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用測序的方法檢測點(diǎn)突變可靠嗎?

0宇過天晴 2010-11-25 07:03:10 436  瀏覽
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全部評論(2條)

  • a340244226 2010-11-26 00:00:00
    還可以吧 只不過定點(diǎn)突變之后測序發(fā)現(xiàn)突變的不止是要突變的單個(gè)點(diǎn) 可能會發(fā)生多點(diǎn)突變 建議使用高保真的taq酶

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  • 我前天訂的 2010-11-29 00:00:00
    有的客戶想用測序的方法檢測點(diǎn)突變體,我們認(rèn)為該方法可靠性不高。主要有以下兩個(gè)原因。首先,我們并不清楚突變的序列與正常的序列的比例是多少。測序反應(yīng) 的信號強(qiáng)度直接與模板的量有關(guān),如果突變的模板所占的比例很少,將直接作為背景噪音了,很難檢測出來。只有當(dāng)測序反應(yīng)體系中正常的和突變的模板量比較接近 時(shí),才能較可靠地檢測到突變體的存在。其次,在同一位置,不同堿基的信號強(qiáng)度一般是不一樣的。這樣即使突變的模板所占的比較較高時(shí),也不一定能準(zhǔn)確檢測到 突變的存在。另外,測序儀是設(shè)計(jì)用來測序正常的堿基序列的,軟件在對掃描的結(jié)果進(jìn)行處理時(shí),會盡量提高主峰而將背景信號盡量壓低,以得到盡可能好的結(jié)果。 因此,當(dāng)某處出現(xiàn)雙峰時(shí),測序儀一般會認(rèn)為信號弱的峰為背景信號,在處理過程中,將弱的峰進(jìn)一步壓低,這樣根部不立于突變體的檢測。因此認(rèn)為,用測序的方 法檢測突變體的存在不是一個(gè)好的方法。--------轉(zhuǎn)自三博遠(yuǎn)志網(wǎng)站(測序FAQ)

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這幾種洗瓶子的方法,真的可靠嗎?

在分析工作中,洗滌玻璃儀器不僅是一項(xiàng)必須做的實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作,也是一項(xiàng)技術(shù)性的工作。實(shí)驗(yàn)室儀器的潔凈程度直接影響到實(shí)驗(yàn)效果,甚至決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。




不同的分析工作有不同的玻璃儀器清洗標(biāo)準(zhǔn),下面讓我們看看一般定量化學(xué)分析中的洗滌方法。




最常用的潔凈劑



最常用的潔凈劑莫過于肥皂,肥皂液(特制商品),洗衣粉,去污粉。肥皂,肥皂液,洗衣粉,去污粉,用于可以用刷子直接刷洗的儀器,如燒杯,三角瓶,試劑瓶等;但因其富含大量表面活性劑,在刷洗過后需要使用大量的純水進(jìn)行沖洗,以沖洗掉附著在瓶皿內(nèi)外表面的表面活性劑成分,但清洗范圍僅限于可刷洗與非頑固殘留,且在清洗大量瓶皿時(shí),需要浪費(fèi)大量的水資源。




強(qiáng)酸氧化劑洗液


強(qiáng)酸氧化劑洗液是用重鉻酸鉀(K2Cr2O7)和濃硫酸(H2SO4)配成。K2Cr2O7在酸性溶液中,有很強(qiáng)的氧化能力,對玻璃儀器又及少有侵蝕作用。所以這種洗液在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用最廣泛。這種洗液在使用時(shí)要切實(shí)注意不能濺到身上,以防“燒”破衣服和損傷皮膚。次用少量水沖洗剛浸洗過的儀器后,廢水不要倒在水池里和下水道里,長久會腐蝕水池和下水道,應(yīng)倒在廢液缸中。






堿性洗液



堿性洗液用于洗滌有油污物的儀器,用此洗液是采用長時(shí)間(24小時(shí)以上)浸泡法,或者浸煮法。從堿洗液中撈取儀器時(shí),要戴乳膠手套,以免燒傷皮膚。




以上這些一般性的洗滌方法,在面對大批量的待清洗瓶皿時(shí),都會展現(xiàn)出其不足之處,或極度浪費(fèi)水資源、或清洗時(shí)可能會對人體產(chǎn)生傷害、或需要長時(shí)間的浸泡,極度浪費(fèi)時(shí)間,那么有沒有什么辦法既可以保護(hù)清洗人員的安全,又可以在保障清洗質(zhì)量的情況下提升清洗效率呢?不妨來看看喜瓶者全自動洗瓶機(jī)吧!


 








相比于上文分享的幾種清洗方式,全自動洗瓶機(jī)在清洗方式的標(biāo)準(zhǔn)性、清洗結(jié)果的可驗(yàn)證性、儀器操作的安全性,還是清洗瓶皿的效率上,都勝于傳統(tǒng)清洗,主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:

  1. 清洗模式采用高溫噴淋程序化的模式,相比傳統(tǒng)清洗,破瓶率更低,清洗更標(biāo)準(zhǔn),人員安全性更高。

  2. 含35個(gè)內(nèi)置程序與100個(gè)自定義程序,既滿足生物、化學(xué)、醫(yī)療、質(zhì)檢、環(huán)境、食品、制藥、微生物、石油、化工、化妝品等不同行業(yè)的清洗需求、又可根據(jù)特殊要求自行設(shè)置清洗程序來滿足不同殘留物的清洗要求。

  3. 自帶的可視窗與可選配的電導(dǎo)率與打印機(jī)組件、實(shí)時(shí)監(jiān)測清洗情況,實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)的可驗(yàn)證與可追溯性。

  4. 模組模塊化設(shè)計(jì),單層可放置兩個(gè)模塊,在確保清洗數(shù)量的情況下,實(shí)現(xiàn)多種瓶皿清洗要求。



小結(jié)


使用全自動洗瓶機(jī)代替?zhèn)鹘y(tǒng)清洗,有利于實(shí)驗(yàn)室瓶皿清洗效率與清洗質(zhì)量的提升。助力實(shí)驗(yàn)室清洗走向標(biāo)準(zhǔn)化,自動化,批量化!


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