老年犬貓的麻醉(下)∣文獻分享
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上篇文章分享了老年犬貓的生理變化,今天我們一起來看老年犬貓的麻醉方法。
1.麻醉前評估
麻醉前評估是整個麻醉方案的重要組成部分。完整的患者病史調查和體格檢查、臨床病理評估等對制定麻醉方案很關鍵。
考慮到有些藥物會與麻醉劑相互作用,老年動物若正在使用ZL關節(jié)炎,心臟病,內分泌失調或其他異常的相關藥物。建議麻醉前參考最 新的CF或進行全面調查。參考示例:
對于接受ACEYZ劑,鈣通道阻滯劑或匹 莫 苯 類藥物ZL心臟病的動物,應避免使用乙 酰 丙 嗪 作為術前用藥。醋 丙 嗪會增強血管舒張作用,引起嚴重的低血壓。
接受地 高 辛的患者在麻醉下更有可能患心律不齊,需要避免使用任何促進心律不齊的藥物,例如賽 拉 嗪,阿 托 品,氟 烷。
對于正在接受用于關節(jié)炎的長期非甾體類KY藥(NSAIDs)的患者,在手術后不應接受完整的NSAIDs術后劑量。NSAIDs絕不能與類固醇同時使用。
2. 液體療法
老年患寵應跟年輕動物一樣禁食,但在用藥前(麻醉前15-20分鐘)才能禁水,因為很多老年動物都有一定程度的多飲多尿,這樣有助于防止 脫水。犬貓的血漿尿素升高之前,腎功能已喪失了75%。麻醉期間,請選擇適合患寵情況的液體輸注-通常是乳酸林格氏液,但如果動物患有心臟病,應使用低鈉液體。動物如果沒有臨床脫水,麻醉和恢復過程中,以5-10 ml / kg /h的速度進行液體輸注即可。麻醉后應繼續(xù)進行液體支持,直到動物進食和飲水充足為止。
3.預吸氧
老年患寵在麻醉前3-5min內,可通過面罩給氧或“流動”吸氧(將氧氣源保持在鼻子/嘴附近)。如果動物可耐受面罩吸氧,優(yōu)先選擇面罩方式。
注意:給動物預充氧前,用氧氣沖洗面罩或呼吸系統(tǒng),以清除麻醉劑。
4.麻醉方法
(1)術前用藥和鎮(zhèn)靜
術前用藥是為了減輕患寵的壓力、減少麻醉誘導劑及維持麻醉劑的劑量、超前鎮(zhèn)痛及提高蘇醒質量。對于老年患寵,應使用低劑量的輕度鎮(zhèn)靜藥物,而不是引起深度的鎮(zhèn)靜作用。低劑量的乙 酰 丙 嗪(0.01-0.02 mg / kg IM)適合許多沒有明顯心血管疾病的患寵。苯 二 氮 ? 類藥物(咪 達 唑 侖0.2 mg / kg IM/IV,或地 西 泮 0.2 mg / kg IV)在年輕的動物中鎮(zhèn)靜效果較差,通常對老年患者具有輕度至良好的鎮(zhèn)靜作用,且對心血管和呼吸系統(tǒng)的副作用極小。由于存在醫(yī)源性肝衰竭的風險,貓應避免口服地 西 泮。將醋 丙 嗪 或苯 二 氮 ?類與阿 片類藥物聯(lián)合使用可增加鎮(zhèn)靜作用,提供超前鎮(zhèn)痛。超前鎮(zhèn)痛可以減少交感神經(jīng)刺激,心率,心肌需氧量和心律不齊的風險,對患寵十分有益。
嗎 啡,哌 替 啶,丁 丙 諾 啡和布 托 啡 諾 是犬貓中最常用的阿 片類藥物,效果對比見下表。
嗎 啡是最 有效的鎮(zhèn)痛藥,也是一種很好的鎮(zhèn)靜劑,推薦用于大手術動物。
