箱設(shè)置參數(shù):確保實(shí)驗(yàn)與細(xì)胞生長(zhǎng)
在細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域,培養(yǎng)環(huán)境的控制至關(guān)重要,尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。貼壁細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中對(duì)溫度、濕度、二氧化碳濃度等多種環(huán)境因素要求非常嚴(yán)格。因此,如何設(shè)置細(xì)胞培養(yǎng)箱的相關(guān)參數(shù),直接影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)、分裂與實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。本文將詳細(xì)討論貼壁細(xì)胞培養(yǎng)箱的設(shè)置參數(shù),幫助科研人員優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
1. 溫度設(shè)置
貼壁細(xì)胞的正常生長(zhǎng)依賴于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)的穩(wěn)定溫度。一般而言,絕大多數(shù)哺乳動(dòng)物貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)溫度需要保持在37℃。溫度的波動(dòng)可能導(dǎo)致細(xì)胞的代謝活動(dòng)紊亂,影響細(xì)胞的增殖及形態(tài)。因此,培養(yǎng)箱的溫控系統(tǒng)必須能夠精確調(diào)節(jié)溫度,并避免溫度波動(dòng)。理想情況下,溫度控制精度應(yīng)達(dá)到±0.1℃,而溫度波動(dòng)應(yīng)控制在±0.5℃以內(nèi),以確保細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性。
2. 二氧化碳濃度
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,二氧化碳濃度對(duì)培養(yǎng)基的pH值有著直接影響,進(jìn)而影響細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。一般情況下,貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)箱應(yīng)設(shè)定二氧化碳濃度為5%。此濃度能夠保證培養(yǎng)基中碳酸氫鹽緩沖體系的穩(wěn)定,維持細(xì)胞生長(zhǎng)所需的pH環(huán)境。二氧化碳濃度偏離5%時(shí),pH值會(huì)發(fā)生變化,影響細(xì)胞的代謝過(guò)程和生理狀態(tài)。因此,培養(yǎng)箱應(yīng)具備精確的二氧化碳濃度調(diào)節(jié)功能,以確保實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。
3. 濕度控制
濕度是細(xì)胞培養(yǎng)中常常被忽視但卻至關(guān)重要的參數(shù)。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,濕度需要保持在90%以上,這有助于防止培養(yǎng)箱內(nèi)的培養(yǎng)液蒸發(fā),同時(shí)也避免因濕度過(guò)低而導(dǎo)致細(xì)胞干旱和變性。培養(yǎng)箱通常配備濕度控制系統(tǒng),通過(guò)水槽或蒸汽加濕裝置來(lái)維持適宜的濕度水平。高濕度可以確保培養(yǎng)箱內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,特別是在長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)的情況下,濕度控制尤為重要。
4. 氧氣濃度
盡管貼壁細(xì)胞主要依賴氧氣供給,但氧氣濃度的調(diào)節(jié)不像二氧化碳那樣常見。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō),培養(yǎng)箱內(nèi)的氧氣濃度應(yīng)與常規(guī)氣氛相似,約為20.9%。不過(guò),某些特定細(xì)胞類型(例如腫瘤細(xì)胞)可能需要更低的氧氣濃度(如5%或10%)以模擬低氧環(huán)境。因此,培養(yǎng)箱需要具備調(diào)節(jié)氧氣濃度的功能,以適應(yīng)不同細(xì)胞的生長(zhǎng)需求。
5. 其他參數(shù)
除了上述基本的溫度、二氧化碳、濕度和氧氣濃度外,細(xì)胞培養(yǎng)箱的其他功能也應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行配置。例如,培養(yǎng)箱的空氣流通系統(tǒng)需確保氣流均勻,避免局部溫度和濕度的偏差,影響細(xì)胞的生長(zhǎng)條件。培養(yǎng)箱內(nèi)的照明系統(tǒng)、震蕩裝置等也應(yīng)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)的要求進(jìn)行合理配置。
6. 總結(jié)
貼壁細(xì)胞培養(yǎng)箱的設(shè)置直接關(guān)系到細(xì)胞培養(yǎng)的成敗。通過(guò)調(diào)控溫度、二氧化碳濃度、濕度和氧氣濃度等參數(shù),科研人員可以為細(xì)胞提供一個(gè)適宜的生長(zhǎng)環(huán)境,從而確保細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和 reproducibility??茖W(xué)合理的培養(yǎng)箱設(shè)置不僅能提升實(shí)驗(yàn)效果,也為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展提供了基礎(chǔ)保障。因此,在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中,嚴(yán)格按照細(xì)胞類型的要求調(diào)整培養(yǎng)箱參數(shù)是確保實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵一步。
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