參與評(píng)論

評(píng)論

登錄后參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

• 

  孫思遠(yuǎn)孫思思 2016-07-06 00:00:00

  一、涂片前準(zhǔn)備工作及涂片方法 1、涂片前準(zhǔn)備工作 （1）保證標(biāo)本新鮮，取材后盡快制片。 （2）涂片操作要輕巧，避免擠壓以防止損傷細(xì)胞。涂片要均勻，厚薄要適度，太厚細(xì)胞堆疊，太薄細(xì)胞過少，均影響診斷。 （3）玻片要清潔無油漬，先用硫酸洗滌液浸泡沖洗，再用75%乙酸浸泡。 （4）含蛋白質(zhì)的標(biāo)本可直接涂片，缺乏蛋白質(zhì)的標(biāo)本，涂片前先在玻片上涂薄層粘附劑，以防止染色時(shí)細(xì)胞脫落，常用粘附劑為蛋白甘油，由等量生雞蛋蛋白和甘油混合而成。 （5）每位患者的標(biāo)本至少涂兩張玻片，以避免漏診。涂片后立即在玻片一端標(biāo)上編號(hào)。 2、涂片制備方法 （1）推片法：用于稀薄的標(biāo)本，如：血液、胸、腹水等。取離心后標(biāo)本一小滴滴在玻片偏右側(cè)端，推片用30度夾角將玻片上檢液輕輕向左推。 （2）涂抹法：適用于稍稠的檢液，如：鼻咽部標(biāo)本。用竹棉簽在玻片上涂布，由玻片ZX經(jīng)順時(shí)針方向外轉(zhuǎn)圈勻抹；或從玻片一端開始平行涂抹，涂抹要均勻，不宜重復(fù)。 （3）壓拉涂片法：將標(biāo)本夾于橫豎交叉的兩張玻片之間，然后移動(dòng)兩張玻片，使之重疊，再邊壓邊拉，獲得兩張涂片。該法適用于較粘稠標(biāo)本，如：痰液。 （4）吸管推片法：用滴管將標(biāo)本滴在玻片一端，然后將滴管前端平行置于標(biāo)本滴上，平行向另一端均速移動(dòng)滴管即可推出均勻薄膜。此法亦適用于胸、腹水標(biāo)本。 （5）噴射法：用配細(xì)針頭的注射器將標(biāo)本從左至右反復(fù)均勻地噴射在玻片上，此法適用于各種吸取的液體標(biāo)本。 （6）印片法：將切取的病變組織用手術(shù)刀切開，立即將切面平放在玻片上，輕輕按印。此方法為活體組織檢查的輔助方法。 二、涂片的固定 固定（fication）的目的是保持細(xì)胞自然形態(tài)，防止細(xì)胞自溶和細(xì)菌所致的腐敗；固定液能沉淀和凝固細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)和破壞細(xì)胞內(nèi)溶酶體酶，使細(xì)胞不但保持自然形態(tài)，而且結(jié)構(gòu)清晰，易于著色。因此標(biāo)本愈新鮮，固定愈及時(shí)，細(xì)胞結(jié)構(gòu)愈清晰，染色效果愈好。 1、固定液：細(xì)胞學(xué)檢查常用的固定液有下列三種：diyi種酒清固定液：該固定液滲透明性較強(qiáng)，固定效果好，適用于一般細(xì)胞學(xué)常規(guī)染色；第二種是氯仿酒精固定液：又稱卡諾氏固定液。其優(yōu)點(diǎn)同上；第三種是95%酒精固定液，適用于大規(guī)模普查。制備簡單，但滲透作用稍差。 2、固定方法 （1）帶濕固定：涂片后未待標(biāo)本干燥即行固定的方法稱帶濕固定。此法固定細(xì)胞結(jié)構(gòu)清楚，染色新鮮。適用于巴氏或HE染色。痰液、陰道分泌物及食管拉網(wǎng)涂片等常用此方法。 （2）干燥固定：涂片后待其自然干燥，再行固定。適用于稀薄標(biāo)本如尿液、胃沖洗液等，也適用于瑞特染色和姬姆薩染色。 3、固定時(shí)間：一般為15-30min。