丁 丙 諾 啡的作用時間最長,也是一種良好的鎮(zhèn)靜劑,適用于中度緩解疼痛,尤其是在貓中。
布 托 啡 諾是短效藥,鎮(zhèn)痛作用差,但它是一種出色的ZK藥和鎮(zhèn)靜劑。
哌 替 啶雖然短暫但鎮(zhèn)痛作用卻很好,與其他藥物合用時,鎮(zhèn)靜作用中等。
常規(guī)術前用藥應避免使用阿 托 品和其他抗膽堿能藥物,因為大多數(shù)老年患者已經(jīng)具有較高的靜息心率。α2-激動劑(例如,賽 拉 嗪和美 托 咪 定)產(chǎn)生一系列心血管效應,包括心動過緩,心律不齊,高血壓和低血壓以及血管收縮,這些心血管變化對于心血管和/或腎臟儲備不良的老年患者而言不易耐受。除非使用非常低的劑量(例如2μg/ kg美 托 咪 定),否則避免使用。
(2)誘導麻醉
硫 噴 妥 鈉和丙 泊 酚可用于誘導麻醉。在老年患者中,丙 泊 酚(1-3 mg / kg IV,已進行術前用藥)相對于硫 噴 妥 鈉可以緩慢地給予而不會引起患寵興奮或心律失常,且動物恢復較快。但丙 泊 酚引起的呼吸、心血管YZ與硫噴妥鈉一樣(因此預吸氧是有益的)。丙 泊 酚最多兩分鐘完全發(fā)揮作用,不要過增量給藥。此外,丙 泊 酚可能在某些患者中引起抽搐20-30min,會讓外科手術變得困難。
其他誘導方法:
地 西 泮(或咪 達 唑 侖)(0.25 mg / kg IV)和氯 胺 酮(5 mg / kg IV):適合于許多老年動物的誘導麻醉,既往存在心動過速,肥厚型心肌病,頭部外傷或進行眼內手術的患寵除外。在注射器中混合等量的兩種藥物,1ml/10kg IV, 緩慢增加劑量,直到可以插管為止,該組合最 多2分鐘完全發(fā)揮作用。
咪 達 唑 侖(0.2 mg / kg IV)和芬 太 尼(5-10μg/ kg IV):可用于重癥患寵的麻醉誘導,但這種組合通常需要在麻醉誘導后立即進行間歇性正壓通氣。
氣體麻醉下的面罩誘導對老年患寵有壓力,并會加劇環(huán)境污染,最 好避免。在老年動物中,應避免賽 拉 嗪(或美 托 咪 定)和氯 胺 酮的肌肉內組合,因為α2-激動劑藥物對心血管的嚴重影響以及誘導時間的延長會導致低氧血癥。當在無法進行藥物前ZL的情況下,丙 泊 酚和地 西 泮(或咪 達 唑 侖)可以用作聯(lián)合誘導劑,在患病或年老的患寵中誘導麻醉。具體誘導過程為:
預吸氧3-5min。
緩慢注射丙 泊 酚(1 mg / kg IV)。
等待1分鐘。
給予地西 泮 /咪 達 唑 侖(0.2 mg / kg IV)。
等待1分鐘。
緩慢注射更多的丙 泊 酚,直至可以插管。
(3)維持麻醉
使用異 氟 烷維持麻醉。異 氟 烷會引起血管舒張,對于體積與心輸出量和灌注壓力有關的患者,必須提供足夠的液體療法。
七 氟 烷在心臟和呼吸方面的作用與異 氟 烷非常相似,不同之處在于誘導和恢復速更快。
無論選擇哪種方法來維持麻醉,補氧都必不可少。
(4)鎮(zhèn)痛
疼痛對老年患寵尤其有害,它會增加心率和血壓,從而增加心肌需氧量及心律不齊的發(fā)生率。阿 片類藥物嗎 啡ZL這類的心律不齊非常有效,它可減慢心率,從而改善冠狀動脈血流量。此外,嗎 啡對心肌收縮力的影響極小。高劑量(> 0.4 mg / kg)可能會導致心動過緩,可通過合理使用抗膽堿藥物預防。
