近日，沃特世公司宣布推出RapiZyme胰蛋白酶，這種經(jīng)過化學(xué)優(yōu)化的重組胰蛋白酶不僅堪稱性能標(biāo)桿，還能將冗長的酶解時(shí)間從3個(gè)多小時(shí)縮短為僅30分鐘。

圖.RapiZyme胰蛋白酶有助于改善生物制藥肽圖分析或自下而上蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的蛋白質(zhì)酶解效果。

RapiZyme胰蛋白酶具有業(yè)內(nèi)出色的抗自切性，因此可以在更高的酶:蛋白質(zhì)1:5比例下使用，不依賴高溫條件就能在30分鐘內(nèi)快速完成酶解，而且酶解性能絲毫不受影響。這降低了因熱誘導(dǎo)產(chǎn)生干擾峰的風(fēng)險(xiǎn)（例如人工脫酰胺或氧化），而不會影響酶解性能、重現(xiàn)性或序列覆蓋率。 

RapiZyme胰蛋白酶采用特殊凍干工藝，凍干時(shí)添加了LC-MS兼容的添加劑，其目的是在提高酶穩(wěn)定性和樣品回收率的同時(shí)保持復(fù)溶后的高活性。  

酶解時(shí)間長和性能不理想是蛋白質(zhì)酶解的兩大難題。包含各種非目標(biāo)峰的復(fù)雜肽圖會降低工作效率并影響數(shù)據(jù)分析，進(jìn)而減慢肽圖分析，對結(jié)構(gòu)表征、蛋白質(zhì)鑒定以及整個(gè)生物制藥行業(yè)的其他許多重要應(yīng)用產(chǎn)生不良影響。

在開發(fā)生物制藥分析方法時(shí)，肽圖中的所有峰（即使是很小的峰）都必須在監(jiān)管文件中明確標(biāo)識。化學(xué)、制造和控制(CMC)領(lǐng)域的分析科學(xué)家們希望酶能生成無噪音的完 美基線。RapiZyme胰蛋白酶就能做到這一點(diǎn)，它讓科學(xué)家們無需耗費(fèi)時(shí)間去鑒別和分析非目標(biāo)峰。 

沃特世超GX液相色譜儀ACQUITY UPLC，擁有高度穩(wěn)定，重現(xiàn)性好的色譜系統(tǒng)，已經(jīng)成功在各大實(shí)驗(yàn)室的各種分析領(lǐng)域中被廣泛應(yīng)用。包括食品安全、生物分析、臨床、代謝物鑒定、代謝組學(xué)、方法開發(fā)等。檢測家搜集了去年一年采訪過的實(shí)驗(yàn)室，他們在平時(shí)液相分析工作中遇到的各種各樣的問題，此次視頻為大家總結(jié)了UPLC操作規(guī)程和基線噪音問題排除方法。

▌UPLC操作規(guī)程

實(shí)驗(yàn)室儀器的使用方法和注意事項(xiàng)，是保障儀器正常工作的前提，很多說明看似簡單，卻也不可忽視。不然儀器“罷工”會嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。知道很多小伙伴沒耐心去看說明。所以，小助理幫助大家整理了一篇UPLC操作規(guī)程！

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▌UPLC基線噪音排除

實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會傳來這樣的聲音“咦，基線噪聲怎么這么大？維修工程師趕不過來，我這實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)得馬上出，該怎么辦？” 今天小助理從實(shí)際應(yīng)用角度出發(fā)，告訴大家如何減小和消除噪音。

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基線噪音大

• 卸下色譜柱 – 沖洗系統(tǒng)，直至基線穩(wěn)定；

• 滲漏 – 此時(shí)應(yīng)修復(fù)滲漏，重新連接或更換接頭；

• 流動相中有氣體 – 溶劑脫氣；

• 流動池中有氣泡 – 在檢測器出口處使用0.009的管路；

• 檢測器使用記錄 – 例如紫外燈，查看是否需要更換燈，是否能量低，光路系統(tǒng)是否正常；

• 靈敏度太高 – 使用合適的采樣頻率；一味追求高采樣頻率，可能對靈敏度沒有任何幫助，同時(shí)也會產(chǎn)生比較大的噪音：UV檢測器推薦降低采樣頻率，HPLC推薦1-5HZ，UPLC推薦20HZ。

• 保持良好的操作習(xí)慣 – 一如UPLC儀器水相流動相每天更換，添加了緩沖鹽的流動相過0.2 μm溶劑過濾膜等，都會減小基線噪音的產(chǎn)生。

ACQUITY UPLC系統(tǒng)分析過程中，在保證分析結(jié)果質(zhì)量的同時(shí)，實(shí)現(xiàn)了從每個(gè)樣品中節(jié)省大量的時(shí)間與金錢。實(shí)驗(yàn)室擁有UPLC，檢測員擁有在線解答的小助理，可謂人生贏家！

END

 沃特世公司宣布對旗下產(chǎn)品Waters LC/GC認(rèn)證樣品瓶實(shí)施全新的測試方案，同時(shí)為Waters TruView pH控制LC/MS認(rèn)證樣品瓶系列添加新的測試項(xiàng)目。

Waters LC/GC認(rèn)證樣品瓶的全新UPLC-UV認(rèn)證測試在195 nm下進(jìn)行，靈敏度非常高，合格標(biāo)準(zhǔn)為污染水平低于100 ppb，該測試旨在確保瓶蓋和隔墊也和樣品瓶一樣潔凈無污染。通過該測試的樣品瓶足以確保在典型LC-UV條件下運(yùn)行時(shí)避免出現(xiàn)污染物峰。

新推出的 Waters TruView pH控制LC/MS認(rèn)證樣品瓶具有改性玻璃表面，可阻止游離鈉離子浸出到溶液中。這能避免pH值偏離中性，從而減少不良化學(xué)反應(yīng)和由此產(chǎn)生的鬼峰。這款樣品瓶還能減少因吸附極性堿性物質(zhì)而導(dǎo)致的分析物損失。

盡管實(shí)驗(yàn)室在努力消除產(chǎn)生錯誤結(jié)果的風(fēng)險(xiǎn)，但在接受沃特世調(diào)研的客戶中，仍有超過50%的客戶表示他們偶爾甚至經(jīng)常遇到污染或鬼峰問題。沃特世樣品瓶產(chǎn)品系列的這些新成員有助于消除樣品瓶導(dǎo)致的不合格結(jié)果。

拜耳公司供應(yīng)中心（德國貝格卡門）質(zhì)量控制主管Hartmut Kagerer博士說：

樣品瓶中的pH值變化導(dǎo)致分析物降解，還有色譜圖中出現(xiàn)鬼峰，這些一直都是我們在工作流程中遇到的挑戰(zhàn)。隨機(jī)出現(xiàn)的未知峰會減緩研究工作進(jìn)度，還會威脅結(jié)果質(zhì)量。我們一直在尋找能避免pH值偏離中性的樣品瓶。使用表面性能受控且重現(xiàn)性出色的樣品瓶一方面能提高數(shù)據(jù)質(zhì)量，另一方面減少了結(jié)果解析的不確定性，可謂變革之舉。