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- xwj_1026 2015-03-07 00:00:00
- 一般流式細胞儀都有FITC通道，GFP可以用該通道來測量.用同一細胞系的轉(zhuǎn)染了無GFP質(zhì)粒的細胞做陰性對照，設(shè)置閾值.
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- wkdrn20110301 2017-04-14 00:00:00
- 流式細胞儀原理簡單來講就是將細胞包裹在細細的液流中，將細胞以一個一個的形式通過激光，GFP本身屬于綠色熒光蛋白，受到488左右的激光激發(fā)會釋放出熒光，通過檢測側(cè)向散射的熒光強度經(jīng)過信號放大可以得到樣品的熒光情況。 具體的操作根據(jù)設(shè)備的不同都有不同，建議直接查看儀器的操作手冊，但基本原理都是相同的，需要先將要鑒定的細胞消化、過濾網(wǎng)去除大塊雜質(zhì)，然后細胞懸液經(jīng)由上樣管進入流式分析儀或分選儀。diyi次鑒定的話，需要準(zhǔn)備陰性及陽性的對照，即不表達GFP的同種細胞，用該細胞設(shè)門，再上帶有GFP的細胞，檢測未知樣品時，用FITC或相對應(yīng)的通道的信號強度，去除陰性的門就是陽性的細胞亞群了。
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