非甾體KY藥是有效的鎮(zhèn)痛藥,如果沒有使用禁忌癥,如腎功能或肝功能不良、胃腸疾病或同時使用類固醇,可用于老年犬貓。它對腎臟和/或胃腸道都有潛在的毒性,而且大多數(shù)要經(jīng)歷肝臟的代謝。美洛 昔 康和卡 洛 芬對腎臟和胃腸道的副作用更小,用于老年患寵更安全。
多模式鎮(zhèn)痛,通過聯(lián)合使用不同作用模式的藥物,作用于不同受體和“疼痛通路”的不同部位來緩解疼痛。例如,阿 片類藥物,NSAIDS,局麻藥和氯 胺 酮均具有不同的作用方式,可同時用于給劇烈疼痛的患寵提供鎮(zhèn)痛作用。
(5)圍手術期液體療法
所有的老年患寵都應在麻醉期間接受靜脈輸液ZL,直到能充分進食和飲水(通常是術后幾個小時)。一般來說,乳 酸 林 格液是最常用的液體,可按5- 10ml /kg/hr給藥,以維持正常血壓和足夠的排尿量;心臟病患者的液體給藥速率應該降低。
(6)維持體溫和恢復
老年患寵發(fā)生低體溫的風險更大。體溫過低會導致心血管和呼吸YZ,并延遲藥物的代謝、麻醉后的恢復和傷口愈合?;紝欘澏稌黾踊謴推诘男柩趿浚绻柩趿坎荒軡M足,通常會出現(xiàn)心律不齊。麻醉時間應盡量縮短,同時保持溫暖。所有康復的老年患寵均應補充氧氣并接受密切監(jiān)測,直至其保護性咽反射恢復。
5.麻醉預后
麻醉后,老年患寵出現(xiàn)以下癥狀的風險更高:
低氧血癥和高碳酸血癥。
脫水,低血容量,低血壓和組織灌注不良。
心律失常。
體溫過低。
藥物作用延長,麻醉后恢復延遲。
藥物不良反應。
壓力。
以下建議可減少老年患者并發(fā)癥的發(fā)生率,改善全身麻醉的預后:
進行足夠的麻醉前檢查和測試,發(fā)現(xiàn)潛在疾病。
麻醉前穩(wěn)定患者體況。
盡量縮短麻醉時間。
減少所有藥物的劑量。
使用以下藥物:
-導致輕微的心臟YZ,例如苯 二 氮 ?類藥物。
-可被拮抗,例如苯 二 氮 ?類藥物和阿 片類藥物。
-作用時間短,例如丙 泊 酚。
避免在老年動物中使用過量的鎮(zhèn)靜劑。
盡量避免使用α2激動劑,它們對老年患者的心血管影響不太有利。如果不得不用,劑量應盡量低。與阿 片類藥物合并使用,可實現(xiàn)快速逆轉。
提供足夠的靜脈輸液以維持正常的水合、血壓和腎功能。
術前,術中和術后均須補充氧氣,因為老年患者發(fā)生低氧血癥的風險增加。
密切監(jiān)視患者,保持以下各項生理指標在正常范圍內:
-保持平均血壓高于70 mmHg或收縮壓大于90-100 mmHg。
-血紅蛋白飽和度至少應為95%。
-呼氣末二氧化碳的正常值為(40±5 mmHg)。
-在高?;颊咧?,監(jiān)測尿量并保持在1-2 ml / kg / hr。
通過手動通氣或機械通風來支持呼吸。
使用足夠的鎮(zhèn)痛劑,尤其是阿 片類藥物。
不要在未檢查腎和肝功能的情況下使用NSAIDs,也不要將它們與類固醇同時使用??紤]使用其他止痛技術,例如局部麻醉劑。
維持患寵體溫。
6.總結
年齡本身并不是麻醉的禁忌癥,與年齡有關的疾病使麻醉更具挑戰(zhàn)性。徹底的術前評估,謹慎選擇麻醉和鎮(zhèn)痛方案,持續(xù)仔細監(jiān)測和細心護理,將提高老年患者手術成功的可能性。
