免疫技術(shù)中競(jìng)爭(zhēng)法可以測(cè)大分子抗原嗎?
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臨床免疫學(xué)中有很多方法可以檢測(cè)抗原抗體,書(shū)上說(shuō)競(jìng)爭(zhēng)法主要用于檢測(cè)小分子抗原,那么它可以檢測(cè)大分子抗原嗎?
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- 卟簡(jiǎn)灬單 2009-12-08 00:00:00
- 可以的 因?yàn)镋LISA中有一種方法是競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體,一般的抗原應(yīng)該沒(méi)有抗體大吧IgG有15KD的,但是個(gè)人感覺(jué)就好像你拿1000ul的移液器去吸取0.5ul一樣,準(zhǔn)確率不敢保證,原理上來(lái)說(shuō)是沒(méi)問(wèn)題的,下例: 抗體的測(cè)定一般不使用競(jìng)爭(zhēng)法。當(dāng)抗原中雜質(zhì)難以去除或抗原的結(jié)合特異性不穩(wěn)定時(shí),可采用這種模式測(cè)定抗體。如乙型肝炎病毒核心抗體(HBcAb)和乙型肝炎病毒e抗體(HBe•Ab)的測(cè)定,由于e抗原較核心抗原僅多29個(gè)氨基酸,e抗原很容易轉(zhuǎn)變?yōu)楹诵目乖?,因此,HBcAb和HBeAb的測(cè)定均采用競(jìng)爭(zhēng)法。但其測(cè)定具體模式有區(qū)別。
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- hdpslin02 2017-09-13 16:57:06
- 可以的 因?yàn)镋LISA中有一種方法是競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體,一般的抗原應(yīng)該沒(méi)有抗體大吧IgG有15KD的,但是個(gè)人感覺(jué)就好像你拿1000ul的移液器去吸取0.5ul一樣,準(zhǔn)確率不敢保證,原理上來(lái)說(shuō)是沒(méi)問(wèn)題的. 競(jìng)爭(zhēng)法可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。以測(cè)定抗原為例,受檢抗原和酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合,因此結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量呈反比。 操作步驟如下: ⑴將特異抗體與固相載體連接,形成固相抗體。洗滌。 ⑵待測(cè)管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液,使之與固相抗體反應(yīng)。如受檢標(biāo)本中無(wú)抗原,則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。如受檢標(biāo)本中含有抗原,則與酶標(biāo)抗原以同樣的機(jī)會(huì)與固相抗體結(jié)合,競(jìng)爭(zhēng)性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合的機(jī)會(huì),使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標(biāo)抗原,保溫后,酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合可達(dá)Z充分的量。洗滌。 ⑶加底物顯色:參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原Z多,故顏色Z深。參考管顏色深度與待測(cè)管顏色深度之差,代表受檢標(biāo)本抗原的量。待測(cè)管顏色越淡,表示標(biāo)本中抗原含量越多。
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