求教 分光光度計中不同比色皿厚度之間吸光度的換算問題
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大蝦們好: Z近作試驗時遇到一個小問題,在利用分光光度法測定茶氨酸 含量時,標準方法是利用的0.5的比色皿由于試驗條件限制,我是利用的1cm de 比色皿,不知道這樣做會不會影響試驗結(jié)果,該怎換算 謝謝
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- 閑逛逛1號 2012-09-11 00:00:00
- 比色皿厚度依照比耳定律可知吸光度與濃度、光徑成正比,故增加光徑相對可提高一定濃度之吸光度,也可以理解為比色皿的厚度越大,檢出限就越低,所以實驗濃度越低,那么要求的比色皿厚度就越高。如果說實驗溶液的濃度非常低,那么如果有3CM的比色皿做不出來,用1CM就更檢不出來了。一般無論用什么厚度的比色皿,按照標準方法要求就可以了,一般情況下你使用的比色皿長度大于方法要求的長度那么你的實驗就不會有問題(也就是說只要你的實驗數(shù)據(jù)沒有低于檢出限那么比色皿對你就沒有影響),因為整條標準曲線和樣品都使用同樣的比色皿,所以所有的吸光度與濃度的線性關(guān)系是不變的。(根據(jù)換算公式:①A=abc或②A=εbc A為吸光度,b為液層厚度即比色皿厚度,單位用厘米,c為濃度。其實我們Z終要的數(shù)值主要是濃度,所以吸光度是多少的關(guān)系并不重要,試想一下所有的吸光度都乘以一個同等的數(shù)值,與濃度的線性關(guān)系沒有任何改變的),不需要進行任何的換算。
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- 零下三度的愛 2008-08-05 00:00:00
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- 角弧度 2017-10-05 19:08:43
- 可以進行換算,公式為: ①A=abc或②A=εbc A為吸光度,b為液層厚度即比色皿厚度,單位用厘米,c為濃度,在①中,c的單位為克每升,在②中c的單位為摩爾每升,a為常數(shù),ε是吸光物質(zhì)在特定波長下的特征常數(shù)
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