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上篇文章分享了老年犬貓的生理變化,今天我們一起來看老年犬貓的麻醉方法。
1.麻醉前評估
麻醉前評估是整個麻醉方案的重要組成部分。完整的患者病史調查和體格檢查、臨床病理評估等對制定麻醉方案很關鍵。
考慮到有些藥物會與麻醉劑相互作用,老年動物若正在使用ZL關節(jié)炎,心臟病,內分泌失調或其他異常的相關藥物。建議麻醉前參考最 新的CF或進行全面調查。參考示例:
對于接受ACEYZ劑,鈣通道阻滯劑或匹 莫 苯 類藥物ZL心臟病的動物,應避免使用乙 酰 丙 嗪 作為術前用藥。醋 丙 嗪會增強血管舒張作用,引起嚴重的低血壓。
接受地 高 辛的患者在麻醉下更有可能患心律不齊,需要避免使用任何促進心律不齊的藥物,例如賽 拉 嗪,阿 托 品,氟 烷。
對于正在接受用于關節(jié)炎的長期非甾體類KY藥(NSAIDs)的患者,在手術后不應接受完整的NSAIDs術后劑量。NSAIDs絕不能與類固醇同時使用。
2. 液體療法
老年患寵應跟年輕動物一樣禁食,但在用藥前(麻醉前15-20分鐘)才能禁水,因為很多老年動物都有一定程度的多飲多尿,這樣有助于防止 脫水。犬貓的血漿尿素升高之前,腎功能已喪失了75%。麻醉期間,請選擇適合患寵情況的液體輸注-通常是乳酸林格氏液,但如果動物患有心臟病,應使用低鈉液體。動物如果沒有臨床脫水,麻醉和恢復過程中,以5-10 ml / kg /h的速度進行液體輸注即可。麻醉后應繼續(xù)進行液體支持,直到動物進食和飲水充足為止。
3.預吸氧
老年患寵在麻醉前3-5min內,可通過面罩給氧或“流動”吸氧(將氧氣源保持在鼻子/嘴附近)。如果動物可耐受面罩吸氧,優(yōu)先選擇面罩方式。
注意:給動物預充氧前,用氧氣沖洗面罩或呼吸系統(tǒng),以清除麻醉劑。
4.麻醉方法
(1)術前用藥和鎮(zhèn)靜
術前用藥是為了減輕患寵的壓力、減少麻醉誘導劑及維持麻醉劑的劑量、超前鎮(zhèn)痛及提高蘇醒質量。對于老年患寵,應使用低劑量的輕度鎮(zhèn)靜藥物,而不是引起深度的鎮(zhèn)靜作用。低劑量的乙 酰 丙 嗪(0.01-0.02 mg / kg IM)適合許多沒有明顯心血管疾病的患寵。苯 二 氮 ? 類藥物(咪 達 唑 侖0.2 mg / kg IM/IV,或地 西 泮 0.2 mg / kg IV)在年輕的動物中鎮(zhèn)靜效果較差,通常對老年患者具有輕度至良好的鎮(zhèn)靜作用,且對心血管和呼吸系統(tǒng)的副作用極小。由于存在醫(yī)源性肝衰竭的風險,貓應避免口服地 西 泮。將醋 丙 嗪 或苯 二 氮 ?類與阿 片類藥物聯(lián)合使用可增加鎮(zhèn)靜作用,提供超前鎮(zhèn)痛。超前鎮(zhèn)痛可以減少交感神經(jīng)刺激,心率,心肌需氧量和心律不齊的風險,對患寵十分有益。
嗎 啡,哌 替 啶,丁 丙 諾 啡和布 托 啡 諾 是犬貓中最常用的阿 片類藥物,效果對比見下表。
嗎 啡是最 有效的鎮(zhèn)痛藥,也是一種很好的鎮(zhèn)靜劑,推薦用于大手術動物。
丁 丙 諾 啡的作用時間最長,也是一種良好的鎮(zhèn)靜劑,適用于中度緩解疼痛,尤其是在貓中。