含粘液較多標(biāo)本，如痰液、陰道分泌物、食管拉網(wǎng)等固定時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長；尿液、胸、腹水等涂片不含粘液，固定時(shí)間可酌情縮短。 三、涂片的染色 1、染色的目的和原理：染色的目的是借助于一種或多種染料，使組織和細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)分別著不同的染色，這樣在顯微鏡下能清楚地觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，作出正確判斷。 組織細(xì)胞染色原理至今尚無滿意的解釋，可能是物理作用，也可能是化學(xué)作用，或者是兩者綜合作用的結(jié)果。 染色的物理作用是利用毛細(xì)管現(xiàn)象，滲透、吸收和吸附作用，使染料的色素顆粒牢固地進(jìn)入組織細(xì)胞，并使其顯色；染色的化學(xué)作用是滲入組織細(xì)胞的染料與其相應(yīng)的物質(zhì)起化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生有色的化合物。 各染料都具有兩種性質(zhì)，即：產(chǎn)生顏色；征收被組織形成親和力。這兩種性質(zhì)主要由發(fā)色基因和助色基因所產(chǎn)生。發(fā)色基團(tuán)：苯的衍生物具有可見光區(qū)吸收帶。這些衍生物顯不出吸收帶與其價(jià)鍵的不穩(wěn)定性有關(guān)，如對(duì)苯二酚為無色，當(dāng)其氧化后失去兩個(gè)氫原子，它的分子或則變?yōu)橛悬S色的對(duì)醌，這種產(chǎn)生顏色的醌式環(huán)稱為發(fā)色基團(tuán)。若一種化合物含有幾個(gè)環(huán)，只要其中有一個(gè)醌式環(huán)就會(huì)發(fā)出顏色，稱此發(fā)色基團(tuán)為色原（chromogen）。助色基團(tuán)：是一種能使化合物以生電離作用的輔助原子團(tuán)（酸堿性基團(tuán)）。它能使染色的色澤進(jìn)一步加深，并使其與被染色組織具有親和力。 助色基團(tuán)的性質(zhì)決定染料是酸性堿性。堿性染料具有堿性助色基團(tuán)，在溶媒中產(chǎn)生的帶色部分為帶正電荷的陽離子，吻與組織細(xì)胞內(nèi)帶負(fù)電荷的物質(zhì)結(jié)合而顯色。如細(xì)胞核內(nèi)的主要化學(xué)成分脫氧化核糖核酸易被蘇木素染成紫藍(lán)色，稱嗜堿性。酸性染料具有酸性用力色基團(tuán)，在溶酶中產(chǎn)生帶色部分為陰離子，易與組織細(xì)胞內(nèi)帶正電荷部分結(jié)合而顯色，此性質(zhì)被稱為嗜酸性，如細(xì)胞漿內(nèi)訂成分為蛋白質(zhì)，易與伊紅或橘黃結(jié)合呈紅色或橘黃色。 2、常用染色方法：臨床日常工作中較為常用的染色方法有下列3種： （1）巴氏染色法：本法染色特點(diǎn)是細(xì)胞具有多色性顏色，色彩鮮艷多彩。涂片染色的透明性好，胞質(zhì)顆粒分明，胞核結(jié)構(gòu)清晰，如鱗狀上皮過度角化，細(xì)胞質(zhì)呈橘黃色；角化細(xì)胞顯粉紅色；而角化前細(xì)胞顯淺綠色或淺藍(lán)色，適用于上皮細(xì)胞染色或觀察陰道涂片中激素水平對(duì)上皮細(xì)胞的影響。此方法的缺點(diǎn)是染色程序比較復(fù)雜。 （2）蘇木精—伊紅（he

  贊(9)

  回復(fù)(0)

  評(píng)論

  評(píng)論

  登錄后參與評(píng)論