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- 愛陷入你的溫柔 2013-01-13 00:00:00
- 可能是相同的亞基，或者各亞基分子量相差不大。
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- applepearbiscu 2013-01-16 00:00:00
- 一樓說的是一個可能原因，就是各亞基分子量太過接近。 如果各亞基的差別足夠大，用SDS電泳分離是可行的，則我有如下建議改進(jìn)實驗條件： 我假定樓主的目標(biāo)條帶是膠上部五分之一到四分之一處的三細(xì)三粗條帶。則此蛋白看起來分子量很大。建議樓主降低膠的濃度，延長電泳時間，讓目標(biāo)蛋白可以跑下來。 樓主的樣本看起來是較純的蛋白質(zhì)，小分子量的部分如果不需要完全可以讓它們跑出去，即不必要在溴酚蘭到底時就停止電泳。 現(xiàn)在已經(jīng)知道目標(biāo)蛋白和marker條帶之間的關(guān)系，完全可以靠marker準(zhǔn)確估計目標(biāo)蛋白的位置。Z好電泳至目標(biāo)蛋白進(jìn)入到膠的下半部，這樣達(dá)到Z大分離效果。前提是膠的濃度適合，否則再怎么跑下來也分離不開。粗略地講，100-200kd的蛋白可以使用5-10%acrylamide。
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