布 托 啡 諾是短效藥,鎮(zhèn)痛作用差,但它是一種出色的ZK藥和鎮(zhèn)靜劑。
哌 替 啶雖然短暫但鎮(zhèn)痛作用卻很好,與其他藥物合用時,鎮(zhèn)靜作用中等。
常規(guī)術前用藥應避免使用阿 托 品和其他抗膽堿能藥物,因為大多數(shù)老年患者已經(jīng)具有較高的靜息心率。α2-激動劑(例如,賽 拉 嗪和美 托 咪 定)產(chǎn)生一系列心血管效應,包括心動過緩,心律不齊,高血壓和低血壓以及血管收縮,這些心血管變化對于心血管和/或腎臟儲備不良的老年患者而言不易耐受。除非使用非常低的劑量(例如2μg/ kg美 托 咪 定),否則避免使用。
(2)誘導麻醉
硫 噴 妥 鈉和丙 泊 酚可用于誘導麻醉。在老年患者中,丙 泊 酚(1-3 mg / kg IV,已進行術前用藥)相對于硫 噴 妥 鈉可以緩慢地給予而不會引起患寵興奮或心律失常,且動物恢復較快。但丙 泊 酚引起的呼吸、心血管YZ與硫噴妥鈉一樣(因此預吸氧是有益的)。丙 泊 酚最多兩分鐘完全發(fā)揮作用,不要過增量給藥。此外,丙 泊 酚可能在某些患者中引起抽搐20-30min,會讓外科手術變得困難。
其他誘導方法:
地 西 泮(或咪 達 唑 侖)(0.25 mg / kg IV)和氯 胺 酮(5 mg / kg IV):適合于許多老年動物的誘導麻醉,既往存在心動過速,肥厚型心肌病,頭部外傷或進行眼內手術的患寵除外。在注射器中混合等量的兩種藥物,1ml/10kg IV, 緩慢增加劑量,直到可以插管為止,該組合最 多2分鐘完全發(fā)揮作用。
咪 達 唑 侖(0.2 mg / kg IV)和芬 太 尼(5-10μg/ kg IV):可用于重癥患寵的麻醉誘導,但這種組合通常需要在麻醉誘導后立即進行間歇性正壓通氣。
氣體麻醉下的面罩誘導對老年患寵有壓力,并會加劇環(huán)境污染,最 好避免。在老年動物中,應避免賽 拉 嗪(或美 托 咪 定)和氯 胺 酮的肌肉內組合,因為α2-激動劑藥物對心血管的嚴重影響以及誘導時間的延長會導致低氧血癥。當在無法進行藥物前ZL的情況下,丙 泊 酚和地 西 泮(或咪 達 唑 侖)可以用作聯(lián)合誘導劑,在患病或年老的患寵中誘導麻醉。具體誘導過程為:
預吸氧3-5min。
緩慢注射丙 泊 酚(1 mg / kg IV)。
等待1分鐘。
給予地西 泮 /咪 達 唑 侖(0.2 mg / kg IV)。
等待1分鐘。
緩慢注射更多的丙 泊 酚,直至可以插管。
(3)維持麻醉
使用異 氟 烷維持麻醉。異 氟 烷會引起血管舒張,對于體積與心輸出量和灌注壓力有關的患者,必須提供足夠的液體療法。
七 氟 烷在心臟和呼吸方面的作用與異 氟 烷非常相似,不同之處在于誘導和恢復速更快。
無論選擇哪種方法來維持麻醉,補氧都必不可少。
(4)鎮(zhèn)痛
疼痛對老年患寵尤其有害,它會增加心率和血壓,從而增加心肌需氧量及心律不齊的發(fā)生率。阿 片類藥物嗎 啡ZL這類的心律不齊非常有效,它可減慢心率,從而改善冠狀動脈血流量。此外,嗎 啡對心肌收縮力的影響極小。高劑量(> 0.4 mg / kg)可能會導致心動過緩,可通過合理使用抗膽堿藥物預防。
非甾體KY藥是有效的鎮(zhèn)痛藥,如果沒有使用禁忌癥,如腎功能或肝功能不良、胃腸疾病或同時使用類固醇,可用于老年犬貓。它對腎臟和/或胃腸道都有潛在的毒性,而且大多數(shù)要經(jīng)歷肝臟的代謝。美洛 昔 康和卡 洛 芬對腎臟和胃腸道的副作用更小,用于老年患寵更安全。
多模式鎮(zhèn)痛,通過聯(lián)合使用不同作用模式的藥物,作用于不同受體和“疼痛通路”的不同部位來緩解疼痛。例如,阿 片類藥物,NSAIDS,局麻藥和氯 胺 酮均具有不同的作用方式,可同時用于給劇烈疼痛的患寵提供鎮(zhèn)痛作用。
(5)圍手術期液體療法
所有的老年患寵都應在麻醉期間接受靜脈輸液ZL,直到能充分進食和飲水(通常是術后幾個小時)。一般來說,乳 酸 林 格液是最常用的液體,可按5- 10ml /kg/hr給藥,以維持正常血壓和足夠的排尿量;心臟病患者的液體給藥速率應該降低。
(6)維持體溫和恢復
老年患寵發(fā)生低體溫的風險更大。體溫過低會導致心血管和呼吸YZ,并延遲藥物的代謝、麻醉后的恢復和傷口愈合。患寵顫抖會增加恢復期的需氧量,如果需氧量不能滿足,通常會出現(xiàn)心律不齊。麻醉時間應盡量縮短,同時保持溫暖。所有康復的老年患寵均應補充氧氣并接受密切監(jiān)測,直至其保護性咽反射恢復。
5.麻醉預后
麻醉后,老年患寵出現(xiàn)以下癥狀的風險更高:
低氧血癥和高碳酸血癥。
脫水,低血容量,低血壓和組織灌注不良。
心律失常。
體溫過低。
藥物作用延長,麻醉后恢復延遲。
藥物不良反應。
壓力。
以下建議可減少老年患者并發(fā)癥的發(fā)生率,改善全身麻醉的預后:
進行足夠的麻醉前檢查和測試,發(fā)現(xiàn)潛在疾病。
麻醉前穩(wěn)定患者體況。
盡量縮短麻醉時間。
減少所有藥物的劑量。
使用以下藥物:
-導致輕微的心臟YZ,例如苯 二 氮 ?類藥物。
-可被拮抗,例如苯 二 氮 ?類藥物和阿 片類藥物。
-作用時間短,例如丙 泊 酚。
避免在老年動物中使用過量的鎮(zhèn)靜劑。
盡量避免使用α2激動劑,它們對老年患者的心血管影響不太有利。如果不得不用,劑量應盡量低。與阿 片類藥物合并使用,可實現(xiàn)快速逆轉。
提供足夠的靜脈輸液以維持正常的水合、血壓和腎功能。
術前,術中和術后均須補充氧氣,因為老年患者發(fā)生低氧血癥的風險增加。
密切監(jiān)視患者,保持以下各項生理指標在正常范圍內:
-保持平均血壓高于70 mmHg或收縮壓大于90-100 mmHg。
-血紅蛋白飽和度至少應為95%。
-呼氣末二氧化碳的正常值為(40±5 mmHg)。
-在高?;颊咧?,監(jiān)測尿量并保持在1-2 ml / kg / hr。
通過手動通氣或機械通風來支持呼吸。
使用足夠的鎮(zhèn)痛劑,尤其是阿 片類藥物。
不要在未檢查腎和肝功能的情況下使用NSAIDs,也不要將它們與類固醇同時使用??紤]使用其他止痛技術,例如局部麻醉劑。
維持患寵體溫。
6.總結
年齡本身并不是麻醉的禁忌癥,與年齡有關的疾病使麻醉更具挑戰(zhàn)性。徹底的術前評估,謹慎選擇麻醉和鎮(zhèn)痛方案,持續(xù)仔細監(jiān)測和細心護理,將提高老年患者手術成功的可能性。
*文獻來源
- 麻醉氧氣面罩的麻醉原理是什么?
- 有多少額度,分享下
- 文獻分享 | Echo Revolve在骨骼肌挫傷修復研究中
近日在《Stem Cells and Development》期刊雜志上發(fā)表題為《Bone Marrow Stromal Cell-Derived Exosomes promote muscle healing following contusion through macrophage polarization》的文章。在這項研究中,使用梯度離心從BMSC的上清液中分離和純化外泌體。納米粒子跟蹤分析,透射電子顯微鏡和蛋白質印跡被用來鑒定外泌體。使用ECHO正倒置一體熒光顯微鏡對HE染色,Masson染色和免疫熒光的肌肉樣本進行成像。ZH得到的結論:BMSC-Exos通過改變巨噬細胞的極化狀態(tài)YZ炎癥反應,減輕了小鼠的肌肉挫傷損傷并促進了肌肉的愈合。
背景介紹:
骨骼肌挫傷是運動醫(yī)學和臨床最常見的損傷之一。由于挫傷后局部纖維化形成,受傷的肌肉很容易再次受傷,骨骼肌纖維化被證明與損傷初期的過度炎癥反應有關,而與炎癥浸潤密切相關的巨噬細胞被發(fā)現(xiàn)在骨骼肌的愈合過程中起著至關重要的作用。如何調節(jié)巨噬細胞極化仍然是肌肉愈合的重要問題。
最近的研究表明,骨sui基質細胞源性外泌體(BMSC-Exos)可以影響炎癥和組織恢復。因此,作者假設BMSC-Exos可以通過影響巨噬細胞極化來下調炎癥反應,從而促進挫傷后骨骼肌的愈合。在這項研究中,作者從BMSC中分離了BMSC-Exos,在體內和體外測試了它們的功能,并研究了BMSC-Exos對巨噬細胞免疫調節(jié)和肌肉愈合影響的潛在機制。
實驗方法:
通過粒度分析、透射電鏡和Western Blot方法鑒定外泌體,為了檢查靶蛋白的表達和位置,在TA(脛前?。┣衅线M行了免疫熒光染色。使用的一抗是抗CD206,抗α-SMA,抗MyoD和抗Pax7,DAPI用于定位細胞核,通過熒光顯微鏡(ECHO Revolve,美國)觀察圖像。
結果:
總體外觀,相對重量,形態(tài)特征:挫傷損傷后3d,挫傷組的TA肌肉比BMSC-Exos組的肌肉血腫更大(圖3A)。兩組之間在第三天,TA肌肉的相對肌肉重量也顯著不同,挫傷組的TA肌肉較重(圖3B)。
對于HE染色,在陰性對照組中,肌肉纖維規(guī)則且密集地排列。但是,在挫傷組中,隨著時間的流逝,肌肉纖維變得越來越分散,許多增殖的膠原纖維占據(jù)了肌肉纖維的空間,這些現(xiàn)象在BMSC-Exos組中得到了改善。Masson染色中,在挫傷組中觀察到大量膠原纖維,而BMSC-ExosZL在所有時間點均顯著減少了纖維化區(qū)域(圖3C-D)。
此外,為了進一步檢查纖維化狀況,作者對平滑肌肌動蛋白α(α-SMA)進行了免疫熒光染色。形態(tài)學結果表明,BMSC-ExosZL顯著降低了挫傷在不同時間點引起的高蛋白表達和α-SMA的廣泛分布(圖4)。巨噬細胞耗竭后,BMSC-Exos的抗纖維化作用受到YZ,挫傷和BMSC-ExosZL組在第14天均觀察到大的纖維化區(qū)域和廣泛分布的α-SMA蛋白。
為了確定衛(wèi)星細胞的不同成肌狀態(tài),進行了Pax7和MyoD的共定位。形態(tài)上,從受傷后3天開始,總的Pax7 + / MyoD +衛(wèi)星細胞顯著增加。顯然,BMSC-ExosZL組的數(shù)量多于挫傷組和陰性對照組。在三個不同的組中,相對的Myod蛋白表達也呈現(xiàn)出類似的趨勢(圖5D)。綜上所述,BMSC-Exos注射液可在早期促進肌肉再生。
結論:
研究表明局部使用BMSC-Exos可以減少挫傷后的纖維化組織,增強肌肉再生并改善骨骼肌的生物力學特性。BMSC-Exos通過促進M2巨噬細胞極化,YZ了受傷肌肉的炎性微環(huán)境。作者的研究為BMSC-Exos在臨床實踐中可用于肌肉愈合提供了有力的支持。
Revolve正倒置一體顯微鏡
Revolve展現(xiàn)了其非凡的靈活性,可以輕松地實現(xiàn)正置和倒置顯微鏡轉換,創(chuàng)新性地把正倒置顯微鏡合二為一,開啟了顯微鏡Hybrid時代。
? 視網(wǎng)膜屏顯示技術:比擬目鏡人眼觀察效果。
? 全視野觀察:更清晰,更方便。
? 多通道熒光:多達4個EPI熒光通道,無須暗室,就可以輕松快速地完成多色熒光顯微分析。
? 自動化操作:通過iPad Pro點觸操控相機及熒光通道之間的切換,實現(xiàn)了完全自動化操作。
? App應用軟件:基于IOS的Echo App是與Apple團隊合作研發(fā)的專業(yè)顯微鏡軟件。
? 精湛的工藝盡顯高端品質:實現(xiàn)非凡的性能。
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