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  志丹好女人 2017-12-15 00:00:00

  活動(dòng)目標(biāo) 1．使用高倍顯微鏡觀察葉綠體和線粒體的形態(tài)和分布。 2．識(shí)別光學(xué)顯微鏡下的葉綠體和線粒體。 背景資料 1．相關(guān)知識(shí) 地球上絕大多數(shù)生命活動(dòng)所需能量的Z終源頭是太陽能。綠色植物是主要的能量轉(zhuǎn)換者，完成這一能量轉(zhuǎn)換的細(xì)胞器是葉綠體。葉綠體利用光能將二氧化碳和水合成糖類等有機(jī)物，同時(shí)產(chǎn)生氧。在高等植物細(xì)胞中葉綠體呈橢球形，長徑5～10 μm，短徑2～4 μm，厚2～3 μm。高等植物的葉肉細(xì)胞中一般含50～200個(gè)葉綠體，可占細(xì)胞質(zhì)的40%。葉綠體的數(shù)目因同種植物不同細(xì)胞類型、生態(tài)環(huán)境、生理狀態(tài)而有所不同。在藻類細(xì)胞中，葉綠體形狀多樣，有網(wǎng)狀、帶狀、裂片狀和星形等，而且體積巨大，長徑可達(dá)100 μm。 線粒體是動(dòng)植物細(xì)胞中重要的細(xì)胞器，與能量轉(zhuǎn)換有關(guān)。線粒體一般呈粒狀或棒狀，因不同的細(xì)胞種類和生理狀態(tài)而不同，可呈環(huán)形、啞鈴形、線狀、分支狀或其他形狀。線粒體數(shù)目因細(xì)胞種類和生理狀態(tài)不同有所差異，一般在一個(gè)細(xì)胞中有數(shù)百到數(shù)千個(gè)。植物細(xì)胞因有葉綠體的緣故，線粒體數(shù)目相對(duì)較少；肝細(xì)胞中約有1 300個(gè)線粒體，占細(xì)胞體積的20%；巨大變形蟲中線粒體數(shù)目可達(dá)50萬個(gè)；許多哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中無線粒體；酵母細(xì)胞中有一個(gè)大型分支狀的線粒體。線粒體通常分布在細(xì)胞生命活動(dòng)旺盛的區(qū)域。例如，在肝細(xì)胞中呈均勻分布；在腎細(xì)胞中靠近微血管，呈平行或柵欄狀排列；在精子中集中在尾的基部。線粒體在細(xì)胞質(zhì)中可以向生命活動(dòng)旺盛的區(qū)域遷移。 2．實(shí)驗(yàn)原理 （1）葉綠體的觀察植物綠色部位的細(xì)胞中含有葉綠體。如果將葉片的橫切片制成臨時(shí)裝片，就可以在顯微鏡下觀察到葉綠體。某些植物幼嫩的葉也可直接用于觀察葉綠體。 （2）線粒體的觀察線粒體是細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸的主要場所，內(nèi)含細(xì)胞色素氧化酶系。健那綠是一種堿性染料，可以專一性地對(duì)線粒體進(jìn)行染色。與線粒體內(nèi)的細(xì)胞色素氧化酶系發(fā)生作用時(shí)，染料始終保持氧化狀態(tài)，呈藍(lán)綠色;而線粒體周圍的細(xì)胞質(zhì)中的染料被還原為無色的狀態(tài)。通過染色可以在高倍顯微鏡下觀察到呈現(xiàn)藍(lán)綠色的線粒體。 操作指南 1．材料  蘚類、菠菜或黑藻的葉，人的口腔上皮細(xì)胞，洋蔥內(nèi)表皮細(xì)胞。 2．用具  顯微鏡，載玻片，蓋玻片，滴管，鑷子，消毒牙簽。 3．試劑及配制方法 （1）試劑  清水，健那綠染液。 （2）試劑的配制方法 ①等滲溶液稱取0．85 g NaCl、0．25 g KCl、0．03 g CaCl2溶于100 mL蒸餾水中。 ②健那綠染液先稱取10 mg健那綠溶于1 mL等滲溶液中，用濾紙過濾。再取濾液加入49 mL等滲溶液中，即為染色液。 4．操作要點(diǎn) （1）制作臨時(shí)裝片 ①在觀察黑藻前10 min，用40 °C的水浸泡黑藻的葉。這樣的葉用于制作臨時(shí)裝片，便于觀察到黑藻的葉綠體隨細(xì)胞質(zhì)而流動(dòng)。 ②在適宜的溫度下制作人的口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片。可以將健那綠染液保持在37 °C，盡可能使人的口腔上皮細(xì)胞在染色期間保持在生活狀態(tài)。 ③用健那綠染液染色時(shí)，要染色10～15 min。在此期間要適當(dāng)添加染液，以保證細(xì)胞不干燥。 （2）觀察 ①觀察時(shí)，注意通過調(diào)整光圈來調(diào)節(jié)反射光線的強(qiáng)弱，使進(jìn)入物鏡的光線不要太強(qiáng)。 ②按照正確的觀察順序，先用低倍鏡找到觀察的物像，通過移動(dòng)臨時(shí)裝片選擇單層的典型細(xì)胞，再轉(zhuǎn)換高倍鏡進(jìn)行觀察。 分析討論 1．選擇觀察葉綠體的實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，應(yīng)注意什么問題？ 2．具有較多線粒體的細(xì)胞在功能上有什么特點(diǎn)？ 3．為什么用健那綠染液作為觀察線粒體的染色劑？ 4．細(xì)胞中的葉綠體和線粒體的共同特點(diǎn)是什么？ 評(píng)價(jià)建議 操作步驟 規(guī)范的操作方法 分值 得分 安放顯微鏡及對(duì)光 將顯微鏡放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)的正確位置上。調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋，使物鏡上升至適當(dāng)高度。轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使低倍鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔，調(diào)節(jié)光圈和反光鏡，使視野變明亮 2分 制片 選取材料適量，無氣泡 2分 低倍鏡觀察 材料展放均勻，細(xì)胞圖像清晰 2分 染色 工作臺(tái)清潔，材料無干燥現(xiàn)象 2分 高倍鏡觀察及效果 將清晰物像移至視野ZY，細(xì)胞圖像清晰 2分 實(shí)驗(yàn)《使用高倍顯微鏡觀察葉綠體和線粒體》成績

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