氣泡—對(duì)于液相色譜系統(tǒng)來(lái)說(shuō)可謂是頭號(hào)敵人，如果系統(tǒng)中混入了較多的氣泡，往往會(huì)造成壓力不穩(wěn)定、基線跑不準(zhǔn)、尖銳的噪聲峰、分析靈敏度下降等負(fù)面影響，讓實(shí)驗(yàn)操作者苦不堪言。那么這些氣泡是從哪來(lái)的？有什么危害？我們?cè)撊绾翁幚砟兀?/strong>

Where—?dú)鈴哪睦飦?lái)

一般來(lái)說(shuō)，液相色譜中的氣泡來(lái)自于流動(dòng)相

液體對(duì)于氣體都有一定的溶解度

好比一瓶碳酸飲料，打開(kāi)瓶蓋，壓力降低，會(huì)有氣泡產(chǎn)生

如果加熱或者攪拌，也會(huì)有氣泡產(chǎn)生

所以對(duì)于流動(dòng)相也一樣，

如果溫度升高、劇烈震動(dòng)、壓力降低等都會(huì)產(chǎn)生氣泡

還有一種情況，兩種不同的溶劑混合，熱力學(xué)體積會(huì)發(fā)生變化

如在水中加入乙醇，會(huì)發(fā)現(xiàn)有較多的氣泡溢出

因此在兩相混合時(shí)也容易產(chǎn)生氣泡，尤其在梯度變化時(shí)更為明顯

除了流動(dòng)相外，吸濾頭、泵頭受到污染也可能導(dǎo)致氣泡的產(chǎn)生

此外如果是手動(dòng)進(jìn)樣，則需要排除樣品注射器中的空氣

Why—?dú)馀莸奈：?/strong>

氣泡具有可壓縮性，導(dǎo)致系統(tǒng)壓力波動(dòng)和流速不穩(wěn)

出現(xiàn)雜峰和鬼峰、基線漂移等，影響測(cè)定結(jié)果

如果混入的氣體中含有氧氣

其與流動(dòng)相某些基團(tuán)反應(yīng)，產(chǎn)生熒光淬滅現(xiàn)象

造成靈敏度下降或者不出峰

此外，系統(tǒng)中的氣體尤其是氧氣會(huì)與色譜柱填料反應(yīng)

導(dǎo)致柱效降低，色譜柱使用壽命縮短

How—如何排氣泡

Z基本的操作就是流動(dòng)相超聲脫氣30min

在進(jìn)樣前進(jìn)行脫氣處理

對(duì)于四元泵混合流動(dòng)相來(lái)說(shuō)，使用在線脫氣機(jī)是必須的

氦吹脫氣是業(yè)界標(biāo)準(zhǔn)做法，但成本高，操作不方便，普及率較低

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中避免環(huán)境溫度、氣壓的變化

定期清洗流動(dòng)相吸濾頭

所以

為了得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和wan美的峰圖

保證液相系統(tǒng)中氣泡的排除是必不可少的環(huán)節(jié)

How—GX液相色譜等度系統(tǒng)氣泡故障排除

01故障原因

溶劑混合時(shí)，由于兩種液體熱力學(xué)體積的變化，會(huì)產(chǎn)生氣泡；混合時(shí)放熱或者吸熱易產(chǎn)生氣泡，比如：甲醇和水混合屬于放熱，乙腈和水混合屬于吸熱。通常用量筒混合后明顯看到體積的增減，而且有許多小氣泡產(chǎn)生，掛在瓶壁上，或者晃一下可以看到許多小氣泡存在液體中。

>>>>故障排除

對(duì)溶劑過(guò)濾，超聲脫氣（常用），尤其是乙腈和水混合后，超聲脫氣時(shí)間要長(zhǎng)一些，也可以通過(guò)其他方法脫氣，例如安裝在線脫氣機(jī)，充氮脫氣等。處理好的液體在使用過(guò)程中應(yīng)該保持室內(nèi)溫度恒定。

02故障原因

溶劑濾頭污染，導(dǎo)致泵在吸液過(guò)程中吸力不均勻而強(qiáng)制吸液從而產(chǎn)生微小的真空氣泡。此時(shí)會(huì)觀察到進(jìn)液管壁上分布許多很小的氣泡，有的在動(dòng)有的停留在管壁上，或者感覺(jué)流速比設(shè)定值小，壓力也不穩(wěn)。

>>>>故障排除

先觀察現(xiàn)象確認(rèn)，再排除。 用5%—10%的稀硝酸浸泡過(guò)夜（怕超聲的濾頭）或者超聲處理數(shù)小時(shí)（可以超聲的濾頭），然后用純水浸泡過(guò)夜或者超聲處理，注意換水多處理幾次，洗掉酸的殘留，Z后用有機(jī)相甲醇浸泡處理或者超聲即可。若上述處理未果，需更換新的溶劑濾頭。

03故障原因

流動(dòng)相放好后，沒(méi)有排氣，就開(kāi)始運(yùn)行泵，易產(chǎn)生氣泡。

>>>>故障排除

放好流動(dòng)相后，打開(kāi)旁通閥，用注射器慢慢吸液，觀察進(jìn)液管無(wú)氣泡后再吸10ml將流路中的空氣驅(qū)趕干凈，旋緊旁通閥后再運(yùn)行泵，或者是打開(kāi)旁通閥大流速排液，觀察進(jìn)液管無(wú)氣泡后，再排氣2min將流路中的空氣驅(qū)趕干凈，旋緊旁通閥后再運(yùn)行泵。

04故障原因

單向閥或者泵頭內(nèi)部污染。（泵的壓力波動(dòng)一般在100psi以上就要考慮了）泵頭是壓力變化Z劇烈的地方，也是Z易產(chǎn)生氣泡的地方，泵頭靠負(fù)壓而吸液，而負(fù)壓必然使流動(dòng)相中的小氣泡長(zhǎng)大，當(dāng)泵腔變正壓時(shí)，已長(zhǎng)大的氣泡未必能全部變小流入后續(xù)液路，則泵腔內(nèi)將積存氣泡，從而影響吸液精度。

>>>>故障排除

小心拆下泵頭，用甲醇超聲清洗單向閥以及內(nèi)部密封圈和泵頭整體，用棉花沾甲醇擦拭柱塞桿。必要時(shí)更換單向閥，密封圈，柱塞桿等。

05故障原因

進(jìn)樣時(shí)帶入氣泡，吸樣時(shí)帶到進(jìn)樣針中氣泡

>>>>故障排除

在進(jìn)樣前，注意排出進(jìn)樣針里的空氣，將進(jìn)樣針頭垂直向上，用手指墊上濾紙摁住針頭處，往上推，氣泡很容易就上去了，排出即可。

06故障原因

色譜柱進(jìn)氣泡

>>>>故障排除

用純甲醇低流速（0.2-0.3ml/min）長(zhǎng)時(shí)間沖洗反相色譜柱，隨后可逐步加大流速，Z大加到1ml/min，直至色譜柱壓力穩(wěn)定?；蛘吒鼡Q色譜柱。

07故障原因

流通池是易積存氣泡的地方，其對(duì)基線影響較大，流動(dòng)相流入色譜柱后，壓力越來(lái)越小，微小氣泡將逐漸長(zhǎng)大，而流通池截面積相對(duì)較大，則氣泡在池內(nèi)易長(zhǎng)大，在無(wú)外壓的情況下，很難縮小到管路內(nèi)徑以下流出流通池，從而存在了池內(nèi)，導(dǎo)致基線很亂。

>>>>故障排除

在廢液出口處加反壓調(diào)節(jié)器（壓力一般在150psi左右），為流通池提供一個(gè)背壓；其次是用手指堵廢液管出液端，眼看泵柱壓上升（約2-3s），松開(kāi)，且同時(shí)看檢測(cè)器顯示屏上吸光度值的變化。如果池內(nèi)有氣泡，則手指堵廢液管，吸光度值將劇烈變化，當(dāng)手松開(kāi)后吸光度值再次大步上升，證明池內(nèi)有氣泡但沒(méi)有排掉，當(dāng)手指堵住和松開(kāi)廢液管時(shí)，吸光度值基本不變時(shí)，證明排汽泡成功，再觀察基線將穩(wěn)定（此過(guò)程需要重復(fù)10-20次）。