人總雙微基因2(MDM2)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍：

96T

6pg/ml-200pg/ml

使用目的：

本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中總雙微基因 2(MDM2)含量。

實驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人總雙微基因 2(MDM2)水平。用純化的人總雙微基因 2(MDM2)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入總雙微基因 2(MDM2)，再與 HRP 標(biāo)記的總雙微基因 2(MDM2)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的總雙微基因 2(MDM2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人總雙微基因 2(MDM2)濃度。

試劑盒組成

1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶

2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品(400pg/ml) 0.5ml×1 瓶

3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶

4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份

5 顯色劑 A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張

6 顯色劑 B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個

標(biāo)本要求

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能

馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀

釋。

200pg/ml 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

100pg/ml 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

50pg/ml 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

25pg/ml 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

12.5pg/ml 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl， 然后再加待測樣品 10μl(樣品最終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡 量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同 3。

8. 洗滌：操作同 5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

10 分鐘.

10. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定：以空白孔調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

操作程序總結(jié)：

計算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的 OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)， 即為樣品的實際濃度。

注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未 用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值

大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的 OD 值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(

n 倍)后再測定，計 算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

保存條件及有效期

1.試劑盒保存：;2-8℃。

2.有效期：6 個月

人總雙微基因2(MDM2)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

滾珠為什么不能注油

在機械設(shè)備中，滾珠軸承作為重要的關(guān)鍵組件，廣泛應(yīng)用于各類設(shè)備的轉(zhuǎn)動和摩擦部件中。為了提高設(shè)備的運轉(zhuǎn)效率和延長使用壽命，很多人會選擇為滾珠軸承添加潤滑油。實際上，滾珠軸承并不適合注油，原因涉及到潤滑油的物理性質(zhì)、滾珠的運動特性以及可能對設(shè)備造成的負(fù)面影響。本文將詳細(xì)探討滾珠軸承為什么不能注油，并為大家提供更為合理的維護(hù)方式。

滾珠軸承的工作原理是依靠滾珠在內(nèi)圈和外圈之間的滾動來減少摩擦。潤滑油雖然有助于減少摩擦，但注油過多可能導(dǎo)致滾珠軸承的運行不穩(wěn)定。潤滑油在一定條件下可能變得粘稠，容易形成油膜，造成滾珠與內(nèi)圈或外圈之間的滑動摩擦，反而增加了摩擦阻力，不僅降低了軸承的效率，還可能引發(fā)過熱、磨損等問題。過量的潤滑油還可能進(jìn)入軸承的其他部位，導(dǎo)致污染和機械故障。

滾珠軸承的密封性和清潔度對于其正常運作至關(guān)重要。注油可能會破壞其封閉結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致污染物或外部物質(zhì)進(jìn)入軸承內(nèi)部，這樣不僅影響軸承的運轉(zhuǎn)效果，還會加速滾珠表面和內(nèi)外圈的磨損。在高溫環(huán)境下，潤滑油的揮發(fā)性增強，可能引起油煙和殘留物的積累，進(jìn)一步增加了維護(hù)難度。

現(xiàn)代滾珠軸承設(shè)計通常會預(yù)先選擇適當(dāng)?shù)臐櫥绞?，使用高性能的潤滑脂或者完全封閉式的免維護(hù)軸承，這些設(shè)計已經(jīng)充分考慮了摩擦和潤滑的平衡。通過這些高效的設(shè)計，滾珠軸承能夠在無需頻繁注油的情況下，保持穩(wěn)定的運行狀態(tài)，減少維護(hù)成本，并延長使用壽命。

滾珠軸承并不適合注油。注油不僅可能影響其正常運轉(zhuǎn)，還可能加速軸承的損壞。為保證設(shè)備的高效和長久運作，應(yīng)該采用專業(yè)的潤滑解決方案，并按照制造商的建議進(jìn)行合理的維護(hù)。

FluoSurf (2%, w/w) in HFE 7500 含氟表面活性劑 

Zhu B, Du Z, Dai Y, Kitguchi T, Behrens S, Seelig B. Nanodroplet-based reagent delivery into water-in-fluorinated-oil droplets. ChemRxiv. Cambridge: Cambridge Open Engage; 2023;  

體外區(qū)隔化是一種生成油包水微滴的技術(shù)，用于建立基因型(DNA信息)-表型(生物分子功能)連鎖，這是許多生物學(xué)應(yīng)用所需要的。近年來，由于氟化油具有較好的生物相容性，在微滴制造中得到了越來越廣泛的應(yīng)用。然而，需要在含氟水的油微滴中添加試劑來進(jìn)行多步反應(yīng)是困難的。芯片上的微滴操作通常用于此目的，但它可能遇到一些技術(shù)問題，即低通量或?qū)⒃噭┻f送到不同的微滴中有時間延遲。因此，我們評估了采用基于納米液滴的方法使用銅離子和中等大小的肽(2 kDa)分子來解決這些問題的可行性。