血藥濃度檢測(cè)的方法
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血藥濃度的監(jiān)測(cè)方法主要是GX液相色譜法。常用的有:光譜法、色譜法、免疫法。
1.光譜法
該類方法有比色法、紫外-可見分光光度法、熒光法等。這類方法單一光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng),功能簡(jiǎn)單,靈敏度比較低,而且精度不夠,操作還很繁瑣,只能監(jiān)測(cè)體液中藥物質(zhì)量濃度在1.0μg·L-1以上的藥物,并且代謝物或結(jié)構(gòu)相近化合物對(duì)監(jiān)測(cè)的干擾較大。應(yīng)用這類方法所需樣品量大,尤其象差示分光光度法所需樣品量更大。以上缺點(diǎn)限制了該類方法在血藥濃度監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用。尤其近年來色譜技術(shù)的發(fā)展,使得光譜法因其靈敏度、特異性等局限而使得其應(yīng)用逐漸減少。但是它設(shè)備簡(jiǎn)單,成本低,對(duì)于藥物濃度較高的體液樣品或樣品量較大的樣品,該類方法仍是經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便、快捷的監(jiān)測(cè)方法。
2.色譜法
色譜法目前是發(fā)展快、適用性強(qiáng)的一種方法。這類方法較光譜法的優(yōu)勢(shì)就是它不僅具有優(yōu)越的定量作用,更具有一次分離多種樣品的作用,加之這種方法靈敏度高,能夠測(cè)到的藥物質(zhì)量濃度可達(dá)0.001~1μg·mL-1,尤其是近年來質(zhì)譜的發(fā)展使得監(jiān)測(cè)范圍更加擴(kuò)展,達(dá)到1.0×10-9~1.0×-6μg·mL-1甚至更低。
(1)GX液相色譜(HPLC)法
HPLC法是目前常用的方法,也是很具發(fā)展前途的方法。它檢測(cè)靈敏度精密度高、專一性強(qiáng)、應(yīng)用范圍廣、檢出限低,它具有優(yōu)越的定性(確定是什么成分)、定量(含量多少)作用,效率高,試劑成本降低;但這種方法對(duì)樣品的前處理要求非常高,而且操作費(fèi)時(shí),費(fèi)用相對(duì)較高,對(duì)人員要求較高,需要專業(yè)人員操作。
(2)氣相色譜(GC)法
GC法具有高選擇性、高靈敏度、取樣少、分析速度快、應(yīng)用范圍廣,而且可制備高純物質(zhì)等。氣相色譜法的缺點(diǎn)是要求被測(cè)組分或其衍生物必須具有一定的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性,因此遇熱不穩(wěn)定或極性大的樣品無法實(shí)現(xiàn)GC的監(jiān)測(cè)。目前隨著固定相的發(fā)展以及衍生化技術(shù)的應(yīng)用,使很多樣品的監(jiān)測(cè)不再受限制。但氣相色譜儀在體內(nèi)藥物分析中的應(yīng)用相對(duì)較少。
(3)薄層色譜法
薄層色譜法是將樣品在層析板上進(jìn)行分離,然后對(duì)分離樣品進(jìn)行定量的一種色譜方法。這種方法的靈敏度及重復(fù)性比HPLC和GC法要差,而且操作步驟較多,在實(shí)際應(yīng)用中受到限制。但這種方法操作簡(jiǎn)單,能滿足一般藥物的濃度監(jiān)測(cè)要求。
3.免疫法
目前采用免疫法監(jiān)測(cè)藥物濃度主要是利用蛋白競(jìng)爭(zhēng)的原理進(jìn)行監(jiān)測(cè)的。放射免疫法,酶免疫法、熒光免疫法是較常用于血藥濃度監(jiān)測(cè)的方法,國(guó)外監(jiān)測(cè)血藥濃度多以熒光偏振免疫法(FPIA法)、均相酶免疫法(EMIT)為主,這類方法樣品處理簡(jiǎn)單,獲取結(jié)果時(shí)間較短,已成為臨床用于評(píng)判LX的一個(gè)重要依據(jù)。該類儀器多由國(guó)外研發(fā),價(jià)格較貴,且僅局限于其研發(fā)后所能監(jiān)測(cè)的藥物。但該類儀器仍因其獲取結(jié)果快速、樣品處理簡(jiǎn)單、靈敏度高而受到臨床的重視。
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- 血藥濃度檢測(cè)的方法
血藥濃度的監(jiān)測(cè)方法主要是GX液相色譜法。常用的有:光譜法、色譜法、免疫法。
1.光譜法
該類方法有比色法、紫外-可見分光光度法、熒光法等。這類方法單一光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng),功能簡(jiǎn)單,靈敏度比較低,而且精度不夠,操作還很繁瑣,只能監(jiān)測(cè)體液中藥物質(zhì)量濃度在1.0μg·L-1以上的藥物,并且代謝物或結(jié)構(gòu)相近化合物對(duì)監(jiān)測(cè)的干擾較大。應(yīng)用這類方法所需樣品量大,尤其象差示分光光度法所需樣品量更大。以上缺點(diǎn)限制了該類方法在血藥濃度監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用。尤其近年來色譜技術(shù)的發(fā)展,使得光譜法因其靈敏度、特異性等局限而使得其應(yīng)用逐漸減少。但是它設(shè)備簡(jiǎn)單,成本低,對(duì)于藥物濃度較高的體液樣品或樣品量較大的樣品,該類方法仍是經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便、快捷的監(jiān)測(cè)方法。
2.色譜法
色譜法目前是發(fā)展快、適用性強(qiáng)的一種方法。這類方法較光譜法的優(yōu)勢(shì)就是它不僅具有優(yōu)越的定量作用,更具有一次分離多種樣品的作用,加之這種方法靈敏度高,能夠測(cè)到的藥物質(zhì)量濃度可達(dá)0.001~1μg·mL-1,尤其是近年來質(zhì)譜的發(fā)展使得監(jiān)測(cè)范圍更加擴(kuò)展,達(dá)到1.0×10-9~1.0×-6μg·mL-1甚至更低。
(1)GX液相色譜(HPLC)法
HPLC法是目前常用的方法,也是很具發(fā)展前途的方法。它檢測(cè)靈敏度精密度高、專一性強(qiáng)、應(yīng)用范圍廣、檢出限低,它具有優(yōu)越的定性(確定是什么成分)、定量(含量多少)作用,效率高,試劑成本降低;但這種方法對(duì)樣品的前處理要求非常高,而且操作費(fèi)時(shí),費(fèi)用相對(duì)較高,對(duì)人員要求較高,需要專業(yè)人員操作。
(2)氣相色譜(GC)法
GC法具有高選擇性、高靈敏度、取樣少、分析速度快、應(yīng)用范圍廣,而且可制備高純物質(zhì)等。氣相色譜法的缺點(diǎn)是要求被測(cè)組分或其衍生物必須具有一定的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性,因此遇熱不穩(wěn)定或極性大的樣品無法實(shí)現(xiàn)GC的監(jiān)測(cè)。目前隨著固定相的發(fā)展以及衍生化技術(shù)的應(yīng)用,使很多樣品的監(jiān)測(cè)不再受限制。但氣相色譜儀在體內(nèi)藥物分析中的應(yīng)用相對(duì)較少。
(3)薄層色譜法
薄層色譜法是將樣品在層析板上進(jìn)行分離,然后對(duì)分離樣品進(jìn)行定量的一種色譜方法。這種方法的靈敏度及重復(fù)性比HPLC和GC法要差,而且操作步驟較多,在實(shí)際應(yīng)用中受到限制。但這種方法操作簡(jiǎn)單,能滿足一般藥物的濃度監(jiān)測(cè)要求。
3.免疫法
目前采用免疫法監(jiān)測(cè)藥物濃度主要是利用蛋白競(jìng)爭(zhēng)的原理進(jìn)行監(jiān)測(cè)的。放射免疫法,酶免疫法、熒光免疫法是較常用于血藥濃度監(jiān)測(cè)的方法,國(guó)外監(jiān)測(cè)血藥濃度多以熒光偏振免疫法(FPIA法)、均相酶免疫法(EMIT)為主,這類方法樣品處理簡(jiǎn)單,獲取結(jié)果時(shí)間較短,已成為臨床用于評(píng)判LX的一個(gè)重要依據(jù)。該類儀器多由國(guó)外研發(fā),價(jià)格較貴,且僅局限于其研發(fā)后所能監(jiān)測(cè)的藥物。但該類儀器仍因其獲取結(jié)果快速、樣品處理簡(jiǎn)單、靈敏度高而受到臨床的重視。
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