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問(wèn)答社區(qū)

從動(dòng)物組織中擴(kuò)增基因是提取dna還是rna

468173469 2016-09-09 17:27:25 586  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • 敏姐是個(gè)好人0 2016-09-10 00:00:00
    DNA(PCR)只能證明有這個(gè)基因,不能證明這個(gè)基因表達(dá)與否,只有RNA(RT-PCR)才能看出基因表達(dá)與否。二者排列組合可以出現(xiàn)3種情況:(1)DNA與RNA都陽(yáng)性,說(shuō)明有這個(gè)基因,并且目前表達(dá)。(2)DNA陽(yáng)性,RNA陰性,說(shuō)明有這個(gè)基因但目前不表達(dá)。(3)DNA陰性(不應(yīng)寫(xiě)成“DNA表達(dá)陰性”)而RNA表達(dá)陽(yáng)性,如果做的是哺乳動(dòng)物組織標(biāo)本應(yīng)該是不會(huì)出現(xiàn)的。但其他標(biāo)本可能不一定。如病毒就有分DNA病毒和RNA病毒。一般來(lái)說(shuō),看哺乳動(dòng)物組織標(biāo)本某種基因是否表達(dá),應(yīng)該提取RNA來(lái)做。   除以上講的外。在研究遺傳病時(shí),DNA與RNA都做可以起到互相驗(yàn)證的作用。如分析一個(gè)病人某基因DNA,發(fā)現(xiàn)某個(gè)外顯子中有一個(gè)堿基發(fā)生點(diǎn)突變,可以使蛋白質(zhì)的氨基酸改變或者形成提前終止密碼子等??梢栽偬崛NA,查查mRNA是不是有同樣的結(jié)果。這里提示一下,人體RNA一般是沒(méi)有內(nèi)含子的。這在小基因不重要。如果是有很多外顯子的大基因(很難用一個(gè)PCR擴(kuò)出整個(gè)基因),查其中某個(gè)外顯子DNA有沒(méi)有突變,引物常設(shè)計(jì)在該外顯子兩端的內(nèi)含子中。而查RNA時(shí),引物是設(shè)計(jì)在該外顯子兩側(cè)的外顯子上,當(dāng)然也可以在幾個(gè)相連外顯子片段的兩側(cè)甚至包含整個(gè)RNA,這樣擴(kuò)增片段就大一些。 謝謝